2022-011450

特願２０１８－５６５７８６「多重特異性抗体の精製」拒絶査定不服審判事件〔平成２９年１２月２１日国際公開、ＷＯ２０１７／２１８９７７、令和 １年 ８月 ８日国内公表、特表２０１９－５２１９８６〕について、次のとおり審決する。

結 論 本件審判の請求は、成り立たない。

理 由 第１ 手続の経緯 本願は、平成２９年 ６月１６日（パリ条約による優先権主張 ２０１６年 ６月１７日 （ＵＳ）アメリカ合衆国）を国際出願日とする出願であって、令和 ４年 ３月１６日付けで拒絶査定がなされ、これに対して、令和 ４年 ７月２２日に拒絶査定不服審判請求がなされるとともに手続補正がなされたものである。その後の当審における手続の経緯は、以下のとおりである。 令和 ６年 ３月１９日付け 拒絶理由通知書 令和 ６年 ８月２６日付け 意見書、手続補正書 第２ 本願発明 本願の請求項１～６３に係る発明は、令和 ６年 ８月２６日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１～６３に記載されたとおりのものであるところ、その請求項４４に係る発明は、次のとおりのものである（以下、「本願発明」という。）。なお、上記請求項４４は、令和 ６年 ３月１９日付け拒絶理由通知が対象とした、令和 ４年 ７月２２日付け手続補正書の請求項３７に対応する。 「【請求項４４】 マルチステップクロマトグラフィー方法で二重特異性抗体を精製するための方法であって、方法が、親和性クロマトグラフィーのステップを含み、２つの異なるマルチモーダルイオン交換クロマトグラフィーのステップが後に続き、 ここで、２つの異なるマルチモーダルイオン交換クロマトグラフィーが、マルチモーダルカチオン交換クロマトグラフィー及びマルチモーダルアニオン交換クロマトグラフィーであり、 それによって、二重特異性抗体を精製する、方法。」 第３ 当審で通知した拒絶の理由 令和 ６年 ３月１９日付けで当審が通知した拒絶理由のうち理由２（進歩性）の概要は、請求項３７～５４、５７に係る発明は、本願優先日前に頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった下記の引用文献４～７に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない、という理由を含むものである。 引用文献４：特表２０１４－５３４０５５号公報 引用文献５：特表２０１３－５２６８４８号公報 引用文献６：特表２０１５－５２７０６４号公報 引用文献７：特表２０１３－５３８２０４号公報 第４ 引用文献の記載事項 当審の拒絶理由で引用文献４として引用した、本願優先日前に頒布された刊行物である特表２０１４－５３４０５５号公報（以下、「引用文献４」という。）は、「クロマトグラフィー精製のための方法および装置」の発明を開示する特許文献で、以下の事項が記載されている（下線は合議体による。）。 ア．「【０２２１】 ５．ＰｒｏｔＡキャプチャー＋ミックスモードフロースルー 溶液の全成分の１０％（分析ＳＥＣによる）を構成する１．２５ｍｇ／ｍｌのモノクローナル抗体を有するモノクローナル抗体細胞培養溶液（ここで、ＨＣＰの量は抗体２５００００ｎｇ／ｍｇ（酵素免疫測定アッセイＣＨＯによる）であった）を、第１のモードにおいてＰｒｏｓｅｐ（登録商標）－ｖＡ Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ樹脂（カラムＡ１およびＡ２に類似する）、ならびに第２のモードにおいてＥｓｈｍｕｎｏ（商標） ＳおよびＦｒａｃｔｏｇｅｌ（登録商標）ＴＭＡＥ Ｈｉｃａｐ（カラムＢに類似する）上で、以下の条件下において精製した。クロマトグラフィー条件：第１のモード－１７．３ｍｌのＰｒｏｓｅｐ（登録商標）－ｖＡ Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ樹脂を１６×８．６ｍｍカラム中に充填した；カラムを次いで２０ｍＭのＮａＣｌを含有する２５ｍＭのＴＲＩＳバッファー（ｐＨ７．０）で３０ｍｌ／分（１０００ｃｍ／時間）において平衡化した。第２のモード－１６．７５ｍｌのＣａｐｔｏ（商標） Ａｄｈｅｒｅ樹脂を１６×７５ｍｍカラム中に充填し、１６．７５ｍｌのＣａｐｔｏ（商標） ＭＭＣ樹脂を１６×７５ｍｍカラム中に充填し、両方のカラムを１つの分離ユニットにおいて組み合わせた；この分離ユニットを次いで、５０ｍＭのＮａＣｌを含有する２５ｍＭのＴＲＩＳバッファー（ｐＨ７．４）で３０ｍｌ／分（１０００ｃｍ／時間）において平衡化した。試料を調製するために：モノクローナル抗体細胞培養溶液を、０．８μｍおよび０．２μｍの孔を有するデプスフィルターを通して濾過し、約１８ｍＳ／ｃｍの伝導率においてｐＨ７．２まで滴定した。２２０ｍｌの試料をＰｒｏｓｅｐ（登録商標）－ｖＡ Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙカラム上にロードし、カラムを次いで５００ｍＭのＮａＣｌを含有する２５ｍＭのＴＲＩＳバッファー（ｐＨ７．２）で洗浄した。流速を次いで３００ｃｍ／時間（１０ｍｌ／分）まで減少させ、１０カラム容積の、５０ｍＭのＮａＣｌを含有する５０ｍＭのグリシンバッファー（ｐＨ～４．０）（伝導率：約７．６ｍＳ／ｃｍ）で、Ｃａｐｔｏ（商標） Ａｄｈｅｒｅ／ Ｃａｐｔｏ（商標） ＭＭＣカラム上に抗体を溶離させた。１００ｍＭのＴＲＩＳバッファーによるインライン希釈を用いて、溶離溶液のｐＨ値を～７．２に保持した。貫流した画分は、６．１５ｍｇ／ｍｌの抗体を含有し、これは全成分の９９．９％（分析ＳＥＣによる）を構成し、ここでＨＣＰの量は、＜３０ｎｇ／ｍｇの抗体であった（酵素免疫測定アッセイＣＨＯによる）。溶離の後で、Ｐｒｏｓｅｐ（登録商標）－ｖＡ Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙカラムを０．１５ＭのＨ３ＰＯ４で、Ｃａｐｔｏ（商標） Ａｄｈｅｒｅ／ Ｃａｐｔｏ（商標） ＭＭＣカラムを１ＭのＮａＣｌおよび次いで１ＭのＮａＯＨでストリップした。」（【０２２１】） イ．「【０００７】 精製されるべきタンパク質と固定されたキャプチャー剤との間の特異的な構造的に依存的な（すなわち、空間的に相補的な）相互作用を利用するアフィニティークロマトグラフィーは、抗体などの幾つかのタンパク質についての標準的な精製の選択肢である。例えばプロテインＡは、Ｆｃ領域を含む抗体などのタンパク質のアフィニティークロマトグラフィーのために有用な吸着剤である。プロテインＡは、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅａｓからの４１ｋＤの細胞壁タンパク質であって、抗体のＦｃ領域に高いアフィニティー（ヒトＩｇＧに対して約１０－８Ｍ）で結合するものである。その一般的な用途にも関わらず、アフィニティークロマトグラフィーは、治療用タンパク質を精製するために必要な工業的な規模においては特に、高価である。」（【０００７】） ウ．「【００５７】 「ミックスモードイオン交換マトリックス」とは、カチオン性および／またはアニオン性ならびに疎水性の部分で共有的に修飾されているクロマトグラフィーマトリックスを指す。市販のミックスモードイオン交換樹脂は、シリカゲル固相支持マトリックスに付着した弱いカチオン交換基、低濃度のアニオン交換基、および疎水性リガンドを含有する、ＢＡＫＥＲＢＯＮＤ ＡＢＸ（商標）（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ．Ｊ．）である。ミックスモードカチオン交換マトリックスは、典型的には、カチオン交換基および疎水性部分を有する。好適なミックスモードカチオン交換マトリックスは、Ｃａｐｔｏ（登録商標）ＭＭＣ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）およびＥｓｈｍｕｎｏ（登録商標）ＨＣＸ（Ｍｅｒｃｋ）である。ミックスモードアニオン交換マトリックスは、典型的には、アニオン交換基および疎水性部分を有する。好適なミックスモードアニオン交換マトリックスは、Ｃａｐｔｏ（登録商標）Ａｄｈｅｒｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）である。」（【００５７】） エ．「【０１１０】 一態様において、装置は、１つのアフィニティークロマトグラフィーマトリックスを有する２つの分離ユニット、およびイオン交換、好ましくはカチオン交換マトリックスを有する１つの分離ユニットを含む。好適なアフィニティーマトリックスは、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＬまたはプロテインｒ官能基を有するマトリックスである（例えばＰｒｏｓｅｐ（登録商標）Ｈｉｇｈｃａｐ（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、Ｐｒｏｓｅｐ（登録商標）Ｕｌｔｒａ Ｐｌｕｓ（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、Ｐｏｒｏｓ（登録商標）Ｐｒｏｔ Ａ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、Ａ６５０Ｆ （Ｔｏｓｏｈ）、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（登録商標）Ｓｕｒｅ（ＧＥ））。」（【０１１０】） オ．「【０１１３】 全ての態様において、また、ミックスモードマトリックスは、イオン交換マトリックスならびにその組み合わせの代わりに用いることができる。一例は、アニオン交換官能基と疎水性官能基との組合せ（Ｃａｐｔｏ Ａｄｈｅｒｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、またはカチオン交換官能基と疎水性官能基との組み合わせ（Ｃａｐｔｏ （商標）ＭＭＣ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、Ｅｓｈｍｕｎｏ（登録商標）ＨＣＸ（Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ）、ＰＯＲＯＳ（登録商標）ＸＳ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）など）である。」（【０１１３】） カ．「【００３９】 用語「抗体」は、抗原に特異的に結合する能力を有するタンパク質を指す。典型的には、抗体は、２つの重鎖および２つの軽鎖からなる基本的な４ポリペプチド鎖構造を有しており、前記鎖は、例えば鎖間ジスルフィド結合により安定化されている。抗体は、モノクローナルであってもポリクローナルであってもよく、単量体形態で存在しても多量体形態で存在してもよく、例えば、五量体形態で存在するＩｇＭ抗体、および／または単量体、二量体もしくは多量体形態で存在するＩｇＡ抗体であってもよい。抗体はまた、多選択性抗体（例えば二選択性抗体）、および、それらがリガンド特異的結合ドメインを保持するかまたはそれを含むように改変される限り、抗体フラグメントを含んでもよい。」（【００３９】） キ．「【請求項１】 以下： － いずれも同じクロマトグラフィーマトリックスを有する２つの分離ユニットＡ１およびＡ２、ならびに、前記分離ユニットＡ１およびＡ２のクロマトグラフィーマトリックスとは異なるクロマトグラフィーマトリックスを有する分離ユニットＢ；全ての分離ユニットは流体入口および流体出口を有し、それにより、少なくとも前記分離ユニットＡ１の流体出口と前記分離ユニットＢの流体入口との間の流体接続、および前記分離ユニットＡ２の流体出口と前記分離ユニットＢの流体入口との間の流体接続が存在する、 － 前記分離ユニットＡ１の出口と前記分離ユニットＢの流体入口との間の流体連通と、前記分離ユニットＡ２の出口と前記分離ユニットＢの流体入口との間の流体連通との間で切り替えることを可能にする、分離ユニットＡ１およびＡ２と分離ユニットＢとの間の流体接続における少なくとも１つの弁、 － 少なくとも２つのバッファーリザーバ、および少なくとも２つのポンプ、 － 試料溶液を含むリザーバであって、前記分離ユニットＡ１およびＡ２の入口と流体接続にある、前記リザーバ、 を含む装置。 【請求項２】 分離ユニットＡ１およびＡ２が、アフィニティークロマトグラフィー、カチオン交換、ミックスモードカチオン交換またはアニオン交換クロマトグラフィーマトリックスを有することにより特徴づけられる、請求項１に記載の装置。 【請求項３】 分離ユニットＢが、カチオン交換、ミックスモードアニオン交換またはアニオン交換クロマトグラフィーマトリックスを有することにより特徴づけられる、請求項１または２に記載の装置。 【請求項４】 分離ユニットＡ１およびＡ２がアフィニティークロマトグラフィーマトリックスを有し、分離ユニットＢがカチオン交換、ミックスモードアニオン交換またはアニオン交換クロマトグラフィーマトリックスを有することにより特徴づけられる、請求項１～３のいずれか１項に記載の装置。 【請求項５】 分離ユニットＡ１およびＡ２がカチオン交換またはミックスモードカチオン交換クロマトグラフィーマトリックスを有し、分離ユニットＢがアニオン交換またはミックスモードアニオン交換クロマトグラフィーマトリックスを有することにより特徴づけられる、請求項１～３のいずれか１項に記載の装置。 【請求項１０】 請求項１～９のいずれか１項に記載の装置を用いて、試料中の１または２以上の不純物から標的分子を精製する方法であって、以下のステップ： － 試料が分離ユニットＡ１上にロードされる間に（ここで、試料は、標的分子が分離ユニットＡ１に結合することを可能にする第１のｐＨおよび伝導率にある）、分離ユニットＡ２は、その時間の少なくとも一部において、分離ユニットＡ２上にロードされた標的分子が分離ユニットＢ上に溶離して分離ユニットＡ２が再平衡化されるように、分離ユニットＢと流体連通にあるように、ならびに、試料が分離ユニットＡ２上にロードされる間に（ここで、試料は、標的分子が分離ユニットＡ２に結合することを可能にする第１のｐＨおよび伝導率にある）、分離ユニットＡ１は、その時間の少なくとも一部において、分離ユニットＡ１上にロードされた標的分子が分離ユニットＢ上に溶離し、分離ユニットＡ１が再平衡化されるように、分離ユニットＢとの流体連通にあるように、試料を分離ユニットＡ１およびＡ２上に交互にロードすること、 － 分離ユニットＢの流体出口から標的分子を回収すること、 を含む、前記方法。 【請求項１１】 標的分子が抗体であることにより特徴づけられる、請求項１０に記載の方法。」（特許請求の範囲） 当審の拒絶理由で引用文献５として引用した、本願優先日前に頒布された刊行物である特表２０１３－５２６８４８号公報（以下、「引用文献５」という。）には、ＡＮＧ－２及びＶＥＧＦに結合する二重特異性抗体が記載されている（特許請求の範囲、等）。 当審の拒絶理由で引用文献６として引用した、本願優先日前に頒布された刊行物である特表２０１５－５２７０６４号公報（以下、「引用文献６」という。）には、ＡＮＧ－２及びＶＥＧＦに結合する二重特異性抗体が記載されている（特許請求の範囲、等）。 当審の拒絶理由で引用文献７として引用した、本願優先日前に頒布された刊行物である特表２０１３－５３８２０４号公報（以下、「引用文献７」という。）には、ノブインホール二重特異性抗体が記載されている（特許請求の範囲、図２、【００５８】、等）。 上記記載事項イ．、エ．から、上記記載事項ア．中の「Ｐｒｏｓｅｐ（登録商標）－ｖＡ Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ樹脂」は、「アフィニティークロマトグラフィーマトリックス」であり、上記記載事項ア．中の「Ｐｒｏｓｅｐ（登録商標）－ｖＡ Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙカラム」は、「アフィニティークロマトグラフィー」である。 上記記載事項ウ．、オ．から、上記記載事項ア．中の「Ｃａｐｔｏ（商標） Ａｄｈｅｒｅ樹脂」は、「ミックスモードアニオン交換マトリックス」であり、上記記載事項ア．中の「Ｃａｐｔｏ（商標） ＭＭＣ樹脂」は、「ミックスモードカチオン交換マトリックス」であり、上記記載事項ア．中の「Ａｄｈｅｒｅ／ Ｃａｐｔｏ（商標） ＭＭＣカラム」は、ミックスモードアニオン交換クロマトグラフィー／ミックスモードカチオン交換クロマトグラフィーである。 よって、上記記載事項ア．～オ．及びキ．によると、引用文献４には、「モノクローナル抗体を精製するための方法であって、 方法が、アフィニティークロマトグラフィーのステップを含み、ミックスモードアニオン交換クロマトグラフィー／ミックスモードカチオン交換クロマトグラフィーが後に続き、 それによって、モノクローナル抗体を精製する、方法。」の発明（以下、「引用発明」という。）が記載されていると認められる。 第５ 対比 本願発明と引用発明とを対比すると、引用発明の「アフィニティークロマトグラフィー」は、本願発明の「親和性クロマトグラフィー」に相当し、引用発明の「ミックスモードカチオン交換クロマトグラフィー」は、本願発明の「マルチモーダルカチオン交換クロマトグラフィー」に相当し、引用発明の「ミックスモードアニオン交換クロマトグラフィー」は、本願発明の「マルチモーダルアニオン交換クロマトグラフィー」に相当する。 そして、引用発明の「ミックスモードアニオン交換クロマトグラフィー／ミックスモードカチオン交換クロマトグラフィー」は、２つの異なるマルチモーダルイオン交換クロマトグラフィーであり、マルチモーダルカチオン交換クロマトグラフィー及びマルチモーダルアニオン交換クロマトグラフィーであると認められる。 また、引用発明は、アフィニティークロマトグラフィーのステップ、ミックスモードアニオン交換クロマトグラフィー／ミックスモードカチオン交換クロマトグラフィーのステップを含むから、マルチステップクロマトグラフィー方法であると認められる。 そうすると、本願発明と引用発明とは、「マルチステップクロマトグラフィー方法で抗体を精製するための方法であって、方法が、親和性クロマトグラフィーのステップを含み、２つの異なるマルチモーダルイオン交換クロマトグラフィーのステップが後に続き、 ここで、２つの異なるマルチモーダルイオン交換クロマトグラフィーが、マルチモーダルカチオン交換クロマトグラフィー及びマルチモーダルアニオン交換クロマトグラフィーであり、 それによって、抗体を精製する、方法。」である点で一致し、本願発明は、二重特異性抗体を精製するのに対し、引用発明は、モノクローナル抗体を精製する点で相違する。 第６ 当審の判断 以下、上記相違点について検討する。 引用文献４には、精製する「抗体」として、二選択性抗体が含まれることが記載されている（上記記載事項カ．）から、引用発明において、モノクローナル抗体の代わりに、二重特異性抗体、例えば、引用文献５～７に記載されているような周知の二重特異性抗体を精製することは、当業者が容易に想到し得ることである。 そして、本願明細書をみても、精製する「抗体」が二重特異性抗体の場合に特有の格別顕著な効果があるとは認められない。このことは、引用文献４に記載された精製方法が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二選択性抗体などいずれの抗体にも適用可能なものとされていること（上記記載事項カ．）とも矛盾しない。 したがって、本願発明は、引用文献４～７に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものである。 第７ 審判請求人の主張 審判請求人は、令和 ６年 ８月２６日付け意見書において、以下のア．～ウ．の点を主張しているので、以下この点について検討する。 ア．補正後請求項全てにおいて、「第１の混合モードクロマトグラフィー」は「カチオン交換混合モードクロマトグラフィー」「第２の混合モードクロマトグラフィー」は「アニオン交換混合モードクロマトグラフィー」であるとする限定を行った。 イ．引用文献４は、混合モードクロマトグラフィーが好ましいことや、２つの異なる混合モードクロマトグラフィーの方法（すなわち、アニオン交換及びカチオン交換）が好ましいことについて、何ら記載も示唆もしていない。特に、引用文献４の段落【０１１４】には、「図１は、本発明による装置の好ましい態様を示す。カラムＡ１およびＡ２は、「ＣＩＥＸ」と称され、これら２つのカラムが、同じクロマトグラフィーマトリックス、例えばカチオン交換樹脂を有することを示している。カラムＢは、ＡＩＥＸと称され、このカラムがアニオン交換クロマトグラフィーマトリックスを有してもよいことを示唆する」等と記載されている。 よって、引用文献４の図１によれば、引用文献４は２つの異なる混合モードアニオン／カチオン交換クロマトグラフィーを行うことが好ましいことは記載も示唆もしていない。 ウ．何れの引用文献も、２つの異なる混合モードイオン交換クロマトグラフィーの組み合わせが好ましいことについて、ましてや、具体的な組み合わせ（混合モードカチオン交換クロマトグラフィー、及びその後の混合モードアニオン交換クロマトグラフィー）が不純物の除去に顕著な効果を奏することについて、何ら教示も示唆もしていない。 主張ア．について 本願の請求項４４に係る発明には、「第１の混合モードクロマトグラフィー」は「カチオン交換混合モードクロマトグラフィー」、「第２の混合モードクロマトグラフィー」は「アニオン交換混合モードクロマトグラフィー」であるとする限定はないから、審判請求人の上記主張ア．は失当である。 主張イ．について 引用文献４には、混合モードクロマトグラフィーを使用することが記載されており（上記記載事項ア．、ウ．、オ．、キ．）、また、２つの異なる混合モードクロマトグラフィーを組み合わせて使用することも記載されている（上記記載事項ア．、キ．）から、審判請求人の上記主張イ．は採用できない。 主張ウ．について 本願の請求項４４に係る発明は、不純物を含む組成物から精製する方法であることを特定して記載していないし、また、不純物が、非対抗体のアーム、凝集体、高分子量種（ＨＭＷＳ）、低分子量種（ＬＭＷＳ）、酸性バリアント、塩基性バリアントなどの不純物であることも特定して記載されていない。 また、引用文献４には、ＨＣＰ（宿主細胞タンパク質）などの不純物を除去することができたことが記載されている（上記記載事項ア．）から、審判請求人が主張する本願発明の効果は、引用文献４の記載から、当業者が予測することができる範囲の効果である。 したがって、審判請求人の上記主張ウ．は採用できない。 第８ むすび 以上のとおり、本願の請求項４４に係る発明は、引用文献４～７に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないので、本願は、他の請求項について検討するまでもなく、拒絶すべきものである。 よって、結論のとおり審決する。