2023-011343

特願２０２１－５３３５４２「容積測定ローディング流量を低減し、そして結合及び溶出クロマトグラフィー精製の生産性を増大するためのインライン生成物濃縮」拒絶査定不服審判事件〔令和 ２年 ６月２５日国際公開、ＷＯ２０２０／１３１２４６、令和 ４年 ２月 ８日特許出願公表、特表２０２２－５１３４６３〕について、次のとおり審決する。

結 論 本件審判の請求は、成り立たない。

理 由 第１ 手続の経緯 本願は、２０１９年１１月１１日（パリ条約による優先権主張 ２０１８年１２月２０日 （ＵＳ）アメリカ合衆国）を国際出願日とする出願であって、その主な手続の経緯は以下のとおりである。 令和４年 ６月２９日付け 拒絶理由通知書 令和５年 １月 ５日 意見書、手続補正書の提出 同 年 ２月２８日付け 拒絶査定 同 年 ７月 ６日 審判請求書、手続補正書の提出 同 年 ８月１６日 手続補正書（方式）（請求の理由の補正）の提出 令和６年 ２月２７日 上申書の提出 第２ 令和５年７月６日付け手続補正についての補正却下の決定 ［補正却下の決定の結論］ 令和５年７月６日付けの手続補正を却下する。 ［理由］ １．補正の内容 本件補正により、特許請求の範囲の請求項１の記載は、 （補正前）「【請求項１】 目的の生体分子及び不純物を含むサンプルを精製するための方法であって、目的の生体分子をバイオリアクターにおいて発現させて目的の生体分子及び不純物を含む生成物サンプルを形成すること；前記生成物サンプルを清澄化操作に供し、得られた清澄化された生成物を、シングルパス接線流濾過に供して濃縮生成物サンプルを形成すること；並びに前記濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供して前記濃縮生成物サンプルから不純物を取り除くことを含み、 生成物サンプルがアフィニティクロマトグラフィーカラムのすぐ上流にあるシングルパス接線流濾過に供されるか、または 当該方法が前記濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供する直前にある無菌濾過に供することをさらに含み、かつ、当該生成物サンプルが無菌濾過に供する直前にあるシングルパス接線流濾過に供される、方法。」 から、 （補正後）「【請求項１】 目的の生体分子及び不純物を含むサンプルを精製するための方法であって、目的の生体分子をバイオリアクターにおいて発現させて目的の生体分子及び不純物を含む生成物サンプルを形成すること；前記生成物サンプルを清澄化操作に供し、得られた清澄化された生成物を、生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らすシングルパス接線流濾過に供して濃縮生成物サンプルを形成すること；並びに前記濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供して前記濃縮生成物サンプルから不純物を取り除くことを含み、 生成物サンプルがアフィニティクロマトグラフィーカラムのすぐ上流にあるシングルパス接線流濾過に供されるか、または 当該方法が前記濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供する直前にある無菌濾過に供することをさらに含み、かつ、当該生成物サンプルが無菌濾過に供する直前にあるシングルパス接線流濾過に供される、方法。」（以下、「本件補正発明」という。） に補正された。（下線部は補正箇所である。） ２．補正の適否 本件補正は、「濃縮生成物サンプルを形成する」際に供される「シングルパス接線流濾過」について、本願の願書に添付した明細書（以下、「本願明細書」という。）の段落００１５の「特定の実施形態において、インライン生成物濃縮は、捕捉クロマトグラフィーの上流のシングルパス接線流濾過などによって、実施される。インライン濃縮を加えることは、割り当てられた処理時間に影響を与えず、より低い体積流速にて操作する（同じ時間の長さにおいてより少ない体積を処理する）ことを可能にする。さらに、インライン濃縮は同時に生成物濃縮を上げるので、比例して体積が減少する間、生成物質量流速は変わらない。」（下線は当審で付した。）との記載に基づき、「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らすシングルパス接線流濾過」に限定するものである。 そして、補正前の請求項１に記載された発明と補正後の請求項１に記載される発明は、産業上の利用分野及び解決しようとする課題が同一である。 よって、本件補正は、特許法第１７条の２第５項第２号に掲げる特許請求の範囲の限定的減縮を目的とするものを含むと認められる。 そこで、本件補正により補正された特許請求の範囲の請求項１に記載された事項により特定される発明が、特許出願の際独立して特許を受けることができるものであるか（特許法第１７条の２第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に適合するか）（以下、「独立特許要件」という。）について、以下で検討する。 ３．独立特許要件の検討 （１）特許法第２９条第２項（いわゆる進歩性の欠如）について ア 引用文献の記載 原査定の拒絶の理由で引用された、本願優先日前に頒布された刊行物であるＭｅｒｃｋ ＫＧａＡ， Ｗｈｉｔｅ Ｐａｐｅｒ， Ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ ｆｌｏｗ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ， ａ ｖｅｒｓａｔｉｌｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｔｒｅａｍｌｉｎｅ ｂｉｏｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ， Ｎｏｖ－２０１８， Ｌｉｔ． Ｎｏ． ＭＫ＿ＷＰ２７８７ＥＮ Ｖｅｒ． １．０， ｐ．１－８（以下、「引用文献」という。）には、以下の事項が記載されている。なお、引用文献は英文であるため、以下では当審による訳文を示す。また、下線は当審合議体が付加した。 （ア）１ページ 「シングルパス接線流濾過は、バイオ製造を効率化するアプリケーションである。 バイオ医薬品業界の現在の傾向は、製造効率と製品品質を犠牲にすることなくコストとフットプリントを削減できる高い容量プロセスの導入を推進している。バイオ製造プロセスにおいてこのような利便性を実現するステップは、シングルパス接線流濾過（シングルパスＴＦＦ）による限外濾過である。 シングルパスＴＦＦは、下流処理内のさまざまなステップでモノクローナル抗体、治療用タンパク質、ワクチンの精製に使用されてきた既存のＴＦＦ技術を強化したアプローチである。このＴＦＦモードでは、供給物溶液が直列に配置された一連のフィルターに一度送られ、透過液と濃縮された保持液が生成される。シングルパスＴＦＦのワンススルーフローパスには、フットプリント、せん断露出、作業量とホールドアップ量が削減されるという利点があり、結果としてプラントの生産性が向上する。 シングルパスＴＦＦで解決できる処理上の課題には、 ・タンク容量を超えて増加するプール容量 ・限定された工場床面積 ・高希釈のため達成できない目標濃度 がある。 シングルパスＴＦＦのバイオ製造プロセスへの組み込みは、既存のＰｅｌｌｉｃｏｎ（Ｒ）カセットを使用すると簡単に達成される。Ｍｅｒｃｋの実績あるＰｅｌｌｉｃｏｎ（Ｒ）カセットの幅広い種類は、ユーザーが設定できるシングルパスＴＦＦ機能と、幅広い分子および変換ターゲットへの適用性を提供する。」 （引用文献では、「Ｐｅｌｌｉｃｏｎ（Ｒ）」の「（Ｒ）」は「○にＲ」で記載されているが、システム上の制約で表示できないため「（Ｒ）」として記載した。以下も同様である。） （イ）２ページ左欄～右欄（「Ｗｈａｔ ｉｓ ｓｉｎｇｌｅ－ｐａｓｓ ＴＦＦ」の項） 「シングルパスＴＦＦとは 従来のＴＦＦは、バッチモードで動作し、並列に組み立てられたフィルターを通して供給物／保持液を再循環させ、目的の変換が達成されるまで続く（図１Ａ、以降バッチＴＦＦと呼ぶ。）。シングルパスＴＦＦは、この濾過プロセスに対する別のアプローチである。この方法では、より長い供給物チャネルパスを使用して、１回のポンプパスで目的の変換を達成する（図１Ｂ）。再循環ループがないため、保持液は下流に流れ、ホールドアップ量が削減され、プールタンクの必要性がなくなり、連続処理が可能になる。 シングルパスＴＦＦでは、膜上での供給物滞留時間が長くなるため、製品の変換が向上する。直列に構成されたカセットは、同じ総膜面積で並列に構成されたカセットよりも供給物チャネルの流路が長くなる。これにより、供給物の滞留時間が長くなり、透過効率が向上するため、１度のポンプ通過後に高い濃縮係数（１０倍超）を達成できる。 供給物滞留時間は、安定した低供給物流速（バッチＴＦＦの約１／１０）でも制御される。たとえば、供給物流速０．５Ｌ／分／ｍ２により供給物量０．３Ｌ／ｍ２で稼働すると、滞留時間は約３５秒になる。供給物流速が低い場合（０．５Ｌ／分／ｍ２未満）、滞留時間が長くなり、それに応じて１回の通過後の保持液濃度が高くなる（図２）。」 （ウ）２ページ 図１ 「 ［図：0001426242000001.jpg］ 図１ 従来のバッチＴＦＦ（Ａ）の並列構成と比較して、シングルパスＴＦＦ（Ｂ）は、フィルターを１回通過した後に濃縮された保持液を生成するため、スペースを制限する再循環ループが不要になる。」 （なお、説明文中の「保持液」は図中の「Ｒｅｔｅｎｔａｔｅ」の訳語にあたる。） （エ）２ページ 図２ 「 ［図：0001426242000002.jpg］ 図２ 供給物流速が低い場合、供給物の滞留時間が長くなり、結果として保持液の濃度が高くなる。」 （オ）３ページ左欄～右欄（「Ｖｅｒｓａｔｉｌｉｔｙ ｉｎ ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ」の項） 「生物製剤の製造において、シングルパスＴＦＦはインライン容量削減を可能にし、タンク要件の削減、後続のステップの規模の縮小、脱塩のためのインラインバッファー添加による濃縮、高い最終濃度と高い製品回収率の促進を実現する。シングルパスＴＦＦの設置面積が小さいため、バイオ製造プロセス内の容量削減が必要な場所であればどこでも、カラムクロマトグラフィーステップの前後や最終的な濃縮および処方時など、インライン濃縮ステップを簡単に導入できる （図３）。」 （カ）３ページ 図３ 「 ［図：0001426242000003.jpg］ （各ステップの訳語は、左からバイオリアクター、清澄化、プロテインＡ捕捉、ウイルス不活化、深層濾過、陽イオン交換精製、陰イオン交換精製、ウイルス除去、濃縮・透析濾過、最終濾過。） ・強化された捕捉：より高速なロード；低力価で高容量の製品プールを濃縮して下流の生産性を向上する。 ・工程内容積削減：プールタンクの制約を克服するために、拡大した製品容積を濃縮する。 ・強化研磨：強化研磨によりカラムの生産性とプロセス経済性が向上する。 ・最終限外濾過：より高い最終濃度とより高い収量を達成する。 図３ シングルパスＴＦＦは、バイオ製造プロセス内のどこにでも組み込まれ、量の課題に対処できる。」 （なお、図の矢印と図の下部にある項目の説明は色分けされており、項目の１番目は一番左の矢印と同じ赤色、項目の２番目は左から２、４、６番目の矢印と同じ桃色、項目の３番目は左から３、５番目の矢印と同じ緑色、そして項目の４番目は一番右の矢印と同じ青色である。） （キ）４ページ 左欄（「Ｂｅｆｏｒｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ」の項） 「クロマトグラフィー前 カラムクロマトグラフィー前のインライン濃縮により、ローディングが高速化され、カラムの収容能力が増大し、プラントの稼働率と生産性が向上する（図４Ａ）。プロテインＡ前シングルパスＴＦＦは、収穫後のタンクサイズが制限されている場合に、カラムローディング時間を短縮し、製造プロセスのボトルネックを解消するために、低力価の分子を大量に処理するのに最適である。 さらに、イオン交換クロマトグラフィー前のシングルパスＴＦＦにより、ポリッシングステップの効率が向上する。ポリッシングを強化すると、ｐＨと導電率を調整するための希釈要件が軽減され、最終的にはカラムの生産性が向上し、消耗品の使用が削減され、プロセスの経済性が向上する。」 （ク）４ページ 図４Ａ 「 ［図：0001426242000004.jpg］ 」 イ 周知例の記載 （ア） 周知例１の記載 本願優先日前に日本国内又は外国において頒布された刊行物である国際公開第２０１５／１９５４５３号（以下、「周知例１」という。）には、以下の事項が記載されている。 なお、周知例１は英語で記載されているので、訳文で示す。 ａ 請求の範囲 「１．以下の工程を含む、標的タンパク質を非標的タンパク質から分離するためのプロセス。 ａ）標的タンパク質および非標的タンパク質を含有する液体試料を得る工程； ｂ）試料中の標的タンパク質および非標的タンパク質の濃度を増加させてクロマトグラフィー装置に送達するための濃縮供給物を生成する工程； ｃ）濃縮供給物をクロマトグラフィー装置に送達する工程； ｄ）クロマトグラフィー装置内の非標的タンパク質から標的タンパク質を分離する工程； ｅ）クロマトグラフィー装置から標的タンパク質を回収する。 ２．試料中の標的タンパク質および非標的タンパク質の濃度は、接線流濾過（ＴＦＦ）プロセスを使用して増加される、請求項１に記載の方法 ３．ＴＦＦプロセスは、シングルパスＴＦＦ（ＳＰＴＦＦ）または再循環ＴＦＦプロセスである、請求項２に記載のプロセス …… ７．クロマトグラフィー装置が、１）陰イオン交換クロマトグラフィー媒体又は疎水性相互作用クロマトグラフィー媒体；２）サイズ排除クロマトグラフィー媒体；３）耐塩性膜吸着剤；または４）アフィニティークロマトグラフィー媒体を含む、請求項１又は請求項２に記載の方法。 …… １６．アフィニティークロマトグラフィー媒体が、プロテインＡ媒体、プロテインＧ媒体、または固定化金属イオン媒体である、請求項７に記載の方法。 ……」 ｂ 段落００２４ 「典型的には、クロマトグラフィー装置（例えば、クロマトグラフィーカラム、クロマトグラフィーカートリッジ）はクロマトグラフィー媒体に基づいて選択する。当業者は、特定の標的タンパク質の分離／精製に適したクロマトグラフィー媒体を容易に決定することができる。典型的な分離媒体（例えば、クロマトグラフィー樹脂、クロマトグラフィービーズ、クロマトグラフィー膜、クロマトグラフィー繊維）は……アフィニティークロマトグラフィー媒体（プロテインＡ親和性媒体、プロテインＧ親和性媒体、固定化金属イオン親和性媒体）、及び混合モード媒体を含むが、これらに限定されない。」 ｃ 実施例２（段落００３４～００３５） 「［００３４］ 実施例２：プロテインＡアフィニティークロマトグラフィー前の液体供給物の濃縮は、クロマトグラフィー媒体のコストを低減する。 ［００３５］ ＰｒｏＳｅｐ （Ｒ） Ｕｌｔｒａ Ｐｌｕｓ （ＰＵＰ）培地（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）という、プロテインＡベースの親和性クロマトグラフィー媒体について、結合－溶出プロセスのためのクロマトグラフィー媒体のコストにおける、ＳＰＴＦＦにより液体供給サンプルを濃縮することによる効果を計算した。結果は、ＳＰＴＦＦ（図３）を使用して、液体フィード内のタンパク質濃度を約５ｇ／Ｌに増加させることによって、ＰＵＰ媒体１グラム当たりのコストが有意に低減されたことを示している。」 （イ） 周知例２の記載 本願優先日前に日本国内又は外国において頒布された刊行物である特表２０１５－５２２０１９号公報（以下、「周知例２」という。）には、以下の事項が記載されている。 ａ 特許請求の範囲 「【請求項１】 標的分子を精製するための方法であって、 （ａ）標的分子および１種類以上の不純物を含むサンプルを提供する工程と、 （ｂ）サンプルに少なくとも１種類の沈殿剤を加え、１種類以上の不純物を除去し、これによって、浄化されたサンプルを回収する工程と、 （ｃ）工程（ｂ）から得た浄化されたサンプルに対し、少なくとも２種類の分離ユニットを含む結合および溶出のクロマトグラフィー工程を行い、これによって、標的分子を含む溶出物を得る工程と、 （ｄ）溶出物に対し、２種類以上の媒体の使用を含むフロースルー精製を行う工程と を含み、少なくとも２つの工程が、これらの経過時間の少なくとも一部で同時に行われ、方法が、１つの結合および溶出のクロマトグラフィー工程のみを含む、方法。 …… 【請求項１６】 （ｃ）の結合および溶出のクロマトグラフィー工程は、プロテインＡアフィニティクロマトグラフィーを使用する、請求項１に記載の方法。 【請求項１７】 プロテインＡアフィニティクロマトグラフィーは、硬質親水性ポリビニルエーテルポリマー、孔径が制御されたガラスおよびアガロースからなる群から選択されるマトリックスに接続したプロテインＡリガンドを使用する、請求項１６に記載の方法。 …… 【請求項４５】 サンプルから標的分子を精製するための方法であって、 （ａ）細胞培養物を含むバイオリアクターを提供する工程と、 （ｂ）バイオリアクターに沈殿剤を加え、１種類以上の不純物を除去し、これによって浄化されたサンプルを得る工程と、 （ｃ）浄化されたサンプルを、少なくとも２種類の分離ユニットを使用するプロテインＡアフィニティクロマトグラフィー工程に連続的に移し、これによって溶出物を得る工程と、 （ｄ）溶出物を１種類以上のウイルス不活性化剤と混合するために、工程（ｃ）から得た溶出物を、インラインスタティックミキサまたは調整槽に連続的に移す工程と、 （ｅ）フロースルーモードの溶出物を活性炭と接触させ、続いてアニオン交換クロマトグラフィー媒体と接触させ、続いてインラインスタティックミキサおよび／または調整槽と接触させてｐＨを変え、続いてカチオン交換クロマトグラフィー媒体と接触させ、続いてウイルス濾過媒体と接触させることを含む、工程（ｄ）の後の溶出物を、フロースルー精製操作に連続的に移す工程と、 （ｆ）工程（ｅ）から得たフロースルーサンプルを、望ましいバッファー中、望ましい濃度で配合する工程と を含み、処理工程は、互いに流体連結するように接続し、この結果、サンプルがひとつの処理工程から次の処理工程へと連続して流れることができ、および（ｂ）から（ｆ）の少なくとも２つの処理工程が、これらの経過時間の少なくとも一部で同時に行われる、方法。 【請求項４６】 サンプルから標的分子を精製するための方法であって、 （ａ）細胞培養物を含むバイオリアクターを提供する工程と、 （ｂ）バイオリアクターに沈殿剤を加え、１種類以上の不純物を除去し、これによって、浄化されたサンプルを得る工程と、 （ｃ）浄化されたサンプルに、塩、洗剤、界面活性剤およびポリマーからなる群から選択される１種類以上の添加剤を加える工程と、 （ｄ）浄化されたサンプルに対し、少なくとも２種類の分離ユニットを使用するプロテインＡアフィニティクロマトグラフィー工程を行い、これによって溶出物を得る工程と、 （ｅ）工程（ｄ）から得た溶出物を、インラインスタティックミキサまたは調整槽を用いてウイルス不活性化薬剤にさらす工程と、 （ｆ）フロースルーモードの溶出物を活性炭と接触させ、続いてアニオン交換クロマトグラフィー媒体と接触させ、続いてインラインスタティックミキサおよび／または調整槽と接触させてｐＨを変え、続いてカチオン交換クロマトグラフィー媒体と接触させ、続いてウイルス濾過媒体と接触させることを含む、ウイルス不活性化後の溶出物をフロースルー精製操作に接触させる工程と、 （ｇ）工程（ｆ）から得たフロースルーサンプルを、望ましいバッファー中、望ましい濃度で配合する工程と を含み、処理工程は、互いに流体連結するように接続し、この結果、サンプルがひとつの処理工程から次の処理工程へと連続して流れることができ、および（ｂ）から（ｇ）の少なくとも２つの処理工程が、これらの経過時間の少なくとも一部で同時に行われる、方法。 ……」 ｂ 実施例７（段落０３１６～０３２４） 「【０３１６】 ［実施例７］ 活性炭を用いたアフィニティ捕捉溶出物からの可溶性および不溶性の不純物の同時除去 この代表的な実験では、活性炭は、セルロース媒体に充填されると、プロテインＡの結合および溶出のクロマトグラフィー工程（即ち、捕捉工程）からの溶出物から得た不溶性（即ち、粒状）および可溶性の不純物を除去することができることを示した。 【０３１７】 今日、産業で使用される多くの従来の方法では、プロテインＡアフィニティ捕捉工程の後、多くは、デプスフィルタを使用し、典型的にはカチオン交換の結合および溶出のクロマトグラフィー工程である次の工程の前に不溶性不純物（即ち、粒状物）を除去する。 【０３１８】 本明細書に記載する方法では、プロテインＡの結合および溶出のクロマトグラフィーの後のデプスフィルタの使用が必要ない。顕著なことに、プロテインＡの結合および溶出のクロマトグラフィー工程の後に活性炭を用いることによって、カチオン交換の結合および溶出のクロマトグラフィー工程の必要性がなくなるだけではなく、デプスフィルタを使用する必要性もなくなる。このことは、例えば、典型的に使用される工程を省くため、全体的な費用の低下、処理時間および全体的な物理的なフットプリントの低下を含む多くの利点を与える。 【０３１９】 本明細書に示すように、活性炭の使用によって、可溶性の不純物（例えば、ＨＣＰ）および不溶性の不純物（例えば、粒状物）の両方を同時に除去する。 【０３２０】 モノクローナル抗体ＭＡｂ０４の細胞培養物に対し、プロテインＡアフィニティクロマトグラフィーを行い、本方法の次の工程に適した溶液状態を変えるために、１．０Ｍトリス塩基を滴下し、溶出プールのｐＨを４．８から７．５に調整する。しかし、溶液のｐＨを上げると、濁度が上がり、この場合には、２８．７ＮＴＵであると測定される。この溶液は、以下、ＭＡｂ０４プロテインＡ溶出物と呼ぶ。 【０３２１】 直径が５／８インチ、厚みが５ｍｍの活性炭－セルロース媒体のシートの円板部分を切断し、注意深く、直径が１５ｍｍのＯｍｎｉｆｉｔ（登録商標）Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ｃｏｌｕｍｎｓ（ＳＫＵ：００６ＢＣＣ－２５－１５－ＡＦ．Ｄｉｂａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ．Ｉｎｃ．、Ｄａｎｂｕｒｙ、ＣＴ０６８１０ ＵＳＡ）にのせ、カラム容積０．８９ｍＬを得る。カラムに、２５ｍＭトリス（ｐＨ７）を流す。約４０ｍＬの濁ったＭＡｂ０４プロテインＡ溶出物を流速０．２０ｍＬ／分でカラムに流し、滞留時間４．５分を得る。４つの１０ｍＬのフラクションを集める。それぞれの個々のフラクションと、すべての４つのフラクションで構成される合わせたプールについて、濁度を評価し、ＨＣＰおよびＭＡｂの濃度を分析する。Ｃｙｇｎｕｓ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓｏｕｔｈｐｏｒｔ．ＮＣ．ＵＳＡから市販されるカタログ番号Ｆ５５０のＥＬＩＳＡキットを用い、キット製造業者のプロトコルに従ってＨＣＰ分析を行う。Ｐｏｒｏｓ（登録商標）Ａ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ分析カラムを取り付けたＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣシステムを用い、ＭＡｂ濃度を測定する。結果を表Ｖにまとめている。 【０３２２】 この結果は、活性炭が、予想できないことに、プロテインＡ溶出物からの不溶性不純物（即ち、粒状物質）および可溶性不純物（即ち、ＨＣＰ）の両方の同時除去に有効であることを示す。プロテインＡ溶出物の濁度は、２８．７ＮＴＵから９．９ＮＴＵに低下し、一方、ＨＣＰの濃度は、７５８ｐｐｍから１０４ｐｐｍまで低下する。 【０３２３】 この結果は、活性炭が、セルロース媒体に充填されたとき、可溶性不純物および不溶性不純物の両方を除去するために使用することができることを示す。 【０３２４】 【表５】 ［図：0001426242000005.jpg］ 」 ウ 引用発明及び対比 引用文献は、シングルパス接線流濾過の装置とそのバイオ製造への適用方法を記載した販売会社の製品パンフレットと認められ、当該引用文献の「バイオプロセスにおける多用途性」の項目において、図３を引用しながら、シングルパス接線流濾過の設置箇所について「カラムクロマトグラフィーステップの前後や最終的な濃縮および処方時など」を例示している。そして、当該図３にバイオリアクター、清澄化、プロテインＡ捕捉、ウイルス不活化、深層濾過、陽イオン交換精製、陰イオン交換精製、ウイルス除去、濃縮・透析濾過、及び最終濾過のステップを含む生物製剤の製造プロセスが図示されるとともに、シングルパス接線流濾過の導入箇所が矢印で示されていること、また、図示されるステップの中で生物製剤成分が生成されるのは一番左にあるバイオリアクターのステップのみであって、これが最初のステップにあたること、一番右にあるステップである最終濾過が最後のステップにあたると理解するのが自然であることを踏まえると、図３の生物製剤の製造プロセスにおいて、各ステップは左から右へと順次進行すると解すべきものといえる（ア（オ）～（カ））。 また、図３において矢印で示されるシングルパス接線流濾過の導入箇所は、以下の図 「 ［図：0001426242000006.jpg］ 」 で示される「プロテインＡ捕捉」、「陽イオン交換精製」及び「陰イオン交換精製」のステップの直前直後と、シングルパス接線流濾過と同じ図で示される「濃縮・透析濾過」の箇所であって、これらの矢印の箇所がシングルパス接線流濾過の設置箇所に関する前記「カラムクロマトグラフィーステップの前後や最終的な濃縮および処方時など」との記述と対応していることからみて、上記の図が「カラムクロマトグラフィー」を表していることが読み取れる。したがって、引用文献には、「プロテインＡ捕捉」のステップもカラムクロマトグラフィーにより実施されることが実質的に示されている。これは、ア（キ）において、「クロマトグラフィー前」について、「プロテインＡ前シングルパスＴＦＦ」と記載されるとともに、「クロマトグラフィー前」を図示した図４Ａ（ア（ク））では、供給物が入り透過液と保持液が出てくる ［図：0001426242000007.jpg］ の部分（ａ）と、部分（ａ）から保持液が供給される ［図：0001426242000008.jpg］ の部分（ｂ）が記載されており、供給物が入り透過液と保持液が出てくるとの機能を有する部分（ａ）がシングルパスＴＦＦにあたり、保持液が供給される部分（ｂ）が「プロテインＡ」によるクロマトグラフィーにあたること、「プロテインＡ捕捉」はクロマトグラフィーによるものであることが理解できることとも整合する。 そして、クロマトグラフィーは精製手段であり、不純物の除去という機能があることは当業者に自明の事項といえる。 以上のことから、引用文献には以下の発明（以下、「引用発明」という。）が記載されていると認められる。 「バイオリアクター、清澄化、プロテインＡ捕捉、ウイルス不活化、深層濾過、陽イオン交換精製、陰イオン交換精製、ウイルス除去、濃縮・透析濾過、及び最終濾過の順番で各ステップが実施される生物製剤の製造プロセスであって、プロテインＡ捕捉、陽イオン交換精製、及び陰イオン交換精製はいずれもクロマトグラフィーによるものであり、シングルパス接線流濾過（シングルパスＴＦＦ）がプロテインＡ捕捉の前若しくは後、陽イオン交換精製の前若しくは後、陰イオン交換精製の前若しくは後、又は、濃縮・透析濾過として組み込まれる製造プロセス。」 本件補正発明と引用発明とを対比する。 引用発明の「生物製剤」、「清澄化」、及び「シングルパス接線流濾過（シングルパスＴＦＦ）」は、本件補正発明の「目的の生体分子」、「清澄化操作」、及び「シングルパス接線流濾過」に相当する。また、引用発明のバイオリアクターを用いるステップは生物製剤成分が生成されるステップであるとともに、その後に精製操作を含んでおり、バイオリアクターからの生成物が生物製剤成分に加えて不純物を含むことが明らかであるから、引用発明の「製造プロセス」は本件補正発明の「目的の生体分子及び不純物を含むサンプルを精製するための方法」に相当するとともに、引用発明のバイオリアクターを用いるステップは、本件補正発明の「目的の生体分子をバイオリアクターにおいて発現させて目的の生体分子及び不純物を含む生成物サンプルを形成すること」に相当する。 さらに、引用発明の「プロテインＡ捕捉」は、その語義からプロテインＡを用いて対象物を捕まえる機能を意味したものといえるところ、クロマトグラフィーによる「プロテインＡ捕捉」がモノクローナル抗体のような抗体を精製する際に使用されるアフィニティクロマトグラフィーであることは、周知例１、２にも記載されるように当業者において明らかである。そうすると、引用発明の「クロマトグラフィー」による「プロテインＡ捕捉」は、本件補正発明における「アフィニティクロマトグラフィー」に相当する。 そうすると、本件補正発明と引用発明とは 「目的の生体分子及び不純物を含むサンプルを精製するための方法であって、目的の生体分子をバイオリアクターにおいて発現させて目的の生体分子及び不純物を含む生成物サンプルを形成すること；前記生成物サンプルを清澄化操作に供すること；サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供してサンプルから不純物を取り除くことを含む方法。」である点で一致し、以下の点で相違する。 （相違点１） シングルパス接線流濾過について、本件補正発明では、「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らす」ものであることが特定されるのに対し、引用発明では、その点について特定されない点。 （相違点２） 生成物サンプルがシングルパス接線流濾過に供される時点について、本件補正発明では「アフィニティクロマトグラフィーカラムのすぐ上流」の時点であるか、又は、「当該方法（当審注：本件補正発明の方法）が前記濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供する直前にある無菌濾過に供することをさらに含」むことを前提に「無菌濾過に供する直前」の時点であると特定されるのに対し、引用発明では、「プロテインＡ捕捉のクロマトグラフィーの前若しくは後、陽イオン交換精製のクロマトグラフィーの前若しくは後、陰イオン交換精製のクロマトグラフィーの前若しくは後、又は、濃縮・透析濾過」の時点である点。 エ 判断 上記ウで挙げた相違点１及び２について、検討する。 （ア） 相違点１について 本件補正発明における「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らすシングルパス接線流濾過に供して濃縮生成物サンプルを形成する」との限定内容からみて、本件補正発明における「生成物質量流速」が単位時間あたりにシングルパスＴＦＦを通過する生成物サンプル中の生成物質量、「体積流速」は単位時間あたりにシングルパスＴＦＦを通過する生成物サンプルの体積を指すことがわかる。 この点を踏まえると、「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らす」との機能は、単純に言えば濃縮された結果生じることをいうにすぎず、単にシングルパス接線流濾過が本質的に備える機能を表現したものであると解される。 したがって、引用文献に記載されたシングルパス接線流濾過についてもそのような機能を有するものといえるから、相違点１は実質的な相違点にはあたらない。 また、「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らす」との機能が濃縮された結果生じることを単純に記載したものではないと解した場合であっても、以下のとおり、当業者が当然になし得た事項といえる。 すなわち、引用文献では、シングルパスＴＦＦに溶液を供給すると、透過液と濃縮された保持液が生成されること、濃縮の程度は溶液の供給物流速に応じて変化することが記載されるとともに、具体的な濃縮の程度についての試験結果に関する図２で示された供給物流速と保持液の濃度との関係は、供給物流速が低下するにしたがって保持液の濃度が上昇している。この点を踏まえると、供給物流速が低下（又は上昇）した場合、これにあわせて保持液の濃度も上昇（又は低下）することが示されたものといえ、また、保持液に含まれる生物製剤成分の質量は保持液における生物製剤成分の濃度と保持液体積との積であることから、保持液中に含まれる生物製剤の質量も供給物流速の変化に応じて変化するものといえる（ア（ア）～（エ））。そして、引用文献に記載される生産性や経済性という観点からみて、シングルパスＴＦＦでの濃縮以降のステップに供することのできる単位時間あたりの生物製剤の量が低下する事態を回避しようとすることは、当業者が当然に認識することといえる。そうすると、引用発明にシングルパスＴＦＦを組み込む場合において、溶液供給時の単位時間あたりの供給物流速を減らしつつ、同じ時間にシングルパスＴＦＦを通過する保持液中に含まれる生物製剤成分の質量が変化しないものとすることは、当業者が当然になし得た事項といえる。 よって、相違点１は、実質的な相違点にはあたらないか、当業者が当然になし得た事項といえる。 （イ） 相違点２について 引用文献の図３には、シングルパスＴＦＦが組み込まれる時点として「プロテインＡ捕捉」の前が赤色の矢印で示されるとともに、同じ赤色のテキストで「強化されたキャプチャ：より高速なロード；低力価で高容量の製品プールを濃縮して下流の生産性を向上する。」と、他の時点、ポイントとは区別して記載されており、「プロテインＡ捕捉」の前にシングルパスＴＦＦを組み込むことで、低力価で高容量の製品プールを濃縮してより高速なロードが可能となり、下流の生産性が向上することが記載されたものといえる（ア（オ）～（カ））。そうすると、引用発明において、下流の生産性向上を図る目的で「プロテインＡ捕捉」の前にシングルパスＴＦＦを組み込むことは当業者が容易に想到し得た事項といえる。 （ウ） まとめ これらの点を踏まえると、引用発明に基づいて、上記相違点１及び２に係る構成を導き出し、引用発明において清澄化操作後の生成物を、 「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らすシングルパス接線流濾過に供して濃縮生成物サンプルを形成」し、 「濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供して前記濃縮生成物サンプルから不純物を取り除く」ようにして、 「生成物サンプルがアフィニティクロマトグラフィーカラムのすぐ上流にあるシングルパス接線流濾過に供される」 ものとして本件補正発明とすることは、当業者が容易になし得たことといえる。 オ 本件補正発明の効果について 本願明細書には、目的の生体分子及び不純物を含むサンプルを精製するための方法としてシングルパスＴＦＦを用いた本件補正発明による方法を用いることによる試験結果は記載されていないから、本願明細書には参酌できる格別の効果はみあたらず、そもそも本件補正発の効果については上記エにおいて述べたとおりであるから、引用文献から予測可能なものである。 カ 小括 以上からすると、本件補正発明は、引用文献に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものといえるので、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができないものであり、特許出願の際独立して特許を受けることができない。 （２）審判請求人の主張 ア 審判請求人は、上記（１）ウ～オの観点に対し、令和５年８月１６日に提出された手続補正書（方式）で補正された「請求の理由」、及び、令和６年２月２７日に提出された上申書において、以下の（ア）、（イ）の理由を述べて、本件補正発明は引用文献に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができないものとなった旨を主張する。 （ア） アフィニティクロマトグラフィーへのサンプルのローディングについて 引用文献には、図３及び図４Ａにおいて、「プロテインＡ補足カラム」の前にＳＰＴＦＦデバイスによる処理を行うともに、「プロテインＡ補足カラム」から「プロテインＡ補足カラム」へのアウトプットに対して緩衝剤を添加して、サンプルの「プロテインＡ補足カラム」へのより速いローディングを可能にしており、これにより、プラントのランレートと生産性の向上を可能にする旨が記載されている。 これに対し、本件補正発明では、生成物サンプルをＳＰＴＦＦデバイスに通して得られる濃縮生成物サンプルをあえて緩衝剤を添加せず体積流速を落とした状態で、アフィニティクロマトグラフィーにローディングするものであり、サンプルの処理に必要とされるカラムの数を減らすことで生産性を上げることになり、引用文献の記載からはこのような効果を期待しない。 （イ） 本件補正発明の奏する効果について 本願明細書には、本件補正発明に関し、体積流量を減らすことで、必要とされるカラムの数を減らすことになり、処理の間により頻繁に回されなければならないカラムの使用数が減ることで、同じ物質を同じ時間で処理するために必要な樹脂が少なくなるため、クロマトグラフィー樹脂のより効率のよい利用を可能にし、これが生産性を改善し、そして費用を下げることになり、システム内のポンプの負荷を減らし、より多くの生成物質量を処理することが可能な、より小さなシステムを可能とすることができるといった利点がある。 イ 上記アの（ア）、（イ）の主張について検討する。 （ア） アフィニティクロマトグラフィーへのサンプルのローディングについて 審判請求人の主張中、「プロテインＡ補足カラム」は、図３の「Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｃａｐｔｕｒｅ」との記載や図４Ａに関する説明（（１）ア（キ）～（ク））からみて、「プロテインＡ捕捉カラム」の誤記と解される。また、『「プロテインＡ補足カラム」から「プロテインＡ補足カラム」へのアウトプット』との記載では「プロテインＡ補足カラム」での循環操作に関する主張となり、上申書における対応する部分の記載や本件補正発明とも整合しないことを踏まえると、これは『「ＳＰＴＦＦデバイス」から「プロテインＡ補足カラム」へのアウトプット』の誤記と理解すべきものといえる。以下では、これらのように解して検討する。 引用文献の図４Ａに記載される緩衝剤（ｂｕｆｆｅｒ）については、図中の記載以外の説明がない一方、アフィニティクロマトグラフィーにおいて、緩衝剤を使用するのはローディング時だけでなく溶出時等も含まれることは当業者における技術常識である。これらの点を踏まえると、図４Ａの「緩衝剤」との記載は、溶出等の際にカラムに流し込む緩衝剤の流路を概念的に表記するためのものと理解するのが自然な解釈である。したがって、図３及び図４Ａの記載のみにもとづいて、ＳＰＴＦＦデバイスからプロテインＡ捕捉カラムへのアウトプットに対して緩衝剤を添加して、サンプルのプロテインＡ捕捉カラムへのより速いローディングを可能しているとの審判請求人の主張は採用できない。 また、本件補正発明では「シングルパス接線流濾過に供して濃縮生成物サンプルを形成」し、その後に「前記濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供して前記濃縮生成物サンプルから不純物を取り除くこと」が特定されるものの、濃縮生成物サンプルをアフィニティクロマトグラフィーに供する際にその他の成分を添加することが否定されているわけではない。そして、段落００２８には、用語「サンプル」に関して「標的タンパク質又は目的のタンパク質と混合して見出される、希釈剤、緩衝液、洗浄剤及び夾雑する種、屑などを含んでもよい。」との記載があり、サンプルに緩衝液が含まれる場合が包含されていると解されるところ、ローディングや溶出時に緩衝条件を規定する必要があり、緩衝剤を使用して調整されることは技術常識であるといえる。そうすると、本件補正発明において、生成物サンプルをＳＰＴＦＦデバイスに通して得られる濃縮生成物サンプルをあえて緩衝剤を添加せず体積流速を落とした状態で、アフィニティクロマトグラフィーにローディングする場合に限定されると解すべき事情はない。 （イ） 本件補正発明の奏する効果について 審判請求人の主張する効果は、要するに体積流量を減らすことによりもたらされる効果といえるが、シングルパスＴＦＦによる濃縮で体積流量を減少させることができることや、濃縮され体積が減少することは（１）エで検討したとおりであり、それに基づく効果も当業者が予測しうる範囲のものであるといえるから、上記効果が格別顕著であるとは認められない。 ウ 審判請求人によるアの主張は、イで検討したとおりであるから、いずれも採用できない。 （３）むすび 以上検討したところによると、本件補正は、特許法第１７条の２第６項で準用する同法第１２６条第７項の規定に違反するものであり、同法第１５９条第１項の規定において読み替えて準用する同法第５３条第１項の規定により却下されるべきものである。 よって、上記補正の却下の決定の結論のとおり決定する。 第３ 本願発明について 令和５年７月６日付けの手続補正は上記のとおり却下されたので、本願の請求項１に係る発明は、令和５年１月５日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１に記載された事項により特定される、上記第２の１において、補正前の【請求項１】に記載したとおりのものである（以下、「本願発明」という。）。 第４ 原査定の拒絶理由 本願発明に対する原査定の拒絶の理由２の概要は、以下のとおりである。 （理由２）本願発明は、引用文献に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものといえるので、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない 第５ 当審の判断 本願発明は、本件補正発明における「シングルパス接線流濾過」に関し「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らす」との限定を有しないものであり、「シングルパス接線流濾過」が「生成物質量流速を変えることなく、生成物サンプルの体積流速を減らす」場合を含むものである。 そして、引用文献に記載された事項、引用発明、対比及び判断は、上記第２の３．（１）ア～オに記載したとおりなので、本願発明は依然として引用文献に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものといえる。 第６ むすび 以上のとおり、本願の請求項１に係る発明は、引用文献に記載された発明であり、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであるから、他の請求項に係る発明について検討するまでもなく、本願は特許を受けることができない。 よって、結論のとおり審決する。