2023-010734

特願２０１９－５５９３７８「細胞傷害誘導治療剤」拒絶査定不服審判事件〔平成３０年１１月 ８日国際公開、ＷＯ２０１８／２０３５６７、令和 ２年 ６月２５日国内公表、特表２０２０－５１８５８４〕について、次のとおり審決する。

結 論 本件審判の請求は、成り立たない。

理 由 第１ 手続の経緯 本願は、平成３０年５月２日（国内優先権主張 ２０１７年５月２日）の出願であって、その主な手続きの経緯は以下のとおりである。 令和４年 ４月１９日付け 拒絶理由通知書 令和４年 ８月１８日 意見書・手続補正書の提出 令和４年１０月２６日付け 拒絶理由通知書 令和５年 １月２７日 意見書・手続補正書の提出 令和５年 ４月１１日付け 拒絶査定 令和５年 ６月２８日 審判請求書の提出 令和７年 １月２９日付け 拒絶理由通知書 令和７年 ３月 ４日 意見書・手続補正書の提出 第２ 本願発明 本願の請求項１に係る発明は、令和７年３月４日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１に記載された事項により特定される、次のとおりのものである。 「【請求項１】 ヒトRNF43結合活性を有する第1抗原結合ドメインと、ヒトCD3結合活性を有する第2抗原結合ドメインと、同じIgGアイソタイプの天然ヒトFc領域によるFcγ受容体への結合と比較して、ヒトFcγ受容体への結合が低下した改変ヒトIgG Fc領域とを含む多重特異性抗原結合分子であって、天然のRNF43陽性であるヒト腫瘍細胞に対してインビボのT細胞依存性の細胞傷害性を有する多重特異性抗原結合分子。」（以下、「本願発明」という。） 第３ 当審における拒絶の理由の概要 本願発明は、本願の優先権主張の日（以下「本願優先日」という。）前に日本国内又は外国において頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった下記の引用文献１に記載された発明において、腫瘍抗原として引用文献１あるいは引用文献３に記載されたＲＮＦ４３を用いることにより、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。 記 引用文献１：国際公開第２０１５／０９５３９２号公報 引用文献３：国際公開第２０１５／１６４３９２号公報 第４ 当審の判断 １ 引用文献の記載事項 （１） 引用文献１（国際公開第２０１５／０９５３９２号公報） 当審における拒絶の理由で引用された、本願優先日前に頒布された刊行物である引用文献１には、次の事項が記載されている。なお、以下の日本語訳による摘記は、引用文献１に対応する日本語出願の公表公報である特表２０１７－５０４３１４号公報の記載に基づくものである。その段落番号も便宜上そのまま記載した。下線は当審にて付記したものである。 ア 発明の名称 「抗ＣＤ３抗体および使用方法」 イ 特許請求の範囲 「【請求項１】 抗分化抗原群列３（ＣＤ３）抗体であって、次の６つの超可変領域（ＨＶＲ）、すなわち、 （ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、 （ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、 （ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、 （ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、 （ｅ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、および （ｆ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３ を備える結合ドメインを含む、抗ＣＤ３抗体。」 「【請求項２３０】 前記抗ＣＤ３抗体が多重特異性抗体である、請求項１から請求項２２８のいずれか一項に記載の抗ＣＤ３抗体。 【請求項２３１】 前記多重特異性抗体が二特異性抗体である、請求項２３０に記載の抗ＣＤ３抗体。 【請求項２３２】 前記二特異性抗体が第２の生体分子に結合する第２結合ドメインを含み、前記第２生体分子が細胞表面抗原である、請求項２３１に記載の抗ＣＤ３抗体。 【請求項２３３】 前記細胞表面抗原が腫瘍抗原である、請求項２３２に記載の抗ＣＤ３抗体。」 ウ 発明の概要 「【背景技術】 ・・・ 【０００３】 癌治療に対する長年のアプローチには化学療法、放射線療法、および固形腫瘍を除去するための外科手術が含まれる。最近、二特異性抗体による免疫療法が開発された。そのような二特異性抗体は、結合している細胞傷害性細胞が結合している腫瘍細胞を破壊することを意図して細胞傷害性細胞と腫瘍細胞の上にある細胞表面抗原へ同時に結合することができる。癌治療の治験を現時点で受けている既存の二特異性抗体はそれらの短い半減期および／または変わりやすい効力のために限られている。したがって、癌治療での使用に効果的な二特異性抗体の開発について当分野には満たされていない要求が存在する。 【発明の概要】 【０００４】 本発明は抗分化抗原群列３（ＣＤ３）抗体および同抗体の使用方法に関する。」 「【００６４】 関連の態様において本発明は、そのようなエピトープに結合し、且つ、多重特異性抗体である抗ＣＤ３抗体を特色とする。幾つかの実施形態では多重特異性抗体は二特異性抗体である。幾つかの実施形態では二特異性抗体は第２の生体分子に結合する第２結合ドメインを含み、第２生体分子は細胞表面抗原である。幾つかの実施形態では細胞表面抗原は腫瘍抗原である。幾つかの実施形態では腫瘍抗原はＣＤ２０、ＦｃＲＨ５（Ｆｃ受容体様分子５）、ＨＥＲ２、ＬＹＰＤ１、・・・ＲＡＧＥ－１、ＲＢＡＦ６００、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＲＮＦ４３、ＲＵ２ＡＳ、ＳＡＧＥ、セセルニン（ｓｅｃｅｒｎｉｎ）１、ＳＩＲＴ２、ＳＮＲＰＤ１、ＳＯＸ１０、Ｓｐ１７、ＳＳＸ－２、ＳＳＸ－４、ＳＴＥＡＰ１、サービニン、ＳＹＴ－ＳＳＸ１またはーＳＳＸ２融合タンパク質、ＴＡＧ－１、ＴＡＧ－２、テロメラーゼ、ＴＧＦ－βＲＩＩ、ＴＲＡＧ－３、トリオースリン酸イソメラーゼ、ＴＲＰ－１／ｇｐ７５、ＴＲＰ－２、ＴＲＰ２－ＩＮＴ２、チロシナーゼ、ＶＥＧＦ、ＷＴ１、ＸＡＧＥ－１ｂ／ＧＡＧＥＤ２ａ、およびＳＬＣ５３ＳＬＣ３５Ｄ３からなる群より選択される。幾つかの実施形態では腫瘍抗原はＣＤ２０、ＦｃＲＨ５、ＨＥＲ２、ＬＹＰＤ１、ＬＹ６Ｇ６Ｄ、ＰＭＥＬ１７、ＬＹ６Ｅ、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＤ２２、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、ＥＤＡＲ、ＧＦＲＡ１、ＭＲＰ４、ＲＥＴ、Ｓｔｅａｐ１、およびＴｅｎＢ２からなる群より選択される。好ましい実施形態では腫瘍抗原はＣＤ２０、ＨＥＲ２、ＦｃＲＨ５、およびＬＹＰＤ１からなる群より選択される。」 「【０１２１】 「腫瘍抗原」という用語は、本明細書において使用される場合、腫瘍細胞上に提示されている抗原として理解され得る。これらの抗原は、多くの場合にその分子の膜貫通および細胞質部分とつながっている細胞外部分によって細胞表面に提示され得る。これらの抗原は腫瘍細胞によってのみ提示され、正常細胞によって提示されることが決してない場合が有り得る。」 「【０９９２】 ｃ．Ｆｃ領域変異体 ある特定の実施形態では１つ以上のアミノ酸修飾を本発明の抗ＣＤ３抗体（例えば、ＣＤ３と第２生体分子、例えば細胞表面抗原、例えば腫瘍抗原に結合する本発明のＴＤＢ抗体またはその変異体などの本発明の二特異性抗ＣＤ３抗体）のＦｃ領域に導入することによってＦｃ領域変異体を作製してよい（例えば、米国特許出願公開第２０１２／０２５１５３１号明細書を参照されたい）。そのＦｃ領域変異体は１か所以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を備えるヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域、ＩｇＧ２ Ｆｃ領域、ＩｇＧ３ Ｆｃ領域、またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域）を含み得る。 【０９９３】 ある特定の実施形態では本発明は全てのエフェクター機能ではなく幾つかのエフェクター機能を有する抗ＣＤ３抗体変異体を企図しており、それによってその抗体変異体は、インビボでの抗体半減期が重要であるがそれでもある特定のエフェクター機能（補体およびＡＤＣＣなど）が不必要または有害である用途にとって望ましい候補になる。インビトロ細胞傷害アッセイおよび／またはインビボ細胞傷害アッセイを実施してＣＤＣ活性および／またはＡＤＣＣ活性の低下／除去を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実施して抗体がＦｃγＲ結合を欠いている（したがって、ＡＤＣＣ活性を欠いている可能性が高い）がＦｃＲｎ結合能を保持していることを確認することができる。・・・Ｃ１ｑ結合アッセイを実施して抗体がＣ１ｑに結合することができず、したがってＣＤＣ活性を欠いていることを確認してもよい。・・・ＦｃＲｎ結合とインビボクリアランス／半減期の決定も当技術分野において知られている方法を用いて実施され得る。 【０９９５】 ある特定の実施形態では本抗体内の野生型ヒトＦｃ領域の位置３２９のプロリンがグリシンまたはアルギニンまたはそのＦｃのプロリン３２９とＦｃｇＲＩＩＩのトリプトファン残基Ｔｒｐ８７およびＴｒｐ１１０との間に形成されるＦｃ／Ｆｃγ受容体接触面内のプロリン・サンドウィッチを破壊するほど充分に大きいアミノ酸残基で置換される（Ｓｏｎｄｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．： Ｎａｔｕｒｅ ４０６， ２６７ー２７３（２０００年７月２０日））。ある特定の実施形態では本抗体は少なくとも１つの追加のアミノ酸置換を含む。１つの実施形態ではその追加のアミノ酸置換はＳ２２８Ｐ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｄ、またはＰ３３１Ｓであり、さらに別の実施形態ではその少なくとも１つの追加のアミノ酸置換はヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域のＬ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域のＳ２２８ＰおよびＬ２３５Ｅであり（例えば、米国特許出願公開第２０１２／０２５１５３１号明細書を参照されたい）、さらに別の実施形態ではその少なくとも１つの追加のアミノ酸置換はヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域のＬ２３４ＡおよびＬ２３５ＡおよびＰ３２９Ｇである。 」 エ 実施例 「【実施例１】 【１０７２】 抗ＣＤ３抗体の作製 ＣＤ３ε抗原 Ａ．マウスＩｇＧ２ａ－Ｆｃに融合した二特異性ヒトおよびカニクイザルＣＤ３ε＋ＣＤ３γ（ＣＤ３εγ－ｍｕＦｃ） ・・・ 【１０８１】 抗ＣＤ３抗体１３Ａ３、７２Ｈ６、および１９Ｂ１の軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインのアミノ酸配列が図４Ａに示されている。図４Ａはそれら３つの抗体の各々のＨＶＲ配列の範囲も定めている。図４Ｂ、４Ｃ、５Ａ、および５Ｂは他の抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインの追加的なアミノ酸配列を示している。 【１０８２】 Ｂ．ウサギの免疫後のスクリーニング ８種類の固有の重鎖配列と６種類の固有の軽鎖配列を前記ハイブリドーマ細胞株からクローン化した。図７はこれらの抗体のうちの１つであるＲａｂ１７の重鎖配列および軽鎖配 列を示している。高い配列類似性のため、６つの重鎖と軽鎖の対に集中することに決定した。それにより生じたそれらの６種類の抗体を小規模（２９３Ｓの１００ｍｌ培養物）でキメラウサギ／ヒトＩｇＧとして発現させ、ＥＬＩＳＡによってＣＤ３εへの結合についてスクリーニングした。・・・ 【１０８８】 Ｂ．ヒト化 ヒト／カニクイザルＣＤ３εγ交差反応性ハイブリドーマの配列を最も相同性が高いヒトコンセンサス軽鎖および重鎖可変ドメインまたは生殖系列軽鎖および重鎖可変ドメインと整列させた（図７）。ｍｕ４０Ｇ５ｃと呼ばれるコンセンサス配列が関連のハイブリドーマクローンの軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインから得られた（図７）。超可変領域（ＨＶＲ）を操作して軽鎖ヒトアクセプターフレームワークおよび重鎖ヒトアクセプターフレームワークの中に組み入れてヒト化ＣＤＲ移植体を作製した（例えば、図８Ａ～８Ｆを参照されたい）。ヒト化変異体をＦａｂ断片の形態で、またはＩｇＧとして評価した。・・・選択されたヒト化抗体の様々なＣＤ３ε抗原に対する一価結合親和性が図１０に示されている。ヒト化抗ＣＤ３抗体３８Ｅ４の親和性変異体（３８Ｅ４ｖ１～３８Ｅ４ｖ９）および４０Ｇ５ｃの結合親和性が図１１に示されている。 【１０９２】 抗体結合に対するＣＤ３中のアラニン突然変異の影響を定量するため、選択されたＣＤ３アラニン突然変異体を非サプレッサー大腸菌株内で発現させた。抗ＣＤ３抗体ＵＣＨＴ１ｖ９を使用して、分泌されたそれらのＣＤ３εγ変異体を粗ペリプラズム画分より捕捉した。ＧＥヘルスケア社の抗ヒトＩｇＧ（Ｆｃ）抗体キャプチャキット（ＢＲ－１００８－３９）を使用してアミンカップリングによりＵＣＨＴ１ｖ９をＣＭ５シリーズＳチップ上に固定化した。・・・」 「【実施例２】 【１１０３】 Ｔ細胞依存的二特異性（ＴＤＢ）抗体の作製と選択 腫瘍細胞の撲滅にＴ細胞の高い細胞傷害能を利用する１つのアプローチはＴ細胞依存的二特異性（ＴＤＢ）抗体の使用である。ＣＤ１９／ＣＤ３二特異性ＢｉＴＥ抗体であるＢ細胞標的化ブリナツモマブなどの分子による臨床応答の促進が報告されている。しかしながら、多数の報告されている二特異性抗体治療法の治療上の有望性は、好ましくない薬物動態（ＰＫ）、毒性、および／または製造上の問題をはじめとする障害のために制限されている。したがって、我々は最初にノブ・イントゥー・ホール形式の完全長抗体として作製される抗ＣＤ３アームと抗腫瘍抗原アーム（例えば、抗ＣＤ２０アーム、抗ＦｃＲＨ５アーム、抗ＨＥＲ２アーム、抗ＬＹＰＤ１アーム、抗ＬＹ６Ｅアーム、抗ＬＹ６Ｇ６Ｄアーム、抗ＰＭＥＬ１７アーム、抗ＣＤ１９アーム、抗ＣＤ２２アーム、抗ＣＤ３３アーム、抗ＣＤ７９Ａアーム、抗ＣＤ７９Ｂアーム、抗ＥＤＡＲアーム、抗ＧＦＲＡ１アーム、抗ＭＲＰ４アーム、抗ＲＥＴアーム、抗Ｓｔｅａｐ１アーム、抗ＴｅｎＢ２アーム）の様々な組合せを有する抗ＣＤ３ ＴＤＢ抗体を作製し、それらを特性分析した。予期せぬことに、我々は特定の組合せ（対）の抗ＣＤ３アームと抗腫瘍抗原アームが他のＴＤＢよりも好ましい活性を示すＴＤＢになることを見出した。 【１１０６】 Ａ．結合親和性 それらのＣＤ３／ＣＤ２０ ＴＤＢの各々の結合親和性を抗ＣＤ３抗体について上で記載されたようにＢｉａｃｏｒｅ分析またはＦＡＣＳ分析によって検査した。・・・それらの結果は特定の組合せの抗ＣＤ３抗体アームと抗腫瘍抗原アーム（例えば、抗ＣＤ２０アーム）がより好ましい結合特性を有するＴＤＢ抗体になることを示している。 【１１０７】 Ｂ．インビトロＢ細胞殺傷アッセイおよびＴ細胞活性化アッセイ 作製されたＣＤ３／ＣＤ２０ ＴＤＢはＢ細胞殺傷およびＴ細胞の細胞傷害作用の活性化を支援するそれらの能力についても検査された。・・・細胞殺傷のパーセント（％）を非ＴＤＢ処理対照に基づいて計算した。活性化Ｔ細胞はＣＤ６９およびＣＤ２５の表面発現によって検出された。 【１１０８】 ＣＤ３と第２生体分子（この例ではＣＤ２０）に対する二特異性を有する作製された前記ＴＤＢ抗体の様々な効力は、高い効力を有する例となるＴＤＢの作製における両抗体アームの重要で予想できない貢献を強調している（図２５～４９を参照されたい）。」 「【実施例３】 【１１０９】 例となるＣＤ３／ＣＤ２０ ＴＤＢ（ＣＤ２０ ＴＤＢ）の特性分析 我々は上記の例となるＣＤ３／ＣＤ２０ ＴＤＢ（ＣＤ２０ ＴＤＢ）のうちの２つをさらに特性分析し、それらはインビトロＢ細胞殺傷アッセイおよびＴ細胞活性化アッセイにおいて高い効力を示した。・・・ 【１１１０】 材料と方法 Ａ．抗体の作製 Ｔ細胞依存的二特異性（ＴＤＢ）抗体をこれまでに記載された（Ａｔｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２７０： ２６－３５， １９９７）ようにヒトＩｇＧ１としてノブ・イントゥー・ホール形式の完全長抗体として作製した。・・・ 【１１１５】 従来の抗体ＰＫ特性を有する完全長ヒト化ＩｇＧとして作製された高品質ＣＤ２０ ＴＤＢ 抗原同一性、細胞外ドメインのサイズ、および膜からのエピトープの距離をはじめとするＢ細胞標的化ＴＤＢ能力に影響し得る標的化特性を調べるため、我々はＣＤ３ε、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、およびＣＤ７９ｂの上のエピトープを標的とする４０種類を超える様々なＴＤＢを作製した。・・・ 【１１２４】 ＣＤ２０ ＴＤＢはインビトロおよびインビボにおいてＣＬＬ Ｂ細胞の殺傷に効力を有する 我々は、Ｂ腫瘍量が通常多い一方でＴ細胞数が少なく、且つ、Ｔ細胞機能が損なわれている可能性があり得る（Ｒｉｃｈｅｓ ｅｔ ａｌ． Ｓｅｍｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ． ２０（６）： ４３１－４３８， ２０１０）ＣＬＬ患者の自家Ｔ細胞を使用するＢ白血病細胞の殺傷におけるＣＤ２０ ＴＤＢの効力も検査した。９人のＣＬＬ患者の末梢血液から単離されたＰＢＭＣを単回の１０００ｎｇ／ｍＬという高用量のＣＤ２０ ＴＤＢと共に最大で４８時間にわたってインキュベートした。図６１Ａに示されているように、ＣＤ２０ ＴＤＢは自家Ｔ細胞によるＣＬＬ Ｂ細胞の殺傷に効力を有する。・・・ 【１１２５】 ＣＤ２０ ＴＤＢはマウスに移植されたＣＬＬ白血病細胞の除去にも効力を有する（図６２Ａ）。簡単に説明すると、患者由来自己活性化Ｔ細胞の移植に続いて患者白血病細胞をＮＳＧマウスに移植し、その白血病移植体の定着を確認した後に処置を開始する。・・・０．１ｍｇ／ｋｇまたは０．５ｍｇ／ｋｇの用量でのＣＤ２０－ＴＤＢ処理の単回投与の後に検出できたＢ細胞はほとんどなかった。・・・ 」 「【実施例４】 【１１４１】 例となるＣＤ３／ＦｃＲＨ５ ＴＤＢ（ＦｃＲＨ５ ＴＤＢ）の作製と特性分析 我々は、異なる細胞表面抗原であるＦｃＲＨ５を認識することによって腫瘍細胞の撲滅にＴ細胞の細胞傷害活性を動員するＴＤＢ抗体の能力も調査した。この目的のために我々は抗ＣＤ３アームと抗ＦｃＲＨ５アームを有する二特異性抗ＣＤ３抗体（ＦｃＲＨ５ ＴＤＢ）を作製し、それらを特性分析した。・・・ 【１１４４】 Ｂ．インビトロＭＯＬＰ－２標的細胞殺傷アッセイおよびＴ細胞活性化アッセイ 作製されたＦｃＲＨ５ ＴＤＢは、ＦｃＲＨ５発現ＭＯＬＰ－２標的細胞の殺傷およびＴ細胞の細胞傷害作用の活性化を支援するそれらの能力についても検査された。・・・図７１Ａおよび７１Ｂに示されているように、抗ＣＤ３アームにＵＣＨＴ１ｖ９または３８Ｅ４ｖ１を有するＦｃＲＨ５ ＴＤＢは抗ＣＤ３アームとして４０Ｇ５ｃを有するＦｃＲＨ５ ＴＤＢと比較して堅固なインビトロＭＯＬＰ－２標的細胞殺傷を示した。」 「【実施例５】 【１１４６】 例となるＣＤ３／ＨＥＲ２ ＴＤＢ（ＨＥＲ２ ＴＤＢ）の作製と特性分析 我々は、異なる細胞表面抗原であるＨＥＲ２を認識することによって腫瘍細胞の撲滅にＴ細胞の細胞傷害活性を動員するＴＤＢ抗体の能力も調査した。この目的のために我々は抗ＣＤ３アームと抗ＨＥＲ２アームを有する二特異性抗ＣＤ３抗体（ＨＥＲ２ ＴＤＢ）を作製し、それらを特性分析した。・・・ 【１１６７】 ＨＥＲ２ ＴＤＢは免疫不全マウスにおいてインビボで腫瘍増殖を阻害する 内在性機能性Ｔ細胞およびＢ細胞を欠いており、且つ、減少したレベルのＮＫ細胞種、ＤＣ細胞種、およびマクロファージ細胞種を有するＮＯＤ－ＳＣＩＤマウスにおいてＨＥＲ２ ＴＤＢのインビボ効力を検査した。・・・個々のマウスの腫瘍体積と処理群のフィッティング腫瘍体積が図９９Ａに提示されており、そこではＨＥＲ２ ＴＤＢによってＨＥＲ２発現腫瘍の増殖が妨げられた。」 「【実施例６】 【１１７６】 例となるＣＤ３／ＬＹＰＤ１ ＴＤＢ（ＬＹＰＤ１ ＴＤＢ）の作製と特性分析 我々は、異なる細胞表面抗原であるＬＹＰＤ１を認識することによって腫瘍細胞の撲滅にＴ細胞の細胞傷害活性を動員するＴＤＢ抗体の能力も調査した。この目的のために我々は抗ＣＤ３アームと抗ＬＹＰＤ１アームを有する二特異性抗ＣＤ３抗体（ＬＹＰＤ１ ＴＤＢ）を作製し、それらを特性分析した。・・・ 【１１７９】 Ｂ．インビトロＯＶＣＡＲ３．Ｌｕｃ標的細胞殺傷アッセイおよびＴ細胞活性化アッセイ 作製されたＬＹＰＤ１ ＴＤＢはＬＹＰＤ１発現ＯＶＣＡＲ３．Ｌｕｃ標的細胞の殺傷およびＴ細胞の細胞傷害作用の活性化を支援するそれらの能力についても検査された。・・・図１０５に示されているように、抗ＣＤ３アームにＵＣＨＴ１ｖ９、３８Ｅ４ｖ１、またはＳＰ３４を有するＬＹＰＤ１ ＴＤＢは抗ＣＤ３アームとして４０Ｇ５を有するＬＹＰＤ１ ＴＤＢと比較して堅固なインビトロＯＶＣＡＲ３．Ｌｕｃ標的細胞殺傷を示した。」 （２） 引用文献３（国際公開第２０１５／１６４３９２号公報） 当審における拒絶の理由で引用された、本願優先日前に頒布された刊行物である引用文献３には、次の事項が記載されている。なお、以下の日本語訳による摘記は、引用文献３に対応する日本語出願の公表公報である特表２０１７－５１８０４０号公報の記載に基づくものである。その段落番号も便宜上そのまま記載した。下線は当審にて付記したものである。 ア 発明の名称 「新規の抗ＲＮＦ４３抗体および使用方法」 イ 特許請求の範囲 「【請求項１３】 ヒトＲＮＦ４３（配列番号５）に結合する単離抗体であって、ヒトＲＮＦ４３に対する結合について、 （１）配列番号７８に示す軽鎖可変領域および配列番号８０に示す重鎖可変領域、または （２）配列番号１１０に示す軽鎖可変領域および配列番号１１２に示す重鎖可変領域 を含む抗体と競合する、単離抗体。」 ウ 技術分野 「【０００３】 発明の分野 本発明は、一般に、新規の抗ＲＮＦ４３抗体またはこの免疫反応性断片ならびにこれらを含む、がんおよびがんの再発または転移の処置、診断または予防のための組成物、例えば、抗体薬物コンジュゲートに関する。本発明の選択された実施形態は、このような抗ＲＮＦ４３抗体または抗体薬物コンジュゲートの、がんの処置のための、例えば腫瘍形成性細胞の出現頻度の減少のための、使用を提供する。」 エ 発明を実施するための形態 「【００２４】 ＲＮＦ４３は、驚くべきことに、いくつかの腫瘍の生物学的マーカーとなることが見出された。この関係はそのような腫瘍の処置に利用し得る。」 「【００２６】 Ｉ．ＲＮＦ４３生理学 ＲＩＮＧフィンガータンパク質４３（ＲＮＦ４３；Ｅ３ユビキチン－タンパク質リガーゼＲＮＦ４３またはＲＮＦ１２４としても知られる。）は、一回貫通Ｉ型膜タンパク質であり、ＷＮＴシグナル伝達の重要なフィードバック制御因子として機能する。」 「【００４６】 驚くべきことに、ＲＮＦ４３発現が、様々な腫瘍形成性細胞小集団と関連していることが分かった。本発明は、特に腫瘍形成性細胞を標的化するために有用であり、腫瘍形成性細胞を鎮静する、敏感にする、中和する、出現頻度を減少させる、ブロックする、破棄する、干渉する、減少させる、妨害する、抑制する、制御する、枯渇させる、和らげる、介在する、縮小させる、再プログラムする、消去するまたは他の方法で阻害する（集約して、「阻害する」）ために使用することができ、したがって増殖性障害（例えば、がん）の処置、管理および／または予防を容易にする抗ＲＮＦ４３抗体を提供する。」 「【００５１】 本発明の抗体は、例えば、フローサイトメトリ、磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）、レーザー媒介の薄片化またはＦＡＣＳなどの方法による、腫瘍形成性細胞の同定、特徴付け、監視、単離、薄片化または集団もしくは小集団の富化に有用であり得る。」 「【００５９】 本明細書で使用される場合、用語「抗体」は、ポリクローナル抗体、マルチクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化および霊長類化抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ヒト抗体、組換え産生抗体、細胞内抗体、多重特異性抗体、二重特異性抗体、一価抗体、多価抗体、抗イディオタイプ抗体、合成抗体、例えば、これらのムテインおよびバリアント、免疫特異的抗体断片、例えば、Ｆｄ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ’）断片、単鎖断片（例えば、ＳｃＦｖおよびＳｃＦｖＦｃ）ならびにＦｃ融合および他の修飾を含むそれらの誘導体、ならびに決定因子との優先的会合または結合を示す限り、あらゆる他の免疫反応分子を含む。」 オ 実施例 「【０３０４】 ［実施例４］ がんゲノムアトラスを使用した腫瘍におけるＲＮＦ４３の発現 様々な腫瘍におけるＲＮＦ４３ ｍＲＮＡの過剰発現を、がんゲノムアトラス（Ｔｈｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ、ＴＣＧＡ）として知られる大規模な公的に利用可能な原発腫瘍および正常試料のデータセットを使用して確認した。・・・これらのデータは実施例１～３の結果を確認するものであり、正常組織を上回る良好な治療指数が存在することを示唆し、したがって抗ＲＮＦ４３抗体およびＡＤＣが、これらの腫瘍の処置のための有用な治療薬となり得ることを示唆する。」 「【０３１０】 ［実施例６］ 抗ＲＮＦ４３抗体の生成 抗ＲＮＦ４３マウス抗体は、以下のように２つの異なる免疫化で産生した。第１の免疫化では、１匹の雌Ｂａｌｂ／ｃマウスに、足蹠を介して、ＴｉｔｅｒＭａｘ（登録商標）に乳化させた１０μｇの組換えヒトＲＮＦ４３－Ｆｃタンパク質（ｒｈＲＮＦ４３－Ｆｃ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ；番号７９６４－ＲＮ）およびＣｐＧアジュバントを接種した。・・・ 【０３１１】 マウスを屠殺し、流入リンパ節（膝窩、鼠径および内腸骨）を解離し、抗体産生細胞源として使用した。Ｂ細胞（６０ｘ１０６細胞）の単一細胞懸濁液を、非分泌Ｐ３ｘ６３Ａｇ８．６５３骨髄腫細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１５８０）と、１：１の比率で、エレクトロセルフュージョンにより、ＢＴＸ Ｈｙｂｒｉｍｍｕｎｅシステム（ＢＴＸ Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）モデルを使用して融合した。・・・ 【０３１３】 ハイブリドーマを１０日間培養し、以下の通りに実施したフローサイトメトリを使用して、ｈＲＮＦ４３に特異的な抗体について上清をスクリーニングした。 【０３１４】 ［実施例７］ 抗ＲＮＦ４３抗体の特徴 実施例６で生成された抗ＲＮＦ４３抗体を、（ｉ）アイソタイプ、（ｉｉ）ＲＮＦ４３に対する親和性および（ｉｉｉ）ＺＮＲＦ３との交差反応性の点で特徴付けた。・・・選択された抗体は、ｈＲＮＦ４３に対してナノモル範囲の親和性を示した（図５Ａ）。」 「【０３４７】 ［実施例１４］ 腫瘍におけるＲＮＦ４３タンパク質発現 実施例１～３に記載される様々な腫瘍と関連したＲＮＦ４３ ｍＲＮＡ転写レベルの上昇を考慮して、ＲＮＦ４３タンパク質発現が、ＰＤＸ腫瘍においても上昇しているかを調べる作業を行った。 【０３５１】 図８は、正常組織と比較してＲＮＦ４３タンパク質高発現を示した代表的ＧＡおよびＣＲ ＰＤＸ腫瘍細胞株を示す。試験した正常組織は、副腎、動脈、結腸、食道、胆嚢、心臓、腎臓、肝臓、肺、末梢および坐骨神経、膵臓、骨格筋、皮膚、小腸、脾臓、胃、気管、赤血球および白血球ならびに血小板、膀胱、脳、乳房、眼、リンパ節、卵巣、下垂体、前立腺および脊髄を含んでいた。・・・これらのデータは、上記で示したＲＮＦ４３発現についてのｍＲＮＡ転写データと組み合わされて、ＲＮＦ４３決定因子が治療介入に対する魅力的な標的であるという説を、強力に支持する。」 「【０３５２】 ［実施例１５］ インサイチュハイブリダイゼーションを使用した腫瘍表面上のＲＮＦ４３の検出 ＲＮＦ４３ ｍＲＮＡについてのＲＮＡインサイチュハイブリダイゼーションは、ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）２．０試薬キット（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｅｌｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ；Ｗａｎｇら、２０１２、ＰＭＩＤ：２２１６６５４４）を使用して実施した。・・・図９は、試験した２１個のＰＤＸ株全てが、ある程度でＲＮＦ４３を発現し、５２．３％の腫瘍がスコア４の発現をしていたことを示す。」 「【０３５３】 ［実施例１６］ 抗ＲＮＦ４３抗体はフローサイトメトリにより腫瘍におけるＲＮＦ４３タンパク質発現を検出する フローサイトメトリを使用して、本発明の抗ＲＮＦ４３抗体が、ＣＲ ＰＤＸ腫瘍細胞株表面の抗ＲＮＦ４３タンパク質の存在を特異的に検出する能力を評価した。 【０３５４】 ・・・図１０は、本発明の抗ＲＮＦ４３抗体（黒線）が、ヒトＣＲ ＰＤＸ腫瘍生細胞（ＣＲ１４、ＣＲ８１、ＣＲ９１、ＣＲ９９、ＣＲ１０４、ＣＲ１１５）に対して、ＩｇＧアイソタイプ対照抗体（灰色塗りつぶしヒストグラム）よりも有意に大きな強度で、特異的に結合できたことを示している。」 ２ 判断 （１） 引用発明の認定 引用文献１は「抗ＣＤ３抗体および使用方法」の発明を開示する公報であって、その特許請求の範囲には、腫瘍抗原に結合する第２結合ドメインを含む抗ＣＤ３二特異性抗体が記載され（１（１）イ 請求項２３３）、発明の詳細な説明には、第２結合ドメインが結合する腫瘍細胞上に提示される腫瘍抗原として多種多様なものを採用し得ることが記載されている（１（１）ウ【００６４】、【０１２１】）。 そして、実施例では、多種類の抗ヒトＣＤ３ ＩｇＧモノクローナル抗体が作成され（１（１）エ【実施例１】、１（１）ウ【１０８２】、【１０９２】の記載からＩｇＧが作成されたことが分かる。）、それらを用いて、第２結合ドメインが結合する腫瘍抗原がＣＤ２０、ＦｃＲＨ５、ＨＥＲ２及びＬＹＰＤ１であるような二特異性抗体が、ヒトＩｇＧとして作成され、インビトロやインビボで抗腫瘍効果を示したことが具体的データにより示されている（１（１）エ【１１１０】、【１１１５】、【１１４１】、【１１４６】、【１１７６】）。特に、腫瘍抗原がＣＤ２０やＨＥＲ２の場合については、インビボで、当該腫瘍抗原を発現するヒト腫瘍細胞に対してＴ細胞依存的な細胞傷害性を有することが具体的なデータにより示されている（１（１）エ【１１２５】、【１１６７】）。 したがって、引用文献１には、「ヒトＣＤ３に結合する結合ドメインと、ヒト腫瘍抗原に結合する第２結合ドメインを含む、抗ＣＤ３ ヒトＩｇＧ二特異性抗体であって、当該腫瘍抗原を発現するヒト腫瘍細胞に対してインビボのＴ細胞依存的な細胞傷害性を有する二特異性抗体。」（以下、「引用発明」という。）の発明が記載されていると認められる。 （２） 対比 本願発明と引用発明とを対比すると、本願発明の「ヒトＲＮＦ４３」は引用発明の「ヒト腫瘍抗原」の一種であり、引用発明の「二特異性抗体」は本願発明の「多重特異性抗原結合分子」に該当する。また、引用発明は「ヒトＩｇＧ」であって、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域を含むものであるから、両者は、「ヒト腫瘍抗原結合活性を有する第１抗原結合ドメインと、ヒトＣＤ３結合活性を有する第２抗原結合ドメインと、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域とを含む多重特異性抗原結合分子であって、当該腫瘍抗原を発現するヒト腫瘍細胞に対してインビボのＴ細胞依存性の細胞傷害性を有する多重特異性抗原結合分子。」である点で一致し、次の２点で相違している。 ＜相違点１＞ 本願発明は「ヒト腫瘍抗原」が「ヒトＲＮＦ４３」と特定されているのに対し、引用発明ではそのような特定がない点。 ＜相違点２＞ 「ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域」が、本願発明では「同じIgGアイソタイプの天然ヒトFc領域によるFcγ受容体への結合と比較して、ヒトFcγ受容体への結合が低下した改変ヒトIgG Fc領域」であるのに対し、引用発明では改変は加えられていない点。 （３） 相違点についての判断 まず、相違点１について検討すると、引用文献１には、腫瘍抗原としてＲＮＦ４３を含む各種腫瘍抗原が例示されている（１（１）ウ【００６４】）ところ、例示されたもののうちＣＤ２０、ＦｃＲＨ５、ＨＥＲ２及びＬＹＰＤ１という４つもの腫瘍抗原を標的とした二特異性抗体が抗腫瘍効果を発揮したことが具体的データにより示されているのだから、例示された各腫瘍抗原についても同様に、それらを標的とした二特異性抗体を作出すれば、当該各腫瘍抗原を発現する腫瘍に対する抗腫瘍効果を発揮するであろうことが十分理解できる。したがって、腫瘍抗原として例示されたものの中から治療対象とする腫瘍の種類に応じてＲＮＦ４３を選択することは、当業者が適宜なし得る程度のことであるといえる。 また、引用文献３には、腫瘍においてＲＮＦ４３タンパク質が発現していることからＲＮＦ４３が治療介入にとって魅力的な標的であることが記載され、ヒトＲＮＦ４３に結合する抗体を多数作成し、当該抗体を用いたフローサイトメトリによりヒト腫瘍細胞表面のＲＮＦ４３を特異的に検出できることも記載されている（１（２）イ、ウ、エ）。したがって、引用文献１に記載された各種腫瘍抗原の中からＲＮＦ４３を選択した当業者が、抗ＲＮＦ４３抗体に関する先行技術である引用文献３を参照すればなおのこと、本願発明の上記相違点１に係る構成は容易に想到し得たものである。 次に、相違点２について検討すると、引用文献１においては、「７．抗体変異体」の一項目として「ｃ．Ｆｃ領域変異体」が挙げられ、その冒頭で、Ｆｃγ受容体への結合性が低下したＦｃ領域変異体を開示する「米国特許出願公開第２０１２／０２５１５３１号明細書」が引用されるとともに、引用文献１記載の二特異性抗体は血中半減期が重要であるがＡＤＣＣなどの特定のエフェクター機能が不必要または有害なときに、ＦｃγＲ結合活性を欠く変異が望ましい候補となることや、ＦｃγＲ結合活性を低下させる具体的なアミノ酸置換について、学術文献や上記米国特許出願公開明細書を引用して記載されている（１（１）ウ 【０９９３】、【０９９５】）。 したがって、引用文献１に接した当業者にとって、引用発明において、天然の同じＩｇＧアイソタイプのＦｃ領域と比較して、低下したＦｃγＲ結合親和性を有するＦｃ改変を行うことは容易に想到し得たことにすぎない。 そして、本願発明が引用文献１及び３に基づいて当業者が予測し得る範囲を超える顕著な効果を有するとは認めることができない。 （４） 小括 上記（１）～（３）の次第であるから、本願発明は、引用文献１に記載された発明、あるいは、引用文献１及び３に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものである。 第５ むすび 以上のとおり、本願発明は、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであるから、その余について検討するまでもなく、本願は拒絶すべきものである。 よって、結論のとおり審決する。