2021-700383

特許第６７８１３５５号発明「洞房結節様ペースメーカー心筋細胞および心室様心筋細胞を作製および使用するための方法」の特許異議申立事件について、次のとおり決定する。

結 論 特許第６７８１３５５号の特許請求の範囲を訂正請求書に添付された訂正特許請求の範囲のとおり、訂正後の請求項〔１～１６、２２〕、〔１７～２１〕について訂正することを認める。 特許第６７８１３５５号の請求項１～７、９～１０、１２、１５～２２に係る特許を維持する。 特許第６７８１３５５号の請求項８、１１、１３～１４に係る特許についての特許異議の申立てを却下する。

理 由 第１ 手続の経緯 特許第６７８１３５５号の請求項１～２２に係る特許についての出願は、平成２８年２月１７日（パリ条約による優先権主張 ２０１５年２月１７日 （ＵＳ）アメリカ合衆国）を国際出願日とする特願２０１７－５６０８４５号の一部を令和２年６月２４日に新たに特許出願されたものであって、同年１０月１９日にその特許権の設定登録がされ、同年１１月４日に特許掲載公報が発行された。その後、その請求項１～２２に係る特許について、令和３年４月２６日に特許異議申立人 山崎 浩一郎により特許異議の申立てがされた。 その後の手続の経緯は、次のとおりである。 令和３年 ９月２１日付け ： 取消理由通知書 同年１２月２２日 ： 訂正請求書、意見書（特許権者） 令和４年 ３月８日付け ： 通知書（特許異議申立人宛） 同年 ４月１１日 ： 意見書（特許異議申立人） 同年 ７月 ５日付け ： 取消理由通知書 同年 ９月１５日 ： 手続補正書、意見書（特許権者） 第２ 補正の適否 令和４年９月１５日提出の手続補正書による補正は、令和３年１２月２２日提出の訂正請求書を補正するとともに、訂正請求書に添付された訂正特許請求の範囲を、以下のように補正するものである。 （１）補正事項１ 補正前の請求項９に、「請求項１～７の何れか１項」と記載されているのを「請求項２～７の何れか１項」に補正する。 （２）補正事項２ 補正前の請求項１２に、「請求項１～１０の何れか１項」と記載されているのを「請求項１～７および９～１０の何れか１項」に補正し、補正前の訂正請求書の「（２）訂正事項」に新たな訂正事項１３として追加し、「（３）訂正の理由」に新たな訂正事項１３に関する説明を追加する。 （３）補正事項３ 補正事項２の補正に伴い、追加される訂正事項１３より後の訂正事項の番号を補正する。 （３）補正事項４ 補正前の請求項１７に、「工程と含む」と記載されているのを「工程とを含む」に補正する。 （５）補正事項５ 補正前の訂正請求書の「（３－２－９）訂正事項９」に、「対応関係明確」と記載されているのを「対応関係を明確」に補正する。 補正事項１は、引用請求項から請求項１を削除するものであり、訂正請求書の要旨を変更するものではない。 補正事項２は、請求項８の削除に伴う整合をとるために、新たな訂正事項１３（請求項８の削除に伴う請求項１２の引用請求項からの請求項８の削除）を追加するものであり、訂正請求書の要旨を変更するものではない。 補正事項３は、形式的な補正をするものであり、各訂正事項について実質的な内容を変更するものではないので、訂正請求書の要旨を変更するものではない。 補正事項４は、明らかな誤記を補正するものであり、訂正事項１７について実質的な内容を変更するものではないので、訂正請求書の要旨を変更するものではない。 補正事項５は、明らかな誤記を補正するものであり、訂正事項９について実質的な内容を変更するものではないので、訂正請求書の要旨を変更するものではない。 したがって、令和４年９月１５日になされた訂正請求書の補正は、特許法１２０条の５第９項で準用する同法１３１条の２第１項に適合する。 第３ 訂正の適否 上記第２のとおり、令和４年９月１５日にされた訂正請求書の補正は適法なものと認められるので、以下、令和４年９月１５日提出の手続補正書により補正された訂正請求書に記載された訂正事項について検討する。 １ 訂正の内容 令和４年９月１５日提出の手続補正書により補正された訂正請求書の訂正請求（以下、「本件訂正請求」という。）による訂正の内容は、次のとおりである。 （１）訂正事項１ 特許請求の範囲の請求項１に、「ａ．多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と；」を、「心筋細胞集団を産生する方法であって、」と「ａ．心血管中胚葉細胞を」との間に追加する。 （２）訂正事項２ 特許請求の範囲の請求項１に、「ａ．心血管中胚葉細胞を」と記載されているのを「ｃ．前記心血管中胚葉細胞を」に訂正し、「心血管前駆細胞を生成し」と記載されているのを「心血管前駆細胞を生成する工程と」に訂正し、「「ｂ．」と記載されているのを「ｄ．」に訂正する。 （３）訂正事項３ 特許請求の範囲の請求項１に、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方を含む心臓誘導培地中」と記載されているのを「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中」に訂正する。 （４）訂正事項４ 特許請求の範囲の請求項２に、「前記心血管中胚葉細胞が、多能性幹細胞（ＰＳＣ）から生成される、請求項１に記載の方法であって、 ａ．前記ＰＳＣを、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程 を含む方法に従って、心血管中胚葉細胞が生成される、」と記載されているのを削除する。 （５）訂正事項５ 特許請求の範囲の請求項２に、「ｅ．前記心筋細胞集団からＳＩＲＰＡ陽性で、ＣＤ９０陰性の心筋細胞を単離し、ＮＫＸ２－５の発現について陽性の心筋細胞を選択して、心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程をさらに含む、請求項１に記載の」を、「方法。」の前に追加する。 （６）訂正事項６ 特許請求の範囲の請求項６に、「更に、前記心筋細胞集団から心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）集団を単離する工程であって、ＮＫＸ２－５レポーター構築物の発現に従って、ＮＫＸ２－５陽性心筋細胞を選択する工程を含む」と記載されているのを、「前記心筋細胞集団から心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程において、前記ＮＫＸ２－５レポーター構築物の発現に従って、ＮＫＸ２－５陽性心筋細胞を選択する」に訂正する。 （７）訂正事項７ 特許請求の範囲の請求項８を削除する。 （８）訂正事項８ 特許請求の範囲の請求項９に、「請求項８に記載の方法」と記載されているのを、「請求項２～７の何れか１項に記載の方法」に訂正する。 （９）訂正事項９ 特許請求の範囲の請求項９に、「前記心臓誘導培地は、更にＶＥＧＦを含む」と記載されているのを削除する。 （１０）訂正事項１０ 特許請求の範囲の請求項９に、「前記心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団は、少なくとも７０％のＶＬＣＭを含む」を、「、請求項」の前に追加する。 （１１）訂正事項１１ 特許請求の範囲の請求項１０に、「請求項８又は９」と記載されているのを、「請求項９」に訂正する。 （１２）訂正事項１２ 特許請求の範囲の請求項１１を削除する。 （１３）訂正事項１３ 特許請求の範囲の請求項１２に、「請求項１～１０の何れか１項に記載の方法」と記載されているのを、「請求項１～７および９～１０の何れか１項に記載の方法」に訂正する。 （１４）訂正事項１４ 特許請求の範囲の請求項１２に、「更にＳＢ－４３１５４２を含む」と記載されているのを、「ＳＢ－４３１５４２を含む」に訂正する。 （１５）訂正事項１５ 特許請求の範囲の請求項１３を削除する。 （１６）訂正事項１６ 特許請求の範囲の請求項１４を削除する。 （１７）訂正事項１７～１９ 特許請求の範囲の請求項１７に、「前記心血管中胚葉細胞が、多能性幹細胞（ＰＳＣ）から生成される、請求項１２に記載の方法であって、 ａ．前記ＰＳＣを、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と を含む方法に従って、心血管中胚葉細胞が生成される、方法。」と記載されているのを、「心筋細胞集団を産生する方法であって、 ａ．多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と； ｃ．前記心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびＳＢ－４３１５４２を含む心臓誘導培地中で、一定期間インキュベートして、ＮＫＸ２－５を発現する心血管前駆細胞を生成する工程と； ｄ．ＶＥＧＦを含む基礎培地中で前記心血管前駆細胞を一定期間インキュベートし、ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞を選択して心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む心筋細胞集団を生成する工程とを含む、方法。」に訂正する。 ２ 一群の請求項について 訂正前の請求項２～２２は、訂正前の請求項１を直接又は間接的に引用するものであって、訂正事項１～３によって記載が訂正される請求項１に連動して訂正されるものであるから、訂正前の請求項１～２２は、特許法第１２０条の５第４項に規定する一群の請求項である。 したがって、本件訂正請求による訂正は、特許法第１２０条の５第４項に規定する一群の請求項について請求されたものである。 また、本件訂正請求のうち、訂正後の請求項１７～２１について、当該請求項についての訂正が認められた場合には、訂正後の請求項１とは別の訂正単位として扱われることを求めるものである。 ３ 訂正の目的の適否、特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否、新規事項追加の有無、独立特許要件 （１）訂正事項１について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１は、訂正前の請求項１に、「ａ．多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と；」を追加するものであり、発明特定事項の直列的付加に該当するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１は、発明特定事項の直列的付加に該当するものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正前の請求項２に、「前記心血管中胚葉細胞が、多能性幹細胞（ＰＳＣ）から生成される、請求項１に記載の方法であって、 ａ．前記ＰＳＣを、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程 を含む方法に従って、心血管中胚葉細胞が生成される」と記載されており、また、特許明細書の段落【００１５】には、「ａ．ＢＭＰ成分、随意にＢＭＰ４を含み、随意にＲｈｏ関連プロテインキナーゼ（ＲＯＣＫ）阻害剤をさらに含む胚様体培地中で、ｈＰＳＣを一定期間インキュベートして胚様体を生成する工程； ｂ．ＢＭＰ成分、随意にＢＭＰ４、およびアクチビン成分、随意にアクチビンＡおよび随意にＦＧＦ成分、随意にｂＦＧＦを含む中胚葉誘導培地中で、胚様体を一定期間インキュベートして心血管中胚葉細胞を生成する工程」と記載されているから、訂正事項１は、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （２）訂正事項２について ア 訂正の目的の適否 訂正事項２は、訂正前の請求項１に記載されている「ａ．心血管中胚葉細胞を」の前に、「ａ．・・・・・・工程と； ｂ．・・・・・・、心血管中胚葉細胞を生成する工程と；」を追加したことに伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするために、「ａ．心血管中胚葉細胞を」と記載されているのを「ｃ．前記心血管中胚葉細胞を」に訂正し、「ｂ．」と記載されているのを「ｄ．」に訂正するものであり、また、他の記載との整合性を図るために「心血管前駆細胞を生成し」と記載されているのを「心血管前駆細胞を生成する工程と」に訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項２は、明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項２は、明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項２に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （３）訂正事項３について ア 訂正の目的の適否 訂正事項３は、訂正前の請求項１に、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方を含む心臓誘導培地中」と記載されているのを、択一的記載を両方の成分を含む記載にし、更に追加の成分を含むように、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中」に限定するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項３は、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方を含む心臓誘導培地中」と記載されているのを、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中」に限定するものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正前の請求項１に、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方を含む心臓誘導培地」と記載され、請求項８に、「前記心臓誘導培地は、ＷＮＴ阻害剤を含む」と記載され、請求項９に、「前記心臓誘導培地は、更にＶＥＧＦを含む」と記載され、請求項１１に「前記心臓誘導培地は、更にＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤の少なくとも１種を含む」と記載されており、また、特許明細書の段落【０００９】には、「１または複数のＷＮＴ阻害剤、随意にＩＷＰ２、およびＶＥＧＦ；ならびに随意にＦＧＦ成分および／またはアクチビン／ノーダル阻害剤、随意にＳＢ－４３１５４２を含む心臓誘導培地中で；一定期間インキュベートして、ＮＫＸ２－５を発現する心血管前駆細胞を生成し」と記載され、特許明細書の段落【００４１】には、「用語「心臓誘導培地」は、本明細書において、例えばＷＮＴ阻害剤、随意にＩＷＰ２、ＶＥＧＦおよび／または随意にアクチビン／ノーダル阻害剤、随意にＳＢ－４３１５４２を含むＳｔｅｍＰｒｏ－３４最少培地などの心筋前駆細胞を支持する培地である。望ましい細胞型に応じて、心臓誘導培地はＢＭＰ成分、レチノイン酸、ＦＧＦ阻害剤またはＦＧＦ成分をも含んでよい。」と記載されているから、訂正事項３は、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項３に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （４）訂正事項４について ア 訂正の目的の適否 訂正事項４は、訂正前の請求項１に、「ａ．多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と；」を追加したことに伴い、訂正後の請求項１の記載との整合性を図るために、訂正前の請求項２に、「前記心血管中胚葉細胞が、多能性幹細胞（ＰＳＣ）から生成される、請求項１に記載の方法であって、 ａ．前記ＰＳＣを、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程 を含む方法に従って、心血管中胚葉細胞が生成される、」と記載されているのを削除することにより明瞭でない記載を明瞭にするために訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。、 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項４は、訂正後の請求項１の記載との整合性を図るために、「前記心血管中胚葉細胞が、多能性幹細胞（ＰＳＣ）から生成される、請求項１に記載の方法であって、 ａ．前記ＰＳＣを、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程 を含む方法に従って、心血管中胚葉細胞が生成される、」を削除することにより明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項４は、明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項４に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （５）訂正事項５について ア 訂正の目的の適否 訂正事項５は、訂正前の請求項２に、「ｅ．前記心筋細胞集団からＳＩＲＰＡ陽性で、ＣＤ９０陰性の心筋細胞を単離し、ＮＫＸ２－５の発現について陽性の心筋細胞を選択して、心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程をさらに含む、」を追加するものであり、発明特定事項の直列的付加に該当するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項５は、発明特定事項の直列的付加に該当するものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正前の請求項１４に、「前記心筋細胞集団を単離する工程は、シグナル調節タンパク質α（ＳＩＲＰＡ）および胸腺細胞分化抗原１（ＴＨＹ－１／ＣＤ９０）を使用して行う」と記載されており、また、特許明細書の段落【００９９】には、「ＳＡＮＬＣＭを実質的に欠く心筋細胞集団を単離することは： ａ．ＳＩＲＰＡマーカー陽性心筋細胞を単離すること；および／または ｂ．ＮＫＸ２－５発現に対して陽性かつ／またはＣＤ９０発現に対して陰性の心筋細胞を選択する」と記載され、特許明細書の段落【０１０２】には、「本明細書に記載されるようにＦＧＦを含む心臓誘導培地で処置した培養からＮＫＸ２－５陽性細胞を選択することにより心室様心筋細胞が濃縮されることが本明細書において実証される。・・・・・・ＳＡＮＬＣＭを実質的に欠く集団を作製するために、本明細書に記載される方法に従って（例えば、心臓誘導段階のＶＥＧＦおよびＩＷＰ２を使用して）処置された心筋細胞集団のアリコートを試験して、ＮＫＸ２－５発現のレベルが高いことを確認することができる。」と記載されているから、訂正事項５は、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項５に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （６）訂正事項６について ア 訂正の目的の適否 訂正事項６は、訂正前の請求項２に、「ｅ．前記心筋細胞集団からＳＩＲＰＡ陽性で、ＣＤ９０陰性の心筋細胞を単離し、ＮＫＸ２－５の発現について陽性の心筋細胞を選択して、心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程をさらに含む、」を追加したことに伴い、訂正後の請求項２の記載との整合性を図るために、「更に、前記心筋細胞集団から心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）集団を単離する工程であって、ＮＫＸ２－５レポーター構築物の発現に従って、ＮＫＸ２－５陽性心筋細胞を選択する工程を含む」と記載されているのを、「前記心筋細胞集団から心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程において、前記ＮＫＸ２－５レポーター構築物の発現に従って、ＮＫＸ２－５陽性心筋細胞を選択する」に訂正することにより明瞭でない記載を明瞭にするために訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項６は、訂正後の請求項２の記載との整合性を図るために、明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項６は、明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項６に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （７）訂正事項７について ア 訂正の目的の適否 訂正事項７は、訂正前の請求項８を削除するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項７は、請求項の削除であるから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項７は、請求項の削除であるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項７に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （８）訂正事項８について ア 訂正の目的の適否 訂正事項８は、訂正前の請求項８に、「請求項１～７の何れか１項に記載の方法」と記載されていたが、訂正前の請求項８の削除に伴い、訂正後の請求項２～７の記載との整合性を図るために、訂正前の請求項９に「請求項８に記載の方法」と記載されているのを、「請求項２～７の何れか１項に記載の方法」に訂正することにより、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするために訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項８は、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項８は、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項８に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （９）訂正事項９について ア 訂正の目的の適否 訂正事項９は、訂正前の請求項１に、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方を含む心臓誘導培地中」と記載されているのを「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中」に訂正したことに伴い、訂正後の請求項１の記載との整合性を図るために、訂正前の請求項９に、「前記心臓誘導培地は、更にＶＥＧＦを含む」と記載されているのを削除することにより明瞭でない記載を明瞭にするために訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項９は、訂正後の請求項１の記載との整合性を図るために、「前記心臓誘導培地は、更にＶＥＧＦを含む」を削除することにより明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項９は、明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項９に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１０）訂正事項１０について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１０は、訂正前の請求項９に、「前記心筋細胞集団から心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団は、少なくとも７０％のＶＬＣＭを含む」を追加するものであり、発明特定事項の直列的付加に該当するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１０は、発明特定事項の直列的付加に該当するものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 特許明細書の段落【０１１４】には、「ＶＬＣＭに富む心筋細胞集団は、少なくとももしくは約１５％のＶＬＣＭ、少なくとももしくは約２０％のＶＬＣＭ、少なくとももしくは約３０％のＶＬＣＭ、少なくとももしくは約５０％のＶＬＣＭ、少なくとももしくは約７０％のＶＬＣＭ、または少なくとももしくは約９０％のＶＬＣＭを含む。」と記載されているから、訂正事項１０は、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１０に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１１）訂正事項１１について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１１は、訂正前の請求項１０が、訂正前の「請求項８又は９」を引用する記載であったものを、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするために訂正後の「請求項９」を引用する記載に訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１１は、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１１は、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１１に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１２）訂正事項１２について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１２は、訂正前の請求項１１を削除するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１２は、請求項の削除であるから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１２は、請求項の削除であるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１２に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１３）訂正事項１３ ア 訂正の目的の適否 訂正事項１３は、訂正前の請求項１２が、訂正前の「請求項１～１０の何れか１項」を引用する記載であったものを、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするために訂正後の「請求項１～７および９～１０の何れか１項」を引用する記載に訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１３は、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１３は、訂正前の請求項８の削除に伴い生じる明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１３に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１４）訂正事項１４について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１４は、訂正前の請求項１２に、「更にＳＢ－４３１５４２を含む」と記載されているのを、訂正後の請求項１が、アクチビン／ノーダル阻害剤が必須成分として規定されたことに伴い、訂正後の請求項１の記載との整合性を図るために、「更に」を削除することにより明瞭でない記載を明瞭にするために訂正するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第３号に規定する明瞭でない記載の釈明を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１４は、訂正後の請求項１の記載との整合性を図るために、「更に」を削除することにより明瞭でない記載を明瞭にするものであり、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１４は、明瞭でない記載を明瞭にするものであるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した事項の範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する特許法第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１４に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１５）訂正事項１５について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１５は、訂正前の請求項１３を削除するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１５は、請求項の削除であるから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１５は、請求項の削除であるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１５に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１６）訂正事項１６について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１６は、訂正前の請求項１４を削除するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１６は、請求項の削除であるから、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではなく、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１６は、請求項の削除であるから、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１６に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 （１７）訂正事項１７～１９について ア 訂正の目的の適否 訂正事項１７～１９は、訂正前の請求項１７が訂正前の請求項１２を引用する記載であったものを、請求項間の引用関係を解消し、請求項１２を引用しないものとするための訂正であって、特許法第１２０条の５第２項ただし書第４号に規定する「他の請求項の記載を引用する請求項の記載を当該他の請求項の記載を引用しないものとすること」を目的とするものである。 さらに、前記目的に加え、訂正事項１７～１９に含まれる、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方」との記載を「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分および」にする訂正は、択一的記載を両方の成分を含む記載にし、更に追加の成分を含むようにするものであり、また、「ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞に富む心筋細胞集団を生成する」との記載を「ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞を選択して心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む心筋細胞集団を生成する」にする訂正は、発明特定事項の直列的付加に該当するものであるから、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号に規定する特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。 イ 特許請求の範囲の実質上の拡張又は変更の存否 訂正事項１７～１９は、請求項１２を引用しないものとするための訂正であって、何ら実質的な内容の変更を伴うものではなく、また、上記（３）イ．及び（５）イ．で述べたとおり、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方」との記載を「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分および」にする訂正、「ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞に富む心筋細胞集団を生成する」との記載を「ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞を選択して心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む心筋細胞集団を生成する」にする訂正は、カテゴリーや対象、目的を変更するものではないから、実質上特許請求の範囲を拡張し、または変更するものには該当せず、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第６項に適合するものである。 ウ 新規事項追加の有無 訂正事項１７～１９は、請求項１２を引用しないものとするための訂正であり、また、上記（３）ウ．及び（５）ウ．で述べたとおり、「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦまたはその両方」との記載を「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分および」にする訂正、「ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞に富む心筋細胞集団を生成する」との記載を「ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞を選択して心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む心筋細胞集団を生成する」にする訂正は、願書に添付した明細書、特許請求の範囲又は図面に記載した範囲内の訂正であり、特許法第１２０条の５第９項で準用する第１２６条第５項に適合するものである。 エ 独立特許要件 本件においては、すべての請求項について特許異議申立てがされているので、訂正事項１７～１９に関して、特許法第１２０条の５第９項で読み替えて準用する第１２６条第７項の独立特許要件は適用されない。 ４ まとめ 以上のとおりであるから、本件訂正請求による訂正は、特許法第１２０条の５第２項ただし書第１号、第３号及び第４号に掲げる事項を目的とするものであり、かつ、同条第９項において準用する同法第１２６条第５項及び第６項の規定に適合するので、訂正後の請求項〔１～１６、２２〕、〔１７～２１〕について訂正することを認める。 第４ 訂正後の本件発明 上記第３のとおり、本件訂正は認容されるので、本件訂正請求により訂正された請求項１～２２に係る発明（以下、「本件発明１～２２」という。）は、令和４年９月１５日提出の手続補正書により補正された訂正請求書に添付された訂正特許請求の範囲の請求項１～２２に記載された次の事項により特定されるとおりのものである。下線は訂正箇所を示すものである。 「【請求項１】 心筋細胞集団を産生する方法であって、 ａ．多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と； ｃ．前記心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中で、一定期間インキュベートして、ＮＫＸ２－５を発現する心血管前駆細胞を生成する工程と； ｄ．ＶＥＧＦを含む基礎培地中で前記心血管前駆細胞を一定期間インキュベートして、ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞に富む心筋細胞集団を生成する工程と を含む、方法。 【請求項２】 ｅ．前記心筋細胞集団からＳＩＲＰＡ陽性で、ＣＤ９０陰性の心筋細胞を単離し、ＮＫＸ２－５の発現について陽性の心筋細胞を選択して、心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程 をさらに含む、請求項１に記載の方法。 【請求項３】 前記ＰＳＣがヒトＰＳＣ（ｈＰＳＣ）である、請求項２に記載の方法。 【請求項４】 前記ｈＰＳＣが、ヒト誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）またはヒト胚幹細胞（ｈＥＳＣ）である、請求項３に記載の方法。 【請求項５】 前記ｈＰＳＣが、ＮＫＸ２－５レポーター構築物を含むｈＰＳＣである、請求項３又は４に記載の方法。 【請求項６】 前記心筋細胞集団から心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団を単離する工程において、前記ＮＫＸ２－５レポーター構築物の発現に従って、ＮＫＸ２－５陽性心筋細胞を選択する、請求項５に記載の方法。 【請求項７】 前記ＮＫＸ２－５レポーター構築物が、蛍光ＮＫＸ２－５レポーター構築物である、請求項５又は６に記載の方法。 【請求項８】（削除） 【請求項９】 前記心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む集団は、少なくとも７０％のＶＬＣＭを含む、請求項２～７の何れか１項に記載の方法。 【請求項１０】 前記ＷＮＴ阻害剤は、ＩＷＰ２である、請求項９に記載の方法。 【請求項１１】（削除） 【請求項１２】 前記心臓誘導培地は、ＳＢ－４３１５４２を含む、請求項１～７および９～１０の何れか１項に記載の方法。 【請求項１３】（削除） 【請求項１４】（削除） 【請求項１５】 前記胚様体培地中のＢＭＰ成分が、ＢＭＰ４であり、前記中胚葉誘導培地中のＢＭＰ成分が、ＢＭＰ４である、請求項２に記載の方法。 【請求項１６】 前記胚様体培地は、更にＲｈｏ関連プロテインキナーゼ（ＲＯＣＫ）阻害剤を含み、前記中胚葉誘導培地中のアクチビン成分は、アクチビンＡであり、前記中胚葉誘導培地は、更にｂＦＧＦを含む、請求項１５に記載の方法。 【請求項１７】 心筋細胞集団を産生する方法であって、 ａ．多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と； ｂ．前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と； ｃ．前記心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびＳＢ－４３１５４２を含む心臓誘導培地中で、一定期間インキュベートして、ＮＫＸ２－５を発現する心血管前駆細胞を生成する工程と； ｄ．ＶＥＧＦを含む基礎培地中で前記心血管前駆細胞を一定期間インキュベートし、ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞を選択して心室様心筋細胞（ＶＬＣＭ）に富む心筋細胞集団を生成する工程とを含む、方法。 【請求項１８】 前記胚様体培地中のＢＭＰ成分が、ＢＭＰ４であり、前記中胚葉誘導培地中のＢＭＰ成分が、ＢＭＰ４である、請求項１７に記載の方法。 【請求項１９】 前記胚様体培地は、更にＲｈｏ関連プロテインキナーゼ（ＲＯＣＫ）阻害剤を含み、前記中胚葉誘導培地中のアクチビン成分は、アクチビンＡであり、前記中胚葉誘導培地は、更にｂＦＧＦを含む、請求項１８に記載の方法。 【請求項２０】 前記ＰＳＣがヒトＰＳＣ（ｈＰＳＣ）である、請求項１９に記載の方法。 【請求項２１】 前記ｈＰＳＣが、ヒト誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）またはヒト胚幹細胞（ｈＥＳＣ）である、請求項２０に記載の方法。 【請求項２２】 前記蛍光ＮＫＸ２－５レポーター構築物が、ＮＫＸ２－５：ＧＦＰレポーター構築物である、請求項７に記載の方法。」 第５ 取消理由の概要 １ 令和３年９月２１日付け取消理由通知に記載した取消理由について 訂正前の請求項１～２２に係る特許に対して、令和３年９月２１日付けで特許権者に通知した取消理由の要旨は、次のとおりである。 なお、取消理由通知において採用しなかった特許異議申立理由はない。 （１）特許法第２９条第１項第３号及び第２９条第２項（甲第１号証を主引用例とする新規性欠如及び進歩性欠如） 請求項１～４、８～１５、１７～１８に係る特許は、甲第１号証に記載された発明であって、特許法第２９条第１項第３号に該当するから、請求項１～４、８～１５、１７～１８に係る特許は、特許法第２９条第１項の規定に違反してされたものであり、また、請求項５～７、１１、１６、１９～２２に係る特許は、甲第１号証に記載された発明及び甲第２～４号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、請求項５～７、１１、１６、１９～２２に係る特許は、特許法第２９条第２項の規定に違反してされたものである。 （２）特許法第２９条第１項第３号及び第２９条第２項（甲第２号証を主引用例とする新規性欠如及び進歩性欠如） 請求項１～４、８～１２、１５～２１に係る特許は、甲第２号証に記載された発明であって、特許法第２９条第１項第３号に該当するから、請求項１～４、８～１２、１５～２１に係る特許は、特許法第２９条第１項の規定に違反してされたものであり、また、請求項５～７、１１、１３～１４、２２に係る特許は、甲第２号証に記載された発明及び甲第１、３～４号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、請求項５～７、１１、１３～１４、２２に係る特許は、特許法第２９条第２項の規定に違反してされたものである。 （３）特許法第３６条第６項第１号（サポート要件違反） ア 心臓誘導培地の成分について 発明の詳細な説明に、心臓誘導培地として実施例等により具体的に記載されているのは、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦおよびアクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地だけであり、ＷＮＴ阻害剤のみを含む培地、ＶＥＧＦのみを含む培地、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含まない培地を用いて、心血管前駆細胞を生成することができることを裏付ける記載は何ら示されていないから、請求項１～２２に係る発明は、発明の詳細な説明に記載されたものとはいえないので、請求項１～２２に係る特許は、特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない特許出願に対してされたものである。 イ 心血管中胚葉細胞の由来について 発明の詳細な説明に、心血管中胚葉細胞として実施例等により具体的に記載されているのは、多能性幹細胞から胚様体を生成し、該胚様体を培養して得られた心血管中胚葉細胞だけであり、それ以外の心血管中胚葉細胞を用いて、心血管前駆細胞を生成することができることを裏付ける記載は何ら示されていないし、また、多能性幹細胞から胚様体を生成し、該胚様体を培養して得られた心血管中胚葉細胞以外の心血管中胚葉細胞をどのようにして取得するのか何ら具体的に記載されていないから、請求項１、８～１６に係る発明は、発明の詳細な説明に記載されたものとはいえないので、請求項１、８～１６に係る特許は、特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない特許出願に対してされたものである。 ２ 令和４年７月５日付け取消理由通知に記載した取消理由について 補正前の請求項９、１２、１７に係る特許に対して、令和４年７月５日付けで特許権者に通知した取消理由の要旨は、次のとおりである。 補正前の請求項９の「請求項１～７の何れか１項」、補正前の請求項１２の「請求項１～１０の何れか１項」、補正前の請求項１７の「工程と含む」という記載は不明確であるので、請求項９、１２、１７に係る特許は、特許請求の範囲の記載が特許法第３６条第６項第２号に規定する要件を満たしていない特許出願に対してされたものである。 第６ 甲号証の記載 甲第１号証～甲第５号証には、以下の事項が記載されている（英語で記載されている証拠は、日本語訳で摘記する。）。 １ 甲第１号証：Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２０１４．Ｏｃｔ．）Ｖｏｌ．３２，Ｎｏ．１０，ｐ．１０２６－１０３５ ａｎｄ ＯＮＬＩＮＥ ＭＥＴＨＯＤＳ （甲１－１）「ｈＰＳＣ培養の維持と分化 ｈＥＳＣとｈｉＰＳＣは、以前報告２１、３８、４８されたように維持された。 ・・・・・・・・・・・・ ０日目に、ｈＥＳＣを解離させ、ＳｔｅｍＰｒｏ－３４培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ｃａｔ．ｎｏ．１０６４００１９）で、組換えヒト（ｒｈ）ＢＭＰ４（０．５ｎｇ／ｍｌ，Ｒ＆Ｄ，ｃａｔ．ｎｏ．３１４－ＢＰ）の存在下で胚様体を生成した。２４時間後、ｒｈＢＭＰ４（３ｎｇ／ｍｌ）、ｒｈアクチビンＡ（２ｎｇ／ｍｌ，Ｒ＆Ｄ，ｃａｔ．ｎｏ．３３８－ＡＣ）、ｒｈｂＦＧＦ（５ｎｇ／ｍｌ，Ｒ＆Ｄ，ｃａｔ．ｎｏ．２３３－ＦＢ）を添加したＳｔｅｍＰｒｏ－３４で胚様体を培養し、中胚葉形成を誘導した。分化４日目（補足図３ｂに示すようにｈｉＰＳＣは３日目）に、ＴｒｙｐＬＥ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて胚様体を解離させ、ｒｈＤＫＫ１（１５０ｎｇ／ｍｌ，Ｒ＆Ｄ，ｃａｔ．ｎｏ．５４３９－ＤＫ／ＦＣ）、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２（５．４μＭ，Ｓｉｇｍａ，ｃａｔ．ｎｏ．Ｓ－４３１７）、ｒｈＶＥＧＦ（５ｎｇ／ｍｌ）を添加したＳｔｅｍＰｒｏ－３４を用いて、ゼラチンコートしたプレート上に１×１０５細胞／ウェルで単層培養した。６日目に、培地をｒｈＶＥＧＦ（５ｎｇ／ｍｌ）を添加したＳｔｅｍＰｒｏ－３４に変更し、２日ごとに培地を変更しながら分化１５日目までこの培地で培養した。ＷＮＴシグナルを含む実験では、ＣＨＩＲ－９９０２１（Ｓｔｅｍｇｅｎｔ，ｃａｔ．ｎｏ．０４－００４）、ＸＡＶ－９３９（Ｒ＆Ｄ，ｃａｔ．ｎｏ．３７４８）またはＩＷＰ２（Ｒ＆Ｄ，ｃａｔ．ｎｏ．３５３３）を示された濃度で使用した。」（オンライン方法、「ｈＰＳＣ培養の維持と分化」の項） （甲１－２）「 ［図：0001393975000001.jpg］ 図１ ＢＭＰはｈＥＳＣ由来の中胚葉から心筋細胞への分化を特定する。 （ａ）ｈＥＳＣを心筋細胞系統に分化させるために使用したプロトコールの３つの主要な発達段階を強調したスキーム。１）中胚葉誘導、２）心血管特定化、３）成熟。 ・・・・・・・・・・・・ （ｂ）Ｄ４およびＤ５中胚葉集団におけるＫＤＲ＋ＰＤＧＦＲＡ＋細胞の頻度、およびＤ４中胚葉を無因子（無処理）、ＢＭＰ４（１０ｎｇ／ｍｌ）またはノギン（４００ｎｇ／ｍｌ）で処理して生成したＤ１５集団におけるＣＴＮＴ＋細胞の頻度のフローサイトメトリー解析。・・・・・・」（図１） （甲１－３）「 ［図：0001393975000002.jpg］ 図２ ＢＭＰ４処理がＷＴ１＋細胞を特定する。 （ａ）ＢＭＰ（１０ｎｇ／ｍｌ）処理、ノギン（４００ｎｇ／ｍｌ）処理、または追加因子なしで培養して生成した細胞集団の示された日（Ｄ）の培養物における、心筋遺伝子ＴＮＮＴ２とＮＫＫ２－５および心外膜遺伝子ＷＴ１とＴＢＸ１８のｑＲＴ－ＰＣＲによる発現解析・・・・・・」（図２） （甲１－４）「フローサイトメトリーと細胞選別 ・・・・・・・・・・・・ 抗ＳＩＲＰＡ－ＰＥ－Ｃｙ７ ・・・・・・・・・・・・ 抗ＣＤ９０－ＡＰＣ ・・・・・・・・・・・・ ＦＡＣＳのために、細胞は５％ＦＣＳを含むＩＭＤＭに１０６細胞／ｍｌの濃度で懸濁し、セルソーターをＦＡＣＳＡｒｉａＴＭＩＩ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を用いて選別した。」（オンライン方法、「フローサイトメトリーと細胞選別」の項） （甲１－５）「ｈＰＳＣの心筋細胞系統への分化は、３段階を通じて進行する。（ｉ）ＫＤＲおよびＰＤＧＦＲＡの発現で定義される心血管中胚葉の誘導、（ｉｉ）心血管中胚葉の心筋細胞への特定化、（ｉｉｉ）特定化された前駆細胞の機能的な心筋細胞への成熟（図１ａ）。」（第１０２７頁右欄第３行～第８行） （甲１－６）「ＷＮＴ阻害剤ＤＫＫ１及びアクチビン／ノーダル／ＴＧＦβ阻害剤ＳＢ－４３１５４２」（第１０２７頁右欄第２６行～第２７行） （甲１－７）「ＷＮＴシグナリング・・・・・・低分子アンタゴニストＸＡＶ９３９（ＸＡＶ）及びＩＷＰ２」（第１０３０頁左欄第３行～第５行） ２ 甲第２号証：国際公開第２０１４／１８５３５８号 （甲２－１）「［請求項１］多能性幹細胞から心筋細胞を製造する方法であって、次の（１）から（４）の工程を含む方法； （１）多能性幹細胞から胚様体を形成する工程、 （２）（１）の工程で得られた胚様体をアクチビンＡ、ＢＭＰ４およびｂＦＧＦを含有する培養液中で培養する工程、 （３）（２）の工程で得られた胚様体を解離する工程、および （４）（３）の工程で得られた細胞をＶＥＧＦおよびＷｎｔ阻害剤を含有する培養液中で培養して胚様体に再凝集させる工程。 ［請求項２］さらに以下の工程を含む、請求項１に記載された方法。 （５）（４）の工程で得られた胚様体をＶＥＧＦおよびｂＦＧＦを含有する培養液中で培養する工程。 ・・・・・・・・・・・・ ［請求項７］前記Ｗｎｔ阻害剤が、ＩＷＰ－３またはＩＷＰ－４である、請求項１から６のいずれか１項に記載された方法。 ［請求項８］前記工程（４）に用いられる培養液が、ＢＭＰ阻害剤および／またはＴＧＦβ阻害剤をさらに含む、請求項１から７のいずれか１項に記載された方法。 ［請求項９］前記ＢＭＰ阻害剤が、Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎであり、前記ＴＧＦβ阻害剤が、ＳＢ４３１５４２である、請求項８に記載された方法。」（請求項１～２、請求項７～９） （甲２－２）「［００４７］本発明において、Ｗｎｔ阻害剤とは、Ｗｎｔの受容体への結合からβカテニンの蓄積へと続くシグナル伝達を阻害する物質であり、受容体であるＦｒｉｚｚｌｅｄファミリーへの結合を阻害する物質、またはβカテニンの分解を促進する物質である限り特に限定されず、例えば、ＤＫＫ１タンパク質（例えば、ヒトの場合、ＮＣＢＩのアクセッション番号：ＮＭ＿０１２２４２）、スクレロスチン（例えば、ヒトの場合、ＮＣＢＩのアクセッション番号：ＮＭ＿０２５２３７）、ＩＷＲ－１（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、ＩＷＰ－２（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＩＷＰ－３（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＩＷＰ－４（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＰＮＵ－７４６５４（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＸＡＶ９３９（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）およびこれらの誘導体などが例示される。」（［００４７］） （甲２－３）「［００６９］心筋細胞誘導法（比較例：図１Ａ） 分化誘導の３日前（ｄａｙ－３）に２０１Ｂ７細胞株をＣｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ Ｂ溶液（Ｒｏｃｈｅ）で５分処理後、溶液を除去し、続いて０．２５％ Ｔｒｙｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で２～３分処理した。ＰＢＳ溶液（ナカライテスク）で洗浄後、得られたｉＰＳ細胞をセルスクレーパーによって剥離させて回収し、マトリゲルコート６ｗｅｌｌ プレートの１ｗｅｌｌに播種し、ＭＥＦ（マウス胎仔線維芽細胞）馴化培地（ＭＥＦ－ＣＭ）で３日間培養した。 ［００７０］続いて（ｄａｙ０）、Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ Ｂ溶液で１０分処理後溶液を除去し、続いて０．２５％ Ｔｒｙｐｓｉｎ－ＥＤＴＡで１～２分処理した後、セルスクレーパーを用いてｉＰＳ細胞を剥離し、１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ（Ｒｏｃｈｅ）、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ（ｓｉｇｍａ）、３．９×１０－３％ＭＴＧ （１－Ｔｈｙｏｇｌｙｃｅｒｏｌ）（ｓｉｇｍａ）、１０μＭ Ｒｏｃｋ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Ｙ－２７６３２、Ｗａｋｏ）および２ｎｇ／ｍＬ ＢＭＰ４（Ｒ＆Ｄ）を添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を加え、ピペッティングで小塊にして低接着６ｗｅｌｌ プレートの１ｗｅｌｌ分に移し、３７℃・５％酸素条件下で培養し胚様体（ＥＢ）を作製した。 ［００７１］翌日（ｄａｙ１）、ＥＢを遠心分離により回収し、低接着２４ｗｅｌｌ プレートの４ｗｅｌｌ分へ移し、１％Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１０ｎｇ／ｍＬ ＢＭＰ４、５ｎｇ／ｍＬ ｂＦＧＦ（Ｒ＆Ｄ）および６ｎｇ／ｍＬ Ａｃｔｉｖｉｎ Ａ（Ｒ＆Ｄ）を添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４中で３日間、３７℃・５％酸素条件下で培養した。 ［００７２］続いて（ｄａｙ４）、培地を除去し１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦ（Ｒ＆Ｄ）および１μＭ ＩＷＰ－３（Ｓｔｅｍｏｌｅｃｕｌｅ）を添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４中で、４日間、３７℃・５％酸素条件下で培養した。 ［００７３］続いて（ｄａｙ８）、培地を除去し１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦおよび５ｎｇ／ｍＬ ｂＦＧＦを添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４Ｐ中で、４日間、３７℃・５％酸素条件下で培養した。この時、２ 日に１度同じ条件の培地に交換した。 ［００７４］続いて（ｄａｙ１２）、通常の酸素濃度のインキュベーターに移し、８日間培養した。この時、２ 日に１度同じ条件の培地に交換した。 ［００７５］培養後（ｄａｙ２０）、得られた細胞を評価したところ、ｃＴＮＴの陽性細胞の含有率は５８．６％であった（図１Ｂ）。また、ｄａｙ８頃から拍動が認められた。 ［００７６］さらに、ｄａｙ４でのＩＷＰ－３をＩＷＰ－４に変更しても同様の結果が得られた。」（［００６９］～［００７６］） （甲２－４）「実施例１ ［００７７］改変心筋細胞誘導法 ２０１Ｂ７細胞株をＣＴＫ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＲｅｐｒｏＣＥＬＬ）で２分処理後、溶液を除去し、続いてＡｃｃｕｍａｘ（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で５分処理後、ピペッティングによりシングルセルへと解離した。遠心分離により細胞を回収し、１ｗｅｌｌあたり２５００ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌを低接着９６ｗｅｌｌディッシュ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）へ播種し、１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ（ｓｉｇｍａ）、３．９×１０－３％ＭＴＧ、１０μＭ Ｒｏｃｋ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒおよび２ｎｇ／ｍＬ ＢＭＰ４（Ｒ＆Ｄ）、０．５０％ Ｍａｔｒｉｇｅｌ（Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｄｕｃｅｄ）を添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４中、３７℃・５％酸素条件下にて培養して、ＥＢを形成させた（ｄａｙ０）。この時、１ｗｅｌｌあたり１０００ｃｅｌｌｓ以下または４０００ｃｅｌｌｓ以上によりＥＢ細胞を形成させると心筋細胞の誘導効率が下がることが確認された。 ［００７８］翌日（ｄａｙ１）、１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１８ｎｇ／ｍＬ ＢＭＰ４、１０ｎｇ／ｍＬ ｂＦＧＦおよび１２ｎｇ／ｍＬ Ａｃｔｉｖｉｎ Ａを添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４を等量、ＥＢの培養を行っている９６ｗｅｌｌプレート中に加え、３７℃・５％酸素条件にて３日間培養した。 ［００７９］続いて（ｄａｙ４）、得られたＥＢを自然落下させ培地を除去し、Ａｃｃｕｍａｘを添加し５分後、ピペティングによりシングルセルへ解離し、ＩＭＤＭ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を５ｍｌ加え、遠心分離により培地を除去した。１００００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌを低接着９６ｗｅｌｌディッシュ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）へ播種し、１％Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦおよび１μＭ ＩＷＰ－３を添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４中で、３７℃・５％酸素条件下で、４日間培養した。 ［００８０］続いて（ｄａｙ８）、得られたＥＢを回収し、１ｗｅｌｌあたりのＥＢ数が１０個を上回らないように２４ｗｅｌｌディッシュへと移した。１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦおよび５ｎｇ／ｍＬ ｂＦＧＦを添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４中で、４日間、３７℃・５％酸素条件下で培養した。この時、２ 日に１度同じ条件の培地に交換した。 ［００８１］続いて（ｄａｙ１２）、通常の酸素濃度のインキュベーターに移し、８日間培養した。この時、２ 日に１度同じ条件の培地に交換した。 ［００８２］培養後（ｄａｙ２０）、得られた細胞を評価したところ、ｃＴＮＴの陽性細胞の含有率は８２．９％であった（図２Ｂ右図）。 ［００８３］さらに、ｄａｙ４でのＩＷＰ－３をＩＷＰ－４に変更しても同様の結果が得られた。また、ｄａｙ４において、５．４μＭ ＳＢ４３１５４２（ｓｉｇｍａ）および０．６μＭ Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎ（ｓｉｇｍａ）をさらに培地へ添加することによっても同様の結果が得られた。 ［００８４］ここで、ｄａｙ４にてシングルセルへの解離を行わず、１％ Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、１５０μｇ／ｍＬ Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ、５０μｇ／ｍＬ Ａｓｃｏｒｂｉｃ Ａｃｉｄ、３．９×１０－３％ＭＴＧ 、１０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦおよび１μＭ ＩＷＰ－３を添加したＳＴＥＭＰＲＯ ３４への培地交換のみを行い同様の培養を行ったところ、２０日目でのｃＴＮＴの陽性細胞の含有率は、６９．３％であった（図２Ｂ左図）。このことより、ｄａｙ４でのシングルセルへの解離は、心筋細胞の誘導において効率を高めることが確認された。」（［００７７］～［００８４］） （甲２－５）「 ［図：0001393975000003.jpg］ 」（図１） （甲２－６）「［０００９］図１Ａは、多能性幹細胞から心筋細胞を分化誘導するプロトコールを示す。図１Ｂは、ｉＰＳ細胞（２０１Ｂ７）から従来法によって得られた細胞におけるＴＮＴ陽性細胞の含有率をフローサイトメトリーで評価した結果を示す。」（［０００９］） （甲２－７）「［００１３］＜多能性幹細胞＞ 本発明で使用可能な多能性幹細胞は、生体に存在する全ての細胞に分化可能である多能性を有し、かつ、増殖能をも併せもつ幹細胞であり、それには、例えば胚性幹（ＥＳ）細胞、核移植により得られるクローン胚由来の胚性幹（ｎｔＥＳ）細胞、精子幹細胞（「ＧＳ細胞」）、胚性生殖細胞（「ＥＧ細胞」）、人工多能性幹（ｉＰＳ）細胞、培養線維芽細胞や骨髄幹細胞由来の多能性細胞（Ｍｕｓｅ細胞）などが含まれる。・・・・・・本発明の心筋分化誘導プロトコールに対して適応性が高い細胞は、別段限定されることはないが、例えば、ＥＳ細胞について、ＫｈＥＳ１、ＫｈＥＳ３等、ｉＰＳ細胞について、２０１Ｂ７、６１０Ｂ１、ＭＹＨ、４０９Ｂ２、４２７Ｆ１、６０６Ａ１、６１０Ｂ１、４５７Ｃ１、６０４Ａ１、６４８Ａ１等の細胞株が挙げられる。・・・・・・ ［００１９］ヒトＥＳ細胞株は、例えばＷＡ０１（Ｈ１）およびＷＡ０９（Ｈ９）は、ＷｉＣｅｌｌ Ｒｅｓｅｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅから、ＫｈＥＳ－１、ＫｈＥＳ－２およびＫｈＥＳ－３は、京都大学再生医科学研究所（京都、日本）から入手可能である。」（［００１３］～［００１９］） ３ 甲第３号証：Ｎａｔｕｒｅ（２００８）Ｖｏｌ．４５３，Ｎｏ．７１９４，ｐ．５２４－５２８ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ （甲３－１）「 ［図：0001393975000004.jpg］ 図１ ヒトＥＳ細胞からの心臓系統への特化 ａ ヒトＥＳ細胞の心臓系統への分化に使用されたプロトコールの概要 ・・・・・・・・・・・・ ｃ 示されたようにＷｎｔシグナル経路を操作した後の１４日目の胚様体におけるＣＴＮＴ＋細胞の陽性率。コントロールはＷＮＴもＤＫＫ１も加えない培養である。 ・・・・・・・・・・・・ ｆ 各分化段階での胚様体の遺伝子発現解析 ・・・・・・・・・・・・」（図１） （甲３－２）「６日目の胚様体から単離されたＫＤＲｌｏｗ／Ｃ－ＫＩＴｎｅｇ細胞はＶＥＧＦ（２５ｎｇｍｌ－１）、ｂＦＧＦ（２５ｎｇｍｌ－１）およびＤＫＫ１（１５０ｎｇｍｌ－１）の存在下で２～３日間凝集させた。」（方法、右欄第３行～第５行） （甲３－３）「ＶＥＧＦとＤＫＫ１で１０～１２日間培養したＫＤＲｌｏｗ／Ｃ－ＫＩＴｎｅｇ由来の接着集団をフローサイトメトリーで解析したところ、ほぼ９０％がＳＭＡを発現し、５０％がＣＴＮＴを発現し、４％がＣＤ３１を発現していた（図３ｂ）。この培養物にｂＦＧＦを添加すると、ＣＴＮＴ＋細胞とＳＭＡ＋細胞の割合がそれぞれ３０％と８０％に減少し、ＣＤ３１＋の亜集団が３０％に増加した。」（第５２６頁右欄第１８行～第２４行） ４ 甲第４号証：Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１４ Ｄｅｃ）Ｖｏｌ．３，Ｎｏ．６，ｐ．１１３２－１１４６ （甲４－１）「ＮＫＸ２．５－ＧＦＰレポーター系統（Ｅｌｌｉｏｔｔら，２０１１）を利用して、静懸濁培養におけるヒトＰＳＣ凝集体のＷｎｔ調節剤に基づいたＣＭ分化を生じさせるためにマルチウェルスクリーニングアッセイが確立された。」（第１１３３頁左欄第２８行～第３１行） （甲４－２）「 ［図：0001393975000005.jpg］ 」（表１） （甲４－３）「 ［図：0001393975000006.jpg］ 図２ 回転エルレンマイヤーフラスコにスケールアップしたプロトコール （Ａ）７５ｒｐｍで回転させたフラスコでの培養スキーム ・・・・・・・・・・・・ （Ｄ）７～１０日目のフローサイトメトリーは約５５％のＧＦＰ陽性細胞を示した。・・・ （Ｅ）１０日目の胚様体由来細胞の代表的なフローサイトメトリーヒストグラム」（図２） ５ 甲第５号証：特表２０１３－５３５９７５号公報 （甲５－１）「【請求項１】 細胞の集団を心筋細胞および心筋細胞前駆細胞について濃縮する方法であって： （ａ）心筋細胞および心筋細胞前駆細胞が単離される予定の該細胞の集団を提供する工程；ならびに （ｂ）該集団からＳＩＲＰＡを発現している細胞を単離する工程； を包含し、ここで、該細胞の集団は、心筋細胞および心筋細胞前駆細胞に分化するように誘導されたヒト多能性幹細胞の集団を含む、方法。 【請求項２】 前記ヒト多能性幹細胞が、胚性幹細胞である、請求項１に記載の方法。 【請求項３】 前記ヒト多能性幹細胞が、人工多能性幹細胞である、請求項１に記載の方法。 【請求項４】 前記ヒト多能性幹細胞が、細胞分化を誘導するのに有効な量の少なくとも１つの誘導因子に曝露される、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。 【請求項５】 前記少なくとも１つの誘導因子の量が、前記集団中のＳＩＲＰＡ濃度に基づいて最適化される、請求項４に記載の方法。 【請求項６】 前記少なくとも１つの誘導因子が、サイトカインを含む、請求項４および５のいずれか１項に記載の方法。 【請求項７】 前記少なくとも１つの誘導因子が、好ましくは４０ｎｇ／ｍｌまでの濃度、さらに好ましくは約６ｎｇ／ｍｌまたは約３０ｎｇ／ｍｌの濃度の、アクチビンＡを含む、請求項４～６のいずれか１項に記載の方法。 【請求項８】 前記少なくとも１つの誘導因子が、好ましくは４０ｎｇ／ｍｌまでの濃度、さらに好ましくは約１０ｎｇ／ｍｌの濃度の、骨形成タンパク質４を含む、請求項４～７のいずれか１項に記載の方法。 【請求項９】 前記ヒト多能性幹細胞が、さらに骨形成タンパク質インヒビターに曝露される、請求項４～８のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１０】 前記骨形成タンパク質インヒビターが、Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎ、Ｎｏｇｇｉｎおよび可溶性骨形成タンパク質レセプターからなる群から選択される、請求項９に記載の方法。 【請求項１１】 前記ヒト多能性幹細胞が、さらにＶＥＧＦ、ＤＫＫおよびｂＦＧＦのうちの少なくとも１つに曝露される、請求項４～１０のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１２】 前記ヒト多能性幹細胞が、約１日間～約５日間、好ましくは約３日間、前記誘導因子に曝露される、請求項４～１１のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１３】 前記ヒト多能性幹細胞の誘導の開始と前記ＳＩＲＰＡを発現している細胞を単離する工程との間の時間が、約５日間～約４５日間、好ましくは約８日間～約２５日間である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１４】 前記ＳＩＲＰＡを発現している細胞が、該細胞によるＮｋｘ２．５発現の開始時点ごろに現われる、該細胞によるＳＩＲＰＡの発現の開始後に単離される、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１５】 ＳＩＲＰＡ細胞表面抗原を有する前記細胞が、該細胞によるＮｋｘ２．５発現の開始時と、該細胞による収縮および心臓特異的構造タンパク質発現の開始時との間に単離される、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１６】 ＣＤ９０、ＣＤ３１、ＣＤ１４０ＢおよびＣＤ４９Ａのうちの少なくとも１つを発現している細胞を前記集団から枯渇させる工程をさらに包含する、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１７】 ＣＤ９０、ＣＤ３１、ＣＤ１４０ＢおよびＣＤ４９Ａのうちの１つを発現している前記細胞が、対応する抗体を用いて枯渇される、請求項１６に記載の方法。 【請求項１８】 前記ＳＩＲＰＡを発現している細胞が、ＳＩＲＰＡ特異的リガンドを用いて単離される、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。 【請求項１９】 前記ＳＩＲＰＡを発現している細胞が、抗ＳＩＲＰＡ抗体もしくは抗体フラグメントまたは抗体様分子、好ましくは抗ＳＩＲＰＡ抗体を用いて単離される、請求項１８に記載の方法。 【請求項２０】 前記ＳＩＲＰＡを発現している細胞が、磁気ビーズを用いて単離される、請求項１８または１９に記載の方法。 【請求項２１】 前記ＳＩＲＰＡを発現している細胞が、フローサイトメトリーを用いて単離される、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。」（請求項１～２１） （甲５－２）「【００７３】 ヒト人工多能性幹細胞からの心筋細胞の精製 ＳＩＲＰＡの発現が、他のｈＰＳＣ由来集団中の心臓系統を特徴付けるか否かを決定するために、本発明者らは次に、２つの異なるｈｉＰＳＣ株であるＭＳＣ－ｉＰＳ１（Ｙ２－１としても知られる）および３８－２から作製したＥＢを解析した１３，１４。ｃＴＮＴ＋細胞の割合によって実証されるように、両方の株からの心臓分化の効率は低かった（ＭＳＣ－ｉＰＳ１：１２．２％±５．６、３８－２：２６．７％±５．７；図４ａ）。同様の低レベルのＳＩＲＰＡ発現が、両方のＥＢ集団において検出された。両方のｉＰＳＣ株由来のＳＩＲＰＡ＋細胞のＦＡＣＳは、ｃＴＮＴ＋心筋細胞について有意に濃縮された集団をもたらした（ＳＩＲＰＡ＋：ＭＳＣ－ｉＰＳ１（６７．０％±３．６）、３８－２（７１．４％±３．８）；ＳＩＲＰＡ－：ＭＳＣ－ｉＰＳ１（４．９％±２．１）、３８－２（６．２％±０．９））（図４ａ，ｂ）。これらのＳＩＲＰＡ＋集団は、対応するＳＩＲＰＡ－細胞よりも有意に高いレベルのＮＫＸ２－５、ＭＹＨ６、ＭＹＨ７、ＭＹＬ２およびＭＹＬ７を発現した。ｈＥＳＣ由来細胞を用いたときに観察されたように、ＤＤＲ２、ＰＤＧＦＲＢ、ＴＨＹ１およびＮＥＵＲＯＤを含む非筋細胞マーカーは、ＳＩＲＰＡ－画分に分離した（図４ｂ、ｃおよびデータ示さず）。これらのデータは、このプロトコルを用いたときの、心臓系統に効率的に分化しない細胞株を含む一連の多能性幹細胞株から濃縮された心臓集団をもたらすためのこのマーカーの有用性を明らかに実証するものである。」（【００７３】） （甲５－３）「 ［図：0001393975000007.jpg］ 」（図４） 第７ 当審の判断 １ 令和３年９月２１日付け取消理由通知に記載した取消理由について （１）特許法第２９条第１項第３号及び第２９条第２項（甲第１号証を主引用例とする新規性欠如及び進歩性欠如） ア 本件発明１について 上記記載事項（甲１－６）から、上記記載事項（甲１－１）中の「ＤＫＫ１」は、ＷＮＴ阻害剤に該当することは明らかであるから、甲第１号証には、ｈＥＳＣ（ヒト胚幹細胞）またはｈｉＰＳＣ（ヒト誘導多能性幹細胞）であるｈＰＳＣ（ヒト多能性幹細胞）を、ＢＭＰ４を含む培地中で培養して、胚様体を生成し、２４時間後、ＢＭＰ４、アクチビンＡ、ｂＦＧＦを含む培地中で胚様体を培養して、中胚葉形成を誘導し、分化４日目（ｈＥＳＣの場合。ｈｉＰＳＣの場合は分化３日目）に、ＷＮＴ阻害剤ＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地中で培養して、６日目に、ＶＥＧＦを添加した培地に変更し、分化１５日目までＶＥＧＦを含む培地中で培養して、心筋細胞に分化させる方法が記載されており（上記記載事項（甲１－１）、（甲１－２）の図１（ａ））、また、ＷＮＴ阻害剤ＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地中で２日間培養すると、ＮＫＸ２－５を発現する細胞を生成すること（上記記載事項（甲１－３））、ＶＥＧＦを含む培地中で９日間培養すると、ＮＫＸ２－５陽性の心筋細胞またはｃＴｎＴ陽性の心筋細胞を生成することが記載されている（上記記載事項（甲１－２）の図１（ｂ）、（甲１－３））。 上記記載事項（甲１－５）、（甲１－２）の図１（ａ）から、ＢＭＰ４、アクチビンＡ、ｂＦＧＦを含む培地中で胚様体を２４時間培養すると、心血管中胚葉形成が誘導され、心血管中胚葉細胞が生成し、また、ＷＮＴ阻害剤ＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地中で２日間培養すると、心血管前駆細胞が生成するといえるから、甲第１号証には、「心筋細胞集団を産生する方法であって、多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ４を含む培地中で培養して、胚様体を生成し、２４時間後、ＢＭＰ４、アクチビンＡ、ｂＦＧＦを含む培地中で胚様体を培養して、心血管中胚葉細胞を生成し、分化４日目（ｈＥＳＣの場合。ｈｉＰＳＣの場合は分化３日目）に、心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地中で、２日間培養して、ＮＫＸ２－５を発現する心血管前駆細胞を生成し、ＶＥＧＦを含む培地中で前記心血管前駆細胞を９日間培養して、ＮＫＸ２－５陽性の心筋細胞集団またはｃＴｎＴ陽性の心筋細胞集団を生成する、方法。」の発明が記載されていると認められる。 甲第１号証に記載された発明の「ＢＭＰ４」は、本件発明１の「ＢＭＰ成分」に相当し、甲第１号証に記載された発明の「アクチビンＡ」は、本件発明１の「アクチビン成分」に相当し、甲第１号証に記載された発明の「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地」は、本件発明１の「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地」に相当し、甲第１号証に記載された発明の「ＶＥＧＦを含む培地」は、本件発明１の「ＶＥＧＦを含む基礎培地」に相当する。 そうすると、本件発明１と甲第１号証に記載された発明とを対比すると、両者は、「心筋細胞集団を産生する方法であって、多能性幹細胞（ＰＳＣ）を、ＢＭＰ成分を含む胚様体培地中で一定期間インキュベートして、胚様体を生成する工程と、前記胚様体を、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして、心血管中胚葉細胞を生成する工程と、心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦおよびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中で、一定期間インキュベートして、ＮＫＸ２－５を発現する心血管前駆細胞を生成する工程と、ＶＥＧＦを含む基礎培地中で前記心血管前駆細胞を一定期間インキュベートして、心筋細胞集団を生成する工程とを含む、方法。」に係る発明である点で一致し、以下の点で相違する。 （相違点１）ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地として、本件発明１は、更にＦＧＦ成分を含むのに対し、甲第１号証に記載された発明は、そのような特定はされていない点。 （相違点２）本件発明１は、ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞に富む心筋細胞集団を生成するのに対し、甲第１号証に記載された発明は、ＮＫＸ２－５陽性の心筋細胞集団またはｃＴｎＴ陽性の心筋細胞集団を生成する点。 相違点１について検討する。 甲第３号証には、６日目の胚様体から単離されたＫＤＲｌｏｗ／Ｃ－ＫＩＴｎｅｇ細胞に、ＤＫＫ１、ＶＥＧＦに加えて、ｂＦＧＦの存在下で培養することが記載されている（上記記載事項（甲３－１）～（甲３－２））が、ｂＦＧＦを添加すると、内皮細胞が増加し、心筋細胞が減少することが示されている（上記記載事項（甲３－３））から、甲第３号証の記載が、甲第１号証に記載された発明において、ＷＮＴ阻害剤であるＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることの動機付けになるとはいえない。また、甲第２、４～５号証を参照しても、甲第１号証に記載された発明において、ＷＮＴ阻害剤であるＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることの動機付けがあるとはいえない。 よって、甲第２～５号証の記載から、甲第１号証に記載された発明において、ＷＮＴ阻害剤であるＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることは、当業者が容易に想到し得ることとはいえない。 したがって、本件発明１は、相違点２について検討するまでもなく、甲第１号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第１号証に記載された発明及び甲第２～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 イ 本件発明２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２について 本件発明２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２は、本件発明１を直接又は間接的に引用するものであるから、本件発明１と同様の理由により、甲第１号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第１号証に記載された発明及び甲第２～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 ウ 本件発明１７について 本件発明１７は、本件発明１の発明特定事項と同様の発明特定事項を含むものであるから、本件発明１と同様の理由により、甲第１号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第１号証に記載された発明及び甲第２～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 エ 本件発明１８～２１について 本件発明１８～２１は、本件発明１７を直接又は間接的に引用するものであるから、本件発明１７と同様の理由により、甲第１号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第１号証に記載された発明及び甲第２～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 （２）特許法第２９条第１項第３号及び第２９条第２項（甲第２号証を主引用例とする新規性欠如及び進歩性欠如） ア 本件発明１について 甲第２号証には、多能性幹細胞から心筋細胞を製造する方法であって、多能性幹細胞を、ＢＭＰ４を含む培地中で１日培養して、胚様体を生成する工程、得られた胚様体を、ＢＭＰ４、アクチビンＡおよびｂＦＧＦを含む培地中で３日間培養する工程、得られた細胞を、ＷＮＴ阻害剤およびＶＥＧＦを含む培地中で４日間培養して胚様体に再凝集させる工程、得られた細胞を、ＶＥＧＦおよびｂＦＧＦを含む培地中で１２日間培養して、心筋細胞を生成する工程、を含む方法が記載されており（上記記載事項（甲２－１）、（甲２－３）、（甲２－４））、また、ＶＥＧＦおよびｂＦＧＦを含む培地中で１２日間培養すると、ｃＴｎＴ陽性細胞に富む心筋細胞集団を生成することが記載されている（上記記載事項（甲２－５）、（甲２－６））。 そうすると、甲第２号証には、「心筋細胞集団を産生する方法であって、多能性幹細胞を、ＢＭＰ４を含む培地中で１日培養して、胚様体を生成する工程、得られた胚様体を、ＢＭＰ４、アクチビンＡおよびｂＦＧＦを含む培地中で３日間培養する工程、得られた細胞を、ＷＮＴ阻害剤およびＶＥＧＦを含む培地中で４日間培養して胚様体に再凝集させる工程、得られた細胞を、ＶＥＧＦおよびｂＦＧＦを含む培地中で１２日間培養して、ｃＴｎＴ陽性細胞に富む心筋細胞集団を生成する工程、を含む方法。」の発明が記載されていると認められる。 甲第２号証に記載された発明の「多能性幹細胞を、ＢＭＰ４を含む培地中で１日培養して、胚様体を生成する工程、得られた胚様体を、ＢＭＰ４、アクチビンＡおよびｂＦＧＦを含む培地中で３日間培養する工程」により得られた細胞は、本件発明１の「心血管中胚葉細胞」に相当するものと認められ、また、甲第２号証に記載された発明の「得られた細胞を、ＷＮＴ阻害剤およびＶＥＧＦを含む培地中で４日間培養して胚様体に再凝集させる工程」により得られた細胞は、本件発明１の「心血管前駆細胞」に相当するものと認められる。 そして、甲第２号証に記載された発明の「ＷＮＴ阻害剤およびＶＥＧＦを含む培地」は、本件発明１の「ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦを含む心臓誘導培地」に相当し、甲第２号証に記載された発明の「ＶＥＧＦおよびｂＦＧＦを含む培地」は、本件発明１の「ＶＥＧＦを含む基礎培地」に相当するから、本件発明１と甲第２号証に記載された発明とを対比すると、両者は、「心筋細胞集団を産生する方法であって、心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦを含む心臓誘導培地中で、一定期間インキュベートして、心血管前駆細胞を生成し、ＶＥＧＦを含む基礎培地中で前記心血管前駆細胞を一定期間インキュベートして、心筋細胞集団を生成する工程と含む、方法。」に係る発明である点で一致し、以下の点で相違する。 （相違点１）ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦを含む心臓誘導培地として、本件発明１は、更にＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含むのに対し、甲第２号証に記載された発明は、そのような特定はされていない点。 （相違点２）本件発明１の心血管前駆細胞は、ＮＫＸ２－５を発現するのに対し、甲第２号証に記載された心血管前駆細胞は、そのような特定はされていない点。 （相違点３）本件発明１は、ＮＫＸ２－５ｐｏｓｃＴｎＴｐｏｓ細胞に富む心筋細胞集団を生成するのに対し、甲第２号証に記載された発明は、ｃＴｎＴ陽性細胞に富む心筋細胞集団を生成する点。 相違点１について検討する。 甲第３号証には、６日目の胚様体から単離されたＫＤＲｌｏｗ／Ｃ－ＫＩＴｎｅｇ細胞に、ＤＫＫ１、ＶＥＧＦに加えて、ｂＦＧＦの存在下で培養することが記載されている（上記記載事項（甲３－１）～（甲３－２））が、ｂＦＧＦを添加すると、内皮細胞が増加し、心筋細胞が減少することが示されている（上記記載事項（甲３－３））から、甲第３号証の記載が、甲第２号証に記載された発明において、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦを含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることの動機付けになるとはいえない。また、甲第１、４～５号証を参照しても、甲第２号証に記載された発明において、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦを含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることの動機付けがあるとはいえない。 よって、甲第１、３～５号証の記載から、甲第２号証に記載された発明において、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦを含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることは、当業者が容易に想到し得ることとはいえない。 したがって、本件発明１は、相違点２、３について検討するまでもなく、甲第２号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第２号証に記載された発明及び甲第１、３～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 イ 本件発明２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２について 本件発明２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２は、本件発明１を直接又は間接的に引用するものであるから、本件発明１と同様の理由により、甲第２号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第２号証に記載された発明及び甲第１、３～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 ウ 本件発明１７について 本件発明１７は、本件発明１の発明特定事項と同様の発明特定事項を含むものであるから、本件発明１と同様の理由により、甲第２号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第２号証に記載された発明及び甲第３号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 エ 本件発明１８～２１について 本件発明１８～２１は、本件発明１７を直接又は間接的に引用するものであるから、本件発明１７と同様の理由により、甲第２号証に記載された発明とはいえないし、また、甲第２号証に記載された発明及び甲第１、３～５号証に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。 （３）特許法第３６条第６項第１号（サポート要件違反） ア 心臓誘導培地の成分について 訂正された請求項１は、心臓誘導培地として、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦおよびアクチビン／ノーダル阻害剤ＳＢ－４３１５４２を含む培地に特定されているから、請求項１に係る発明の範囲まで、発明の詳細な説明に開示された内容を拡張ないし一般化できるといえる。 よって、本件発明１は、発明の詳細な説明に記載されたものといえる。請求項２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２は、請求項１を直接又は間接的に引用するものであるから、本件発明１と同様の理由により、本件発明２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２は、発明の詳細な説明に記載されたものといえる。請求項１７及びそれらを直接又は間接的に引用する請求項１８～２１は、請求項１の発明特定事項と同様の発明特定事項を含むものであるから、本件発明１と同様の理由により、本件発明１７～２１は、発明の詳細な説明に記載されたものといえる。 したがって、本件特許請求の範囲の記載は特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない、とすることはできない。 イ 心血管中胚葉細胞の由来について 訂正された請求項１は、心血管中胚葉細胞として、多能性幹細胞から胚様体を生成し、該胚様体を培養して得られた心血管中胚葉細胞に特定されているから、請求項１に係る発明の範囲まで、発明の詳細な説明に開示された内容を拡張ないし一般化できるといえる。 よって、本件発明１は、発明の詳細な説明に記載されたものといえる。請求項２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２は、請求項１を直接又は間接的に引用するものであるから、本件発明１と同様の理由により、本件発明２～７、９～１０、１２、１５～１６、２２は、発明の詳細な説明に記載されたものといえる。請求項１７及びそれらを直接又は間接的に引用する請求項１８～２１は、請求項１の発明特定事項と同様の発明特定事項を含むものであるから、本件発明１と同様の理由により、本件発明１７～２１は、発明の詳細な説明に記載されたものといえる。 したがって、本件特許請求の範囲の記載は特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない、とすることはできない。 （４）特許異議申立人の意見について 特許異議申立人は、令和４年４月１１日付け意見書において、甲第３号証の図３ｂの結果から、心臓誘導培地に、ＤＫＫ１、ＶＥＧＦに加えてｂＦＧＦを添加した場合に、ｃＴｎＴ陽性細胞の割合が約５０％から約３０％に減少することが示されているにすぎず、ｃＴｎＴ陽性細胞が全く誘導されないわけではないし、図１ａの心筋プロトコールでは、Ｄａｙ８以降に心臓誘導培地に、ＤＫＫ１、ＶＥＧＦに加えてｂＦＧＦを添加しているので、甲第３号証の記載が、心臓誘導培地に、ＤＫＫ１、ＶＥＧＦに加えてｂＦＧＦを添加することの阻害要因になるとまでいえない旨主張している。 しかしながら、上記（１）で述べたように、甲第３号証の図３ｂに示された結果が、ＷＮＴ阻害剤であるＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、アクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地として、更にｂＦＧＦを含むものを用いることの動機付けになるとはいえないし、また、甲第３号証の図１ａに示されたプロトコールは、心臓系統プロトコールであり、ＢＭＰ４、アクチビンＡ、ｂＦＧＦを含む培地中で培養した細胞を、ＤＫＫ１、ＶＥＧＦを含む培地中で２日間培養した後に得られた細胞を、Ｄａｙ８以降にＤＫＫ１、ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦを含む培地中で培養しており、ＢＭＰ成分およびアクチビン成分を含む中胚葉誘導培地中で一定期間インキュベートして生成した心血管中胚葉細胞を、ＷＮＴ阻害剤、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ成分およびアクチビン／ノーダル阻害剤を含む心臓誘導培地中で培養する方法である本件発明とは異なるから、特許異議申立人の上記主張は採用できない。 ２ 令和４年７月５日付け取消理由通知に記載した取消理由について 訂正された請求項９は、「請求項２～７の何れか１項」と、訂正された請求項１２は、「請求項１～７および９～１０の何れか１項」と、訂正された請求項１７は、「工程とを含む」と記載されているので、本件特許請求の範囲の記載が特許法第３６条第６項第２号に規定する要件を満たしていない、とすることはできない。 第８ むすび 以上のとおりであるから、取消理由通知に記載した取消理由及び特許異議申立の理由によっては、本件請求項１～７、９～１０、１２、１５～２２に係る特許を取り消すことはできない。また、他に本件請求項１～７、９～１０、１２、１５～２２に係る特許を取り消すべき理由を発見しない。 そして、請求項８、１１、１３～１４に係る特許は、上記第２のとおり、訂正により削除されたので、請求項８、１１、１３～１４に係る申立ては、その対象が存在しないものとなったため、特許法第１２０条の８第１項で準用する同法第１３５条の規定により却下する。 よって、結論のとおり決定する。