2024-000460

第２ 補正却下の決定

令和６年１月１２日にされた手続補正についての補正の却下の決定

［補正却下の決定の結論］

令和６年１月１２日にされた手続補正（以下「本件補正」という。）を却下する。

［理由］

１ 本件補正について

本件補正は、特許請求の範囲の請求項１に、

（補正前）

「【請求項１】

個体から分離された試料と、ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせと、を接触させる段階と、前記ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを接触させて形成される複合体から、前記試料において、ＢＡＧ２の存在またはレベルを測定する段階と、および前記試料から測定されたＢＡＧ２の存在またはレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較する段階と、を含む、乳癌を除く癌の検出を補助する方法であって、前記試料は、血液、血清、血漿、またはそれらの組み合わせであって、前記ＢＡＧ２ポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号１または２のアミノ酸配列を有するものである、方法。」

とあったものを、

（補正後）

「【請求項１】

個体から分離された試料と、ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせと、を接触させる段階と、前記ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを接触させて形成される複合体から、前記試料において、ＢＡＧ２の存在またはレベルを測定する段階と、および前記試料から測定されたＢＡＧ２の存在またはレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較する段階と、を含む、肺癌、黒色腫または膵臓癌の検出を補助する方法であって、前記試料は、血液、血清、血漿、またはそれらの組み合わせであって、前記ＢＡＧ２ポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号１または２のアミノ酸配列を有するものである、方法。」

とする補正事項を含むものである。（下線は合議体が付した。）

２ 補正の適否

請求項１に関する上記の補正は、癌の検出を補助する方法の対象が、本件補正前の請求項１に記載された発明では「乳癌を除く癌」であったところ、本件補正により「肺癌、黒色腫または膵臓癌」と特定の癌に減縮するものである。

請求項１に関する上記の補正は、補正前の請求項１に係る発明を限定しており、特許法第１７条の２第５項第２号に掲げる特許請求の範囲の減縮を目的とするものに該当すると認められる。

そこで、本件補正により補正された請求項１に係る発明（以下「本件補正発明」という。）が、特許出願の際独立して特許を受けることができるものであるか（特許法第１７条の２第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に適合するか）について以下に検討する。

３ 独立特許要件について

（１）発明の詳細な説明の記載内容

本願の発明の詳細な説明には以下の記載がある。

ア 課題を解決するための手段

「【０００４】

一様相は、個体から分離された試料と、ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせと、を接触させる段階と、前記ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを接触させて形成される複合体から、前記試料において、ＢＡＧ２の存在またはレベルを測定する段階と、前記試料から測定されたＢＡＧ２の存在またはレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較する段階と、を含む癌を診断する方法を提供する。

他の様相は、血液、血清（serum）、血漿（plasma）、またはそれらの組み合わせに存在するＢＡＧ２を検出するものであり、前記ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを含む癌診断用キットを提供する。」

イ 発明の効果

「【０００５】

一様相による血中ＢＡＧ２ポリペプチドの存在またはレベルを測定して癌を診断する方法により、癌を診断するために組織を採取した既存の方法に比べ、さらに容易であって正確に癌を診断することができる。

他の様相は、血液から血中ＢＡＧ２ポリペプチドの存在またはレベルを測定するための癌診断用キットにより、多様な診断機関において、癌診断のために、前記癌診断方法を容易に活用することができる。」

ウ 発明を実施するための形態

「【０００７】

…一様相は、個体から分離された試料と、ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせと、を接触させる段階と、前記ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを接触させて形成される複合体から、前記試料において、ＢＡＧ２の存在またはレベルを測定する段階と、前記試料から測定されたＢＡＧ２の存在またはレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較する段階と、を含む癌診断方法を提供する。

【０００８】

他の具体例において、前記方法は、癌を診断するための情報を提供する方法であって、個体で癌の存在を検出し、個体内に存在する癌を診断するためのものである。

続きを表示（全16行）

個体から分離された試料内にＢＡＧ２が存在する場合、ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせが前記試料中のＢＡＧ２と結合することができる。前記抗体またはポリペプチドは、前記試料中のＢＡＧ２の存在を視覚化させるために、例えば、蛍光物質（fluorophore）、発色団（chromophore）、または基質を発色団に転換させることができる酵素で標識されたものでもある。

前記結合反応により、前記試料中のＢＡＧ２が、前記ＢＡＧ２ポリペプチド、またはその断片に特異的に結合する抗体、ポリペプチド、またはそれらの組み合わせと複合体を形成することになり、前記複合体から、当業者に知られた方法を利用し、ＢＡＧ２存在、または必要により、そのレベルを測定することができる。一具体例において、前記複合体を測定する段階は、ウェスタンブロッティング、ＥＬＩＳＡ（enzyme linked immunosorbent assay）、放射線免疫分析（ＲＩＡ：radioimmunoassay）、放射免疫拡散法（radioimmunodiffusion）、オクタロニー（Ouchterlony）免疫拡散法、ロケット（rocket）免疫電気泳動、組織免疫染色、免疫沈澱分析法（immunoprecipitation assay）、補体固定分析法（complementfixation assay）、ＦＡＣＳ、蛋白質チップ（protein chip）、またはそれらの組み合わせにもよる。

【０００９】

前記試料から測定されたＢＡＧ２の存在またはレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較し、前記個体に癌が存在するか否かということを診断することができる。前記対照群は、健康な個体から採取された試料、または必要によっては、多様な類型の乳癌患者平均、非転移性乳癌患者、またはＴＮＢＣ型ではない乳癌患者から採取された試料でもある。従って、前記対照群から測定されたＢＡＧ２レベルは、ＢＡＧ２レベルの健康な個体から採取された試料、または必要によっては、多様な類型の乳癌患者平均、非転移性乳癌患者、またはＴＮＢＣ型ではない乳癌患者から採取された試料中のＢＡＧ２濃度の平均値を意味するものでもある。前記対照群として使用される試料は、前記診断のための試料と、解剖学的に同一位置で採取したものであり、同一種類のものでもある。例えば、前記試料が、個体の肘窩中間静脈（median cubital vein）から採取された血液であるならば、前記対照群また対照群の肘窩中間静脈から採取された血液でもある。前記健康な個体は、任意の急性または慢性の疾患を病んでいない者であり、少なくとも癌を病んでおらず、望ましくは、乳癌を病んでいない者でもある。

【００１０】

前記健康な個体から採取された試料中のＢＡＧ２レベルは、ＢＡＧ２が実質的に存在しないものでもある。従って、対照群を、健康な個体から得られた値として設定する場合、診断対象になる個体において、ＢＡＧ２の存在が測定されたり、そのレベルが著しく高かったりすると測定されるならば、前記個体は癌を病んでいると疑うことができる。一方、本発明の実施例から分かるように、乳癌患者のうち転移性乳癌患者、特に、ＴＮＢＣ型患者の血液においては、ＢＡＧ２の存在が測定される確率が高く、平均値が著しく高い。従って、対照群を、多様な類型の乳癌患者平均、非転移性乳癌患者、またはＴＮＢＣ型ではない乳癌患者から分離された試料として設定する場合、診断対象になる個体において、ＢＡＧ２のレベルが、前記対照群の場合より高いか、あるいは著しく高いと測定されるならば、前記個体は、転移性乳癌またはＴＮＢＣ型乳癌を病んでいると疑うことができる。

本明細書において、前記「ポリペプチド」は、「蛋白質」と相互交換的に使用される。

前記試料は、診断の対象になる個体から分離されたものであり、細胞、器官、細胞溶解物、全血、血液、血清、血漿、リンパ、細胞外液、体液、尿、糞便、組織、骨髓、唾液、喀痰、脳脊髄液、またはそれらの組み合わせでもある。

…

【００１５】

前記診断方法の対象になる個体は、哺乳動物、例えば、ヒト、マウス、鼠（rat）、牛、馬、豚、犬、羊、山羊または猫でもあり、望ましくは、ヒトである。

一具体例において、本発明の診断方法で診断することができる癌は、乳癌、大腸癌、肺癌、肉腫、黒色腫、頭頸部癌、子宮頸部癌、子宮癌、肝臓癌、腎臓癌、膵腸癌及び神経芽細胞種から選択されたものでもある。」

エ 実施例

「【００２０】

１．実施例１：多様な乳癌株におけるＢＡＧ２の発現確認

１－１．乳癌細胞株に係わる転写体（transcriptome）分析

ＴＮＢＣ進行と係わる新規分子的標的を確認するために、本発明者らは、まず、乳癌細胞株において、ＲＮＡシーケシングを利用した転写体分析を行った。まず、多様な乳癌細胞株から、該分野に周知されている方法を利用してＲＮＡを抽出し、業体（Theragen）に遺伝体分析を依頼した。その後、乳癌細胞株を、内腔型（ＭＣＦ－７、Ｔ４７Ｄ、ＺＲ－７５Ｂ）またはＴＮＢＣ（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、Ｈｓ５７８Ｔ）に区分し、ＢＡＧ２の発現量を比較した。

続きを表示（全45行）

その結果、図１及び２に示されているように、ＢＡＧ２が内腔型細胞株と比較し、特異的にＴＮＢＣ細胞株で過発現しているということが分かった。

【００２１】

１－２．５２個乳癌細胞株でのＢＡＧ２発現傾向確認

実施例１－１で拡張し、さらに多様な乳癌細胞においてＢＡＧ２発現傾向を確認した。乳癌細胞情報は、パブリックマイクロアレイデータセット（ＧＳＥ４１３１３、Riazet al., 2013）から得た。Riaz ｅｔ ａｌ．に公開された５２個の乳癌細胞株において、ＢＡＧ２発現傾向を確認した結果、図３に示されているように、ＢＡＧ２が、ＴＮＢＣにおいて、内腔型に比べ、著しく高く発現するということが分かった（Ｐ＜０．０００１）。

【００２２】

１－３．臨床的ＢＡＧ２発現傾向確認

細胞株で確認したＢＡＧ２発現傾向をさらに正確に確認するために、本発明者らは、癌ゲノムアトラス（ＴＣＧＡ：The Cancer Genome Atlas）保存所から得られた乳癌患者のＲＮＡシーケシングデータセット及びマイクロアレイを利用し、乳癌の多様な下位類型において、ＢＡＧ２発現傾向を分析した。

その結果、図４の（Ａ）及び（Ｂ）に示されているように、正常、内腔型Ａ（ＬｕｍＡ）、内腔型Ｂ（Ｌｕｍ Ｂ）及びＨＥＲ２過多（ＨＥＲ２）の患者と比較し、ＴＮＢＣ患者において、ＢＡＧ２発現が著しく高いレベルにあるということが分かった。

【００２３】

１－４．ＢＡＧ２発現傾向の実験的確認

公開されたデータベースを利用して分析された前述の傾向性を実験的にさらに確認するために、定量的ＲＴ－ＰＣＲ（quantitative ＲＴ－ＰＣＲ）を行った。

具体的には、検討委員会（ＩＲＢ：the institutional review board）承認（ＩＲＢ承認番号：３－２０１３－０２６８）後、江南セブランス病院から、乳癌のうち、内腔型１２個及びＴＮＢＣ６個を得た。その後、ＴＲＩｚｏｌ試薬（Invitrogen）を利用し、販売者の指針により、細胞から総ＲＮＡを単離した。その後、１８ｒＲＮＡをハウスキーピング遺伝子にし、ＢＡＧ２検出のためのプライマーを利用し、power ＳＹＢＲ Green ＰＣＲMaster Mix及びViia ７ real-time ＰＣＲ装置（Applied Biosystems）を利用し、定量的ＲＴ－ＰＣＲを行った。

その結果、図５に示されているように、ＴＮＢＣにおいて、内腔型に比べ、ＢＡＧ２が過発現しているということを確認することができた。

【００２４】

２．実施例２：ＢＡＧ２及びカテプシンＢの相互作用確認

ＢＡＧ２が、カテプシンＢの調節上位因子として作用しうるか否かということを確認するために、ＢＡＧ２及びカテプシンＢの相互作用いかん、ＢＡＧ２によるカテプシンＢの活性変化を観察した。

【００２５】

２－１．ＢＡＧ２及びカテプシンＢの相互作用の蛋白質レベルでの確認

ＢＡＧ２欠失細胞株を作製するために、まず、ＢＡＧ２特異的ｓｈＲＮＡを、Mission－ｓｈＲＮＡ（Sigma）から購入した。ＢＡＧ２特異的ｓｈＲＮＡレンチウイルス作製のために、２９３Ｔ細胞を、ｐＬＫＯ－ＢＡＧ２、またはスクランブルされた対照群ｐＬＫＯ－ｐＧＬ２に対し、Δ８．９及びＶＳＶ－Ｇをコーディングするパッケージングプラスミドと共に形質注入させた（使用されたＢＡＧ２ｓｈＲＮＡの標的配列（５’→３’）：ＧＴＡＣＴＡＧＧＡＴＣＴＡＧＣＡＴＡＴＴＴ）。形質注入後、３６ないし４８時間後、ウイルス上澄み液を収集し、０．４５μｍ濾過器を介して濾過した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（ＡＴＣＣ）を、６ウェルプレートに、１ｘ１０５細胞／ウェルに接種（seed）し、ウイルス粒子（particle）及びポリブレン（８ｕｇ／ｍｌ）で感染させた。感染後、前記ウイルスを含む培地を一般培地に替えた後、前記細胞をプロミシン（２μｇ／ｍｌ）で選択した。製造されたＢＡＧ２欠失細胞株をＢＡＧ２ｓｈＲＮＡにした。

ＢＡＧ２を過発現させるために、同様に、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（ＡＴＣＣ）に、Lipofectamine ２０００（Invitrogen）を利用し、販売者の指針により、Ｍｙｃ－ｔａｇＢＡＧ２発現ベクターを形質注入し、ＢＡＧ２を過発現する細胞をＢＡＧ２ ＯＶにし、ＢＡＧ２ ｓｈＲＮＡにＢＡＧ２を形質注入したものを、ＢＡＧ２回復した細胞として、ＢＡＧ２救助（rescue）にした。

【００２６】

前記各細胞をＰＢＳで洗浄して溶解させた後、ＳＤＳ－ポリアクリルアミドゲル電気泳動を介して分離させ、ＰＶＤＦ膜（Millipore）に移動させ、図６に表示された各抗体を利用して免疫ブロットすることにより、各蛋白質を検出した。特に、ＣＴＳＢ抗体は、前形態（pro-form）及び成熟した形態のＣＴＳＢ（ＳＣ（single chain）及びＤＣ（double chain））をいずれも認知するので、分子量で区分することができる。

その結果、図６（Ａ）に示されているように、ＢＡＧ２欠失細胞においては、切断されたカスパーゼ３が発現し、カスパーゼ３の活性型が増加しているということが分かったが、それは、ＢＡＧ２の回復によって減少した。また、ＢＡＧ２欠失細胞においては、一本鎖（ＳＣ）カテプシンＢも増加したと観察されたが、それは、カスパーゼ３と同様に、ＢＡＧ２の回復によって減少した。従って、ＢＡＧ２がプロカテプシンＢにおいて成熟した形態である一本鎖カテプシンＢに転換されることを妨害するメカニズムに関与するということが分かる。

【００２７】

２－２．ＢＡＧ２のＣＴＳＢ活性に対する影響力確認

ＣＴＳＢ調節に対するＢＡＧ２の影響力をさらに確実なものにするために、ＢＡＧ２存在いかんによるＣＴＳＢの活性変化を観察した。

具体的には、前記実施例３－１でのように、ＢＡＧ２欠失ＭＣＦ１０ＣＡ１ａ細胞を作製し、ＢＡＧ２発現ベクターを形質注入し、ＢＡＧ２を過発現させるか、あるいはＢＡＧ２欠失細胞において、ＢＡＧ２発現を回復させた。成熟したＣＴＳＢは、Ａｒｇ－Ａｒｇを含む合成ペプチドを基質にするので、その後、蛍光形成カテプシンＢ基質（２００μＭＡｃ－ＲＲ－ＡＦＣ，Ａｂｃａｍ）と販売者との指針により、準備された細胞試料を、２７℃で１時間インキュベーションした。蛍光測定は、多重プレート検出器であるWallac １４４０ Victor２（PerkinElmer）上で行い、相対的な蛍光ユニットを３５５ｎｍの励起波長を利用し、４６０ｎｍで測定した。

その結果、図６（Ｂ）に示されているように、ＢＡＧ２欠失ＭＣＦ１０ＣＡ１ａ細胞に、ＢＡＧ２をさらに導入した結果、ＢＡＧ２不在のＣＴＳＢ活性が増大することが観察され、ＢＡＧ２が、ＣＴＳＢ成熟型への変換を抑制し、結果として、ＣＴＳＢ活性を低下させるということが分かる。従って、ＢＡＧ２は、ＣＴＳＢと相互作用し、ＣＴＳＢ成熟型への変換を抑制し、カスパーゼ３媒介された細胞死滅の阻害に関与するということが分かる。

【００２８】

実施例３．血中ＢＡＧ２のＣＴＳＢ存在確認

３－１．ＴＮＢＣ細胞のＢＡＧ２及びＣＴＳＢの分泌いかん確認

ＢＡＧ２及びＣＴＳＢが、ＴＮＢＣ細胞内に存在するだけではなく、細胞外に分泌されもするかということを確認した。

具体的には、ＴＮＢＣ細胞として、Ｈｓ５７８Ｔ、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１及びＭＣＦ１０ＡＣａ１に、実施例２－１のように、ＢＡＧ２が欠失された細胞を作製した後、各細胞を条件培地ＤＭＥＭ（Ｃａｔ．ＬＭ００１－０５、ＷＥＬＧＥＮＥ）で培養し、細胞が採取されないように注意を払いながら、その上澄み液を採取した後、実施例２－１のように免疫ブロットした。蛋白質総量を示すために、一部を販売者の指針により、クマシブルー染色（ＥＬＴ００６、ＥＬＢＩＯ）した。

また、前記培地から得られた試料のうち一部は、プロカテプシンＢ quantikine ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄシステム）を利用し、販売者の指針によって分析し、ＢＡＧ２過発現された細胞株であるＭＣＦ１０ＡＴ１を培養した培地において、ＢＡＧ２及びＣＴＳＢの存在いかんを再確認した。

その結果、図７ないし図９から分かるように、ＢＡＧ２が発現されるＴＮＢＣ細胞を培養した培地内に、ＢＡＧ２及びＣＴＳＢがいずれも観察された。特に、ＣＴＳＢは、プロ－ＣＴＳＢとしてＢＡＧ２発現と傾向性が同一に示された。

【００２９】

３－２．血中でのＢＡＧ２及びＣＴＳＢの分泌いかん確認

ＢＡＧ２が細胞外に分泌されるということを確認したので、さらに、血中に分泌され、血液でにおいても検出されるか否かということを確認した。

具体的には、健康な支援者（Ｎ＝１７）の血清、及び悪性乳癌患者（Ｎ＝７６）の血清を採取した。前述の得られた血清を、ヒトＢＡＧ２ＥＬＩＳＡキット（MyBiosource）を利用して販売者の指針によって分析した。

その結果、図１０から分かるように、乳癌患者の血清において、健康な支援者と比較し、ＢＡＧ２が血中において著しい程度に検出されるということが分かる。

前記実施例において、Ｐ値は、垂直両側スチューデントｔ－検定（unpaired two-tailed Student’s t-test）を利用し、３回の独立した実験から平均＋＿ＳＤで示した。…」

（２）解決しようとする課題と発明の詳細な説明の記載

上記（１）アの本願の発明の詳細な説明の段落【０００４】【０００５】の記載から、本件補正発明の課題は、個体から分離された血清とＢＡＧ２ポリペプチドに特異的に結合する抗体を接触させて形成される複合体から測定されたＢＡＧ２のレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較することで、肺癌、黒色腫または膵臓癌の検出（診断）を補助する方法の提供であると認められる。

そして、発明の詳細な説明には、上記の課題を達成する唯一の具体物として、実施例３において、ＴＮＢＣ（三重陰性乳癌）細胞株においてＢＡＧ２が細胞外に分泌されたこと、悪性乳癌患者血清においてＢＡＧ２が検出されたことが記載されているものの（段落【００２８】～【００２９】）、それ以外の癌については、例えば段落【００１５】において「…本発明の診断方法で診断することができる癌は、乳癌、大腸癌、肺癌、肉腫、黒色腫、頭頸部癌、子宮頸部癌、子宮癌、肝臓癌、腎臓癌、膵腸癌及び神経芽細胞種から選択されたものでもある。」旨が一般的に記載されるにとどまっている。

また、ＴＮＢＣ（三重陰性乳癌）細胞株においてＢＡＧ２が細胞外に分泌されたこと、悪性乳癌患者血清においてＢＡＧ２が検出されたことについて、その発現に至る機序、分泌され血清中にて検出されるに至る機序について、発明の詳細な説明には具体的に何ら記載されていない。

（４）判断

ア サポート要件の判断規範

特許請求の範囲の記載が明細書のサポート要件に適合するか否かは、特許請求の範囲の記載と発明の詳細な説明の記載とを対比し、特許請求の範囲に記載された発明が、発明の詳細な説明に記載された発明で、発明の詳細な説明の記載又はその示唆により当業者が当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものであるか否か、また、その記載や示唆がなくとも当業者が出願時の技術常識に照らし当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものであるか否かを検討して判断すべきものである。

イ 上記（２）で述べたように、本願の発明の詳細な説明に記載の実施例には、ＴＮＢＣ細胞株におけるＢＡＧ２の発現を確認し、悪性乳癌患者血清中にてＢＡＧ２が検出されたことは記載されているものの、実施例や、その他発明の詳細な説明には、肺癌、黒色腫、膵臓癌においてＢＡＧ２の発現を確認し、これらの癌患者血清中にてＢＡＧ２が検出されたことの記載はないし、ＴＮＢＣ細胞株においてＢＡＧ２が発現に至る機序、細胞外分泌に至る機序、悪性乳癌患者血清においてＢＡＧ２が検出される機序等について、具体的に何ら記載されていない。

ウ してみれば、本願の特許請求の範囲の記載は、特許請求の範囲に記載された発明が、発明の詳細な説明に記載された発明で、発明の詳細な説明の記載又はその示唆により当業者が当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものでない。

エ また、癌は、発生する組織や細胞が、例えば、扁平上皮癌、腺癌等、多岐にわたり、それぞれの癌によって、その細胞特性や、癌化の機序、増殖スピードが異なる。そして、タンパク質の発現、細胞外分泌系の制御、調節に関わる分子機構は、それぞれの細胞内で複雑に制御されており、その詳細な実態については、出願日当時分かっていないことが多いことは、技術常識である。

このことは、本願実施例（実施例１、図３－５）において、ＴＮＢＣ細胞と内腔型細胞など細胞種によりＢＡＧ２発現状態に差が見られることや、請求人が参考資料１にて「…細胞内BAG2の発現工程と分泌系は異なる調節機構を持っている可能性があります…」、参考資料４にて「…同じ腫瘍タイプでも、BAG2タンパク質の分泌は細胞の特性に応じて異なる方法で調節され得ます…」と述べているとおりである。

オ このような技術常識を参酌すると、ＴＮＢＣ細胞株におけるＢＡＧ２の発現を確認し、悪性乳癌患者血清中にてＢＡＧ２を検出したという本願実施例の記載からは、悪性乳癌患者から分離された血清とＢＡＧ２ポリペプチドに特異的に結合する抗体を接触させて形成される複合体から測定されたＢＡＧ２のレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較することで、乳癌の検出を補助（診断）することができることは、当業者が認識できる程度に記載されていると認められるものの、組織が異なり、細胞種や発生メカニズムの異なる可能性のある肺癌、黒色腫、膵臓癌においても、その細胞内でＴＮＢＣ細胞株同様にＢＡＧ２が発現し、血清中で検出され、肺癌、黒色腫、膵臓癌の検出を補助（診断）することができることは、その記載や示唆がなくとも当業者が出願時の技術常識に照らし当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものであるとは認められない。

カ さらに、請求人が提示した参考資料１～４は、公知日が不明であり、本願出願日当時、ＢＡＧ２が肺癌、黒色腫、膵臓癌において発現され、血液、血清、血漿中にて検出されることが技術常識であることを示すものとは認められない。一般に、出願日後に実験して初めて明らかになった事項を当初明細書に記載されていたものとすることは、先願主義に悖るものであって、認めることができない。

キ よって、肺癌、黒色腫、膵臓癌の検出の補助については、その記載や示唆がなくとも当業者が出願時の技術常識に照らし当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものでもない。

ク そうすると、発明の詳細な説明のＴＮＢＣ細胞株におけるＢＡＧ２の発現を確認し、悪性乳癌患者血清中にてＢＡＧ２を検出されたという本願実施例や、その他本願発明の詳細な説明の記載だけでは、本件出願時の技術常識を参酌しても、肺がん、黒色腫、膵臓癌に係る本願発明において「個体から分離された血清とＢＡＧ２ポリペプチドに特異的に結合する抗体を接触させて形成される複合体から測定されたＢＡＧ２のレベルを、対照群から測定されたＢＡＧ２レベルと比較することで、癌の検出を補助する」という課題を解決できると当業者において認識できる程度に記載しているとはいえない。

したがって、本願発明は、発明の詳細な説明において、発明の課題が解決できることを当業者が認識できるように記載された範囲を超えるものであるから、特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない。

４．むすび

よって、本件補正は、特許法第１７条の２第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に違反するので、同法第１５９条第１項の規定において読み替えて準用する同法第５３条第１項の規定により却下すべきものである。

よって、上記補正の却下の決定の結論のとおり決定する。

第３ 本願発明

本件補正は、上記のとおり却下されたので、本願の請求項に係る発明は、令和５年６月３０日にされた手続補正により補正された特許請求の範囲の請求項１～１０に記載された事項により特定されるものであるところ、その請求項１に係る発明（以下「本願発明」という。）は、前記第２［理由］１．に（補正前）として記載のとおりのものである。

第４ 原査定の概要

拒絶査定の理由は、概略、次のとおりのものである。

請求項１、８には、対象となる癌として乳がんを除く癌が包括的に記載されている。

他方、発明の詳細な説明の実施例（特に、段落００２９等）には、血清中のＢＡＧ２と乳癌の診断との関連が記載されているものの、その他の癌については具体的な記載がなく、乳癌以外の癌については実際に検討してみなければ、把握することが困難であることが出願時の技術常識である。

したがって、出願時の技術常識に照らしても、請求項１－１０に係る発明の範囲まで、発明の詳細な説明に開示された内容を拡張ないし一般化できるとはいえず、本願は、特許請求の範囲の記載が特許法第３６条第６項１号に規定する要件を満たしていない。

第５ 判断

第２の３．で述べたとおり、本件補正発明は発明の詳細な説明に記載したものとはいえないところ、本願発明は本件補正発明を態様として明らかに含むものであるから、本願発明は発明の詳細な説明に記載したものとはいえず、特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない。

第６ むすび

以上のとおり、本願発明は、特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしておらず、特許を受けることができないものであるから、他の請求項に係る発明について言及するまでもなく、拒絶すべきものである。

よって、結論のとおり審決する。