2023-000684

第２ 令和５年１月１６日提出の手続補正書による手続補正についての補正の却下の決定

［補正の却下の決定の結論］

令和５年１月１６日提出の手続補正書による手続補正（以下、「本件補正」という。）を却下する。

［理由］

１ 本件補正の内容

（１）本件補正後の特許請求の範囲の記載

本件補正により、特許請求の範囲の請求項１の記載は、次のとおり補正された。（下線部は補正箇所を示す。）

「【請求項１】

高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための経口投与用の組成物であって、

前記組成物が、５０重量％乃至７０重量％のベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含み、

前記ユーグレナは従属栄養的に増殖させたものであり、

前記組成物が発酵を利用して増殖させたユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンの有効量を含有し、前記有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重である、

組成物。」

（２）本件補正前の特許請求の範囲の記載

本件補正前の、令和４年４月２８日提出の手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１の記載は、次のとおりである。

「【請求項１】

高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための経口投与用の組成物であって、

前記組成物が、５０重量％乃至７０重量％のベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含み、

前記組成物が発酵を利用して増殖させたユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンの有効量を含有し、前記有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重である、

組成物。」

２ 補正の適否

本件補正は、本件補正前の請求項１に記載された発明を特定するために必要な事項である「ユーグレナ」を「従属栄養的に増殖させたもの」に限定する補正であって、補正前の請求項１に記載された発明と補正後の請求項１に記載される発明の産業上の利用分野及び解決しようとする課題は同一であるから、特許法第１７条の２第５項第２号の特許請求の範囲の減縮を目的とするものに該当する。

そこで、本件補正後の、請求項１に記載された発明（以下、「本件補正発明」という。）が同条第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に適合するか（特許出願の際独立して特許を受けることができるものであるか）について、以下、検討する。

（１）本件補正発明

本件補正発明は、上記１（１）に記載したとおりのものである。

（３）引用文献１を主引例とする進歩性について

ア 引用文献１に記載された発明

引用文献１には、血中脂質が高めの男女にユーグレナ１ｇ（２５０ｍｇ／ｃａｐ×４粒／ｄａｙ）を投与した結果、血中総コレステロールおよび血中ＬＤＬコレステロールが有意に減少したことが記載され（摘記１ｄ）、ユーグレナ２５０ｍｇ入りｃａｐ（カプセル）は組成物の形態と認められるから、引用文献１には、次の発明（以下、「引用発明１」という。）が記載されているといえる。

＜引用発明１＞

「血中脂質が高めの男女にユーグレナ１ｇ（２５０ｍｇ／ｃａｐ×４粒／ｄａｙ）を投与することで血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロールを減少させるための組成物。」

イ 本件補正発明と引用発明１の対比

（ア）引用発明１の「血中脂質が高めの男女」は、ユーグレナ摂取前の総コレステロール値が２５０ｍｇ／ｄＬ、ＬＤＬコレステロール値が１５０ｍｇ／ｄＬであるから（摘記１ｆ）、本件補正発明の「高脂血症」の「疾患をもつヒト」に相当する（必要であれば、摘記１０ａ参照。）。

そして、本件補正発明の「高脂血症」は、本願明細書の【００７８】に「高脂血症は、血中コレステロール（すなわち、高コレステロール血症）又は血中トリグリセリド（高トリグリセリド血症）レベルの上昇をもたらすいずれの疾患も含む」と記載されているように、血中コレステロールの上昇によりもたらされる疾患であるから、「血中コレステロールを減少させる」ことは、「高脂血症の治療」に相当する。

そうすると、引用発明１の「血中脂質が高めの男女」の「血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロールを減少するための組成物」は、本件補正発明の「高脂血症」の「疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための」「組成物」に相当する。

また、引用文献１には、「血中脂質量の減少や脂質排出のデータから、抗メタボリックシンドローム素材としての側面を有している」と記載されているから（摘記１ｅ）、引用発明１である、血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロール、すなわち、血中脂質量を減少させるための組成物は、メタボリックシンドロームのヒトの治療をするための組成物としての側面を有しているといえる。このことは、ＬＤＬコレステロールの上昇にともなって、メタボリックシンドローム（ＭＳ）の頻度が上昇し、スタチンのようなＬＤＬコレステロールを下げる効果のある薬剤がメタボリックシンドロームの治療に有効であるとされていることからも、明らかである（必要であれば、摘記１１ａ、１２ａ参照。）。

そうすると、引用発明１の「血中脂質が高めの男女」の「血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロールを減少させるための組成物」は、本件補正発明の「メタボリックシンドローム」の「疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための」「組成物」にも相当する。

以上によれば、引用発明１の「血中脂質が高めの男女」の「血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロールを減少させるための組成物」は、本件補正発明の「高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための」「組成物」に相当する。

（イ）本件補正発明の「ユーグレナバイオマス」について、本願明細書【００５６】には、「「バイオマス」という用語はユーグレナ細胞材料を記述するために使用される。生成物は加工されてもよく、未加工であってもよい。例えば、ユーグレナバイオマスは乾燥されてもよく、湿った細胞マスとして提供されてもよい。」と定義されている。

一方、引用文献１には、「パラミロンはユーグレナが特異的にその細胞内に蓄積するβ-1,3-グルカンの結晶体である」と記載されているから（摘記１ｃ）、引用発明１の「ユーグレナ」は、「ユーグレナ細胞材料」であって「β－１，３－グルカン」を含むものである。

そうすると、引用発明１の「ユーグレナ」は、本件補正発明の「ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマス」に相当する。

（ウ）引用文献１には、「パラミロンは単糖のグルコースのみから構成され，そのすべてがβ-1,3-結合で連なっている」と記載されており（摘記１ｃ）、全てがβ－１，３－結合で連なっていれば、β－１，６－結合は含まないから、引用発明１の「ユーグレナ」は、本件補正発明の「ベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカン」を含有するものに相当する。

（エ）引用発明１は、「ユーグレナ１ｇ（２５０ｍｇ／ｃａｐ×４粒／ｄａｙ）」とあるとおり、カプセルで投与するものであるところ、引用文献１の表題に「特集 機能性食品素材の開発 ユーグレナの栄養特性と機能性」と記載されているように（摘記１ａ）、ユーグレナは食品素材であるから、引用発明１のカプセルでの投与は経口投与と認められる。

そうすると、引用発明１のカプセルで投与する組成物は、本件補正発明の「経口投与用の組成物」に相当する。

（オ）以上によれば、本件補正発明と引用発明１は、以下の点において、一致及び相違する。

＜一致点＞

「高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための経口投与用の組成物であって、前記組成物が、ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含み、前記組成物がユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンを含有する組成物。」

＜相違点１－１＞

ユーグレナが、本件補正発明は、「従属栄養的に増殖させたもの」であって、「発酵を利用して増殖させた」ものであるのに対し、引用発明１は、そのようなものであるか不明な点

＜相違点１－２＞

ユーグレナバイオマスが、本件補正発明は、「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むものであるのに対し、引用発明１は、そのようなものであるか不明な点

＜相違点１－３＞

本件補正発明は、「有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重である」のに対し、引用発明１は、そのようなものであるか不明な点

ウ 判断

（ア）相違点１－１について

引用文献１には、引用発明１のユーグレナの培養方法について特に記載されていない。

そこで、本願優先日前に知られたユーグレナの培養方法について検討すると、引用文献２には、ユーグレナは培地を用いて培養することができ、光照射下又は無照射下で培養してもよいと記載され（摘記２ｄ）、引用文献７には、「ユーグレナの培養方法には大別して３つの方法」があり、その二つ目として「炭素源としてグルコースなどの有機性炭素を利用して暗所・好気条件下で培養する従属栄養培養法」が挙げられると記載され（摘記７ａ）、引用文献８には、ユーグレナとして「従属栄養的に成長」したものが記載され（摘記８ａ）、引用文献９には、ユーグレナは、グルコースなどの栄養源の存在下で、グルコースをエネルギー源として「従属栄養系での生育」も可能であることが記載されている（摘記９ａ）。

すなわち、本願優先日前、グルコースなどの栄養源を添加した培地を用いてユーグレナを従属栄養的に増殖させることは周知技術である。

そして、本願明細書【０１６６】に、「ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンは、発酵を利用してユーグレナを増殖させることによって作られる」こと、同【０１６８】に、「発酵を利用して増殖させるユーグレナは、増殖培地を用いて培養される」ことが記載されているように、増殖培地を用いた、ベータ－１，３－グルカンの作成を伴う培養は、「発酵を利用」した増殖に相当するから、ユーグレナの増殖方法として、従属栄養的に増殖させること、発酵を利用して増殖させることは、本願優先日前の周知技術である。

そうすると、引用発明１のユーグレナとして、本願優先日前の周知技術に基づいて、「従属栄養的に増殖させたもの」であって、「発酵を利用して増殖させたもの」を用いることは、当業者が容易に行うことである。

（イ）相違点１－２について

引用文献１には、引用発明１のユーグレナに含まれるベータ－１，３－グルカンの量について特に記載されていない。

しかしながら、引用文献６には、ユーグレナの増殖の時期や培養条件によってパラミロン含有率が乾燥重量あたり５０％を超える場合もあると記載されているところ（摘記６ａ）、パラミロンは、ベータ－１，３－グルカンのみからなるから（摘記６ａ）、引用文献６には、ユーグレナは、増殖の時期や培養条件によってベータ－１，３－グルカンを５０重量％以上含むことが記載されているといえる。また、引用文献５には、培養したユーグレナは、乾燥細胞重量の７０％近くまでパラミロン含量が増加していると記載され（摘記５ａ）、上記のとおりパラミロンは、ベータ－１，３－グルカンのみからなるから、引用文献５には、ユーグレナは、培養により７０重量％近くまでのベータ－１，３－グルカンを含むことが記載されているといえる。

そうすると、培養したユーグレナは、通常、５０重量％乃至７０重量％程度のベータ－１，３－グルカンを含むと認められる。

一方、引用文献１の記載から、ユーグレナを含有する食品が市場に流通するようになったのは、屋外（大量）培養の実施後であり、引用文献１の報告もそれに伴うものと認められるから（摘記１ｂ、１ｅ）、引用発明１の「ユーグレナ１ｇ（２５０ｍｇ／ｃａｐ×４粒／ｄａｙ）」に用いられているユーグレナは、培養したユーグレナであると考えるのが自然である。

そうすると、引用発明１のユーグレナについて、培養したユーグレナにおける通常の範囲である「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むものとすることは、当業者が容易に行うことである。

また、仮に、引用発明１のユーグレナが培養されていないものであるとしても、上記（ア）のとおり、引用発明１のユーグレナとして、「従属栄養的に増殖させ」、「発酵を利用して増殖させ」た培養ユーグレナを用いることで、引用発明１のユーグレナを培養したユーグレナにおける通常の範囲である「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むものとすることは、当業者が容易に行うことである。

（ウ）相違点１－３について

引用発明１のユーグレナの投与量は、１ｇであるところ、仮に体重６０ｋｇのヒトの体重あたりに換算すると、１ｇ／６０ｋｇ＝約１７ｍｇとなる。引用発明１のユーグレナに含まれるベータ－１，３－グルカンの含有量は不明であるが、上記（イ）のとおり、引用発明１のユーグレナは培養したユーグレナと考えるのが自然であり、培養したユーグレナは、５０重量％乃至７０重量％程度のベータ－１，３－グルカンを含むと認められるから、引用発明１における１ｇのユーグレナは、その５０重量％乃至７０重量％のベータ－１，３－グルカンを含むものとして、体重６０ｋｇのヒトの体重あたりに換算すると、約１７ｍｇの５０～７０％である約８．５～１１．９ｍｇ程度のベータ－１，３－グルカンを含有するといえる。

そうすると、引用発明１におけるベータ－１，３－グルカンの含有量は、「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」に包含されるから、相違点１－３は、実質的な相違点ではないといえる。

また、仮に、引用発明１のユーグレナが培養されていないものであるとしても、上記（ア）のとおり、引用発明１のユーグレナとして、「従属栄養的に増殖させ」、「発酵を利用して増殖させ」た培養ユーグレナを用いることで、自ずと、ベータ－１，３－グルカンの含有量は、「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」に包含されるといえる。

さらに、引用発明１のユーグレナに含まれるベータ－１，３－グルカンの量が５０重量％乃至７０重量％ではなく、例えば、１重量％乃至１００重量％という広範囲であるとしても、同様に換算すると約０．１７～１７ｍｇ／ｋｇ体重であるから、結局のところ、引用発明１におけるベータ－１，３－グルカンの含有量は、「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」に包含され、相違点１－３は、実質的な相違点ではないといえる。

また、引用発明１において、ユーグレナの機能がパラミロン（ベータ－１，３－グルカン）に起因する可能性が指摘されているのであるから（摘記１ｄ）、引用発明１におけるベータ－１，３－グルカンの好ましい有効量を検討し、「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」という範囲を設定することに、格別の困難性は見いだせない。

（エ）本件補正発明の効果について

ａ 本願明細書には、引用発明１と同様の高脂血症やメタボリックシンドロームに関連して、以下の実施例が記載されている。

「【０３１５】

実施例７：ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを投与することによるマウスにおける高脂血症の治療

ユーグレナを本明細書に記載のように滅菌発酵槽で増殖させた。発酵槽内でユーグレナバイオマスが標的密度に達したら、ユーグレナをろ過、溶解し、ベータ－１，３－グルカンを精製した。ユーグレナ由来の精製ベータ－１，３－グルカンを下記のマウス実験に用いた。リン酸緩衝生理食塩水を対照として投与した。

【０３１６】

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第１の実験では、Ｂａｌｂ／ｃマウスにベータグルカンを含まない高コレステロール餌（毎日約１６ｍｇのコレステロール）を１４日間与えた。この期間の後、マウスに、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカン又は対照を含有し、コレステロールのレベルが正常（約１１０ｍｇ／ｄＬ）の飼料をさらに３０日間与えた。絶食の１２時間後に血清を採取し、血中コレステロール及びトリグリセリドを測定した。図１０Ａに図示するように、マウスの血清コレステロールレベルは、高コレステロール給餌の間に平均が約１１５ｍｇ／ｄＬから約２６５ｍｇ／ｄＬに上昇した。正常量のコレステロールを含む飼料に戻した後にリン酸緩衝化生理食塩水を投与した対照マウスでは、コレステロールレベルは少なくとも３４日目まで上昇したままであり、４４日目には約１８１ｍｇ／ｄＬに減少した。対照的に、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを投与したマウスでは、血中コレステロールレベルの即時且つ着実な減少がみられた。トリグリセリドレベルについても同様の結果が得られた。図１０Ｂに見られるように、マウスが高コレステロール飼料を摂取した間に血清トリグリセリドレベルは約１０５ｍｇ／ｄＬから約１３８ｍｇ／ｄＬに上昇した。対照マウスは、正常コレステロール飼料での３０日後に血清トリグリセリドレベルがわずかに減少しただけであった。対照的に、ベータグルカンを投与したマウスでは、血清トリグリセリドレベルの即時且つ継続的な減少がみられ、４４日目には実験の開始時よりも低かった。

【０３１７】

第２の実験では、精製ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカン又は対照とともに、Ｂａｌｂ／ｃマウスに高コレステロール飼料（毎日約１６ｍｇのコレステロール）を１４日間給餌した。１４日後、マウスに正常コレステロール飼料（約１１０ｍｇ／ｄＬ）を与え、同じベータグルカン生成物又は対照をさらに３０日間投与した。絶食の１２時間後に血清を採取し、血中コレステロール及びトリグリセリドを測定した。図１１Ａに図示するように、対照のみを投与したマウスの血清コレステロールは、高コレステロール飼料を用いた１４日間に最も上昇し、約１１８ｍｇ／ｄＬから約２７５ｍｇ／ｄＬに上昇した。ユーグレナ（ユーグレナ）由来の精製ベータ－１，３－グルカンを投与したマウスは、約１１８ｍｇ／ｄＬから約２３０ｍｇ／ｄＬへの血清コレステロールの小さな増加を示した。トリグリセリドレベルについても同様の結果が得られた。図１１Ｂに見られるように、対照マウスの血清トリグリセリドレベルは、高コレステロール飼料を与えられた間に最も増加した（約１０５ｍｇ／ｄＬから約１４５ｍｇ／ｄＬ）。対照マウスは、正常コレステロール飼料での３０日間の後に血清トリグリセリドレベルのわずかな減少のみがみられた。対照的に、ベータグルカンを投与したマウスでは、正常コレステロール飼料に戻した後に血清トリグリセリドレベルの即時且つ継続的な減少が見られ、４４日目には実験の開始時よりも低かった。

【０３１８】

実施例８：ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを摂取することによる個人の代謝の健康状態への影響を評価するための臨床試験

治験を利用して、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを摂取することの、コレステロールレベル、血糖値、感染症、及び炎症に対する影響を評価する。（登録施設内審査委員会によって承認された）書面によるインフォームドコンセントと選考過程を予め整えた後に参加者を募集する。試験は４週間の期間であり、評価はベースライン、２及び４週間のベータ－１，３－グルカン摂取時に行われる。ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンをカプセルの形で投与して、各個人に２５０ｍｇの１日投与量を与える。

【０３１９】

代謝の健康状態に対するベータグルカンの影響は、グルコースや脂質代謝に関するマーカーの空腹時血中レベル、全身の健康状態やウエルネスの評価、及び血圧や血液化学の測定のうちの１つ以上を用いて測定される。血液化学の分析としては、タンパク質カルボニル含量（酸化ストレスのマーカー）、急性期炎症マーカー（Ｃ反応性タンパク質や、アルファ－１酸糖タンパク質、フィブリノゲン、血小板第４因子など）、代謝バイオマーカー（Ｃ－ペプチドや、コルチゾール、膵臓ポリペプチド、プロインスリン、ペプチドＹＹなど）、サイトカインパネル、及び抗体分析を挙げることができる。」

ｂ 上記実施例７は、滅菌発酵槽で増殖させたユーグレナバイオマスを精製したベータ－１，３－グルカンを、リン酸緩衝生理食塩水を対照としてマウスに投与した結果、マウスの血中コレステロールレベルと血清トリグリセリドレベルが低下したことを示す実施例である。

実施例７で用いられたベータ－１，３－グルカンは精製の程度が不明であるから、ユーグレナバイオマスに含まれるベータ－１，３－グルカンの含有量が「５０重量％乃至７０重量％」であるかは不明であり、ユーグレナが「従属栄養的に増殖させた」ものであるかも不明であり、「有効量」も不明であるから、実施例７は、本件補正発明の具体例とはいえないものの、実施例７によれば、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの投与により、対照であるリン酸緩衝生理食塩水の投与と比較して、マウスにおける高脂血症を治療するための組成物としての効果を奏することは理解できるから、本件補正発明が、高脂血症を治療するための組成物としての効果を奏することは理解できる。

また、上記実施例８は、治験を利用して、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを摂取することの、コレステロールレベル、血糖値等に対する影響を評価するために、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを２５０ｍｇ投与する臨床試験であるが、ベータ－１，３－グルカンの含有量が「５０重量％乃至７０重量％」であるかは不明であり、ユーグレナが「従属栄養的に増殖させた」ものであるかも不明であるから、実施例８は、本件補正発明の具体例とはいえず、そもそもコレステロールレベル、血糖値等に対する影響を評価した結果は記載されていないので、実施例８からは、本件補正発明の効果を理解することはできない。

以上によれば、本願明細書の記載に基づいて、本件補正発明が、高脂血症を治療するための組成物としての効果を奏することは理解できる。

ｃ しかしながら、引用発明１も「血中脂質が高めの男女」の「血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロールを減少させるための組成物」、すなわち、高脂血症の治療のための組成物であることは、上記イ（ア）のとおりであるから、引用発明１も高脂血症の治療のための組成物としての効果を奏するものである。

したがって、本件補正発明の効果は、引用発明１から予測し得るものである。

エ 請求人の主張について

（ア）請求人は、令和４年４月２８日提出の意見書において、以下の主張（１－１）を挙げ、また、令和５年１月１６日提出の審判請求書において、以下の主張（１－２）及び（１－３）を挙げて、本件補正発明は、引用文献１、５及び６の記載に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではないと主張している。

主張（１－１）

本件補正発明の特徴の一つは、所定量のベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含むことであり、本件補正発明は、同等量のベータ－１，３－グルカンを投与した場合、精製ベータ－１，３－グルカンに比して、ユーグレナバイオマスとして投与することにより炎症性腸疾患に対して優れた効果を示す（実施例１２乃至１９等）という予測し得ない効果を奏するのに対し、引用文献１には、主としてユーグレナから単離したパラミロンの作用等について記載され、当業者であれば、引用文献１からは、精製したパラミロン／グルカンはユーグレナ自体より優れた作用を有すると理解するから、本件補正発明は、引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではない。

主張（１－２）

いずれの引用文献にも、ユーグレナが従属栄養的に増殖させたものであることについては、何ら記載されておらず、引用文献を組み合わせたとしても、本件補正発明の構成に至るものではなく、所定の増殖をしたユーグレナバイオマスを投与することにより優れた効果を示すことを予測することも困難であるから、本件補正発明は、引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではない。

主張（１－３）

本件補正発明は、経口投与される組成物において、所定の増殖をしたユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンの有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重であるのに対し、いずれの引用文献にも当該構成については何ら開示・示唆されておらず、このような引用文献から本件補正発明の構成を想到することは困難であるから、本件補正発明は、引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではない。

（イ）上記主張（１－１）について検討する。

請求人は、「本件補正発明は、同等量のベータ－１，３－グルカンを投与した場合、精製ベータ－１，３－グルカンに比して、ユーグレナバイオマスとして投与することにより炎症性腸疾患に対して優れた効果を示す（実施例１２乃至１９等）という予測し得ない効果を奏する」と主張しているが、引用発明１は、炎症性腸疾患を治療するための組成物ではなく、「血中総コレステロール及び血中ＬＤＬコレステロールを減少させるための組成物」、すなわち、高脂血症又はメタボリックシンドロームを治療するための組成物である。そして、上記イ（エ）ｂのとおり、高脂血症に関する実施例である実施例７、８のベータ－１，３－グルカンが「５０重量％乃至７０重量％」であるかは不明であるから、実施例７、８の記載からは、本件補正発明が「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むことで、引用発明１の高脂血症又はメタボリックシンドロームを治療するための組成物からは、予測し得ないような優れた効果を奏するということはできない。

したがって、請求人の主張（１－１）は、採用できない。

（ウ）上記主張（１－２）について検討する。

請求人が主張するように、引用文献１には、ユーグレナを従属栄養的に増殖させることは記載されていないが、上記ウ（ア）のとおり、本願優先日前、ユーグレナを従属栄養的に増殖させることは周知技術であったから、引用発明１のユーグレナとして、本願優先日前の周知技術に基づいて、「従属栄養的に増殖させたもの」を用いることは、当業者が容易に行うことである。

そして、従属栄養的に増殖させることによる効果について検討すると、本願明細書【０１６６】には、以下の記載がある。

「【０１６６】

ユーグレナの発酵増殖

本明細書に記載の組成物及び方法に有用なユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンは、発酵を利用してユーグレナを増殖させることによって作られる。一般に、培養培地は培養物が従属栄養的に増殖するようにユーグレナに与えられる。しかし、ユーグレナは少なくとも部分的に光を当てて培養できることが企図される。ユーグレナが光合成を利用して増殖するのではなく従属栄養的に発酵される場合、ベータ－１，３－グルカンの大規模な生産は、藻類のための光合成増殖条件の大規模な設定及び発酵を利用した増殖中に得られる細胞密度に一部起因して、実質的に費用効果がより高い。」

しかしながら、引用文献７には、ユーグレナを従属栄養的に増殖させることで、光合成よりも生産性が高く、一定品質のバイオマスを高い生産性で安定に生産可能であることが記載され（摘記７ａ）、引用文献９には、ユーグレナの生育速度やパラミロンの含有量を高めるためには、従属栄養的に増殖させることが優れており、企業レベルでの培養管理の面からも光を用いずに培養した方がより有利であることが記載されているから（摘記９ａ）、ユーグレナを従属栄養的に増殖させることにより、光合成よりも生産性が高く、パラミロンの含有量を高められることは、本願優先日前の技術常識といえる。そうすると、本願明細書【０１６６】に記載されている従属栄養的に増殖させることの効果は、本願優先日前の技術常識から自明の効果にすぎない。

したがって、請求人の主張（１－２）は、採用できない。

（エ）上記主張（１－３）について検討する。

上記ウ（ウ）のとおり、引用発明１におけるベータ－１，３－グルカンの含有量は、「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」に包含されると認められるから、有効量が「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」であることは、実質的な相違点ではなく、仮に、相違点であったとしても、引用発明１において、好ましい有効量を検討し、「０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」という範囲を設定することに、格別の困難性は見いだせない。

したがって、請求人の主張（１－３）は、採用できない。

（オ）以上のとおりであるから、請求人の主張（１－１）～（１－３）を検討しても、上記ア～ウは、左右されない。

オ 小括

したがって、本件補正発明は、引用文献１、５及び６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであり、特許法第２９条第２項の規定により、特許出願の際独立して特許を受けることができるものではない。

（４）引用文献２を主引例とする進歩性について

ア 引用文献２に記載された発明

引用文献２には、ユーグレナ由来物質を含みTh1/Th2/Th17免疫バランスを調整することで、Th1側又はTh2又はTh17側への偏向が関与して生ずる疾患を治療する治療剤が記載されている（摘記２ｂ）。

そして、その具体例として、実施例１のユーグレナグラシリス粉末（摘記２ｈの［００５７］）を混餌した組成物を関節炎モデルのマウスに経口投与したところ（摘記２ｉの［００９５］～［００９６］）、関節炎症状の抑制が認められたと記載されている（摘記２ｉの［００９９］、摘記２ｊの図２８）。

以上によれば、引用文献２には、次の発明（以下、「引用発明２」という。）が記載されているといえる。

＜引用発明２＞

「ユーグレナグラシリス粉末を含むマウスの関節炎症状を抑制するための経口投与用組成物。」

イ 本件補正発明と引用発明２の対比

引用発明２の「ユーグレナグラシリス粉末」は、ユーグレナ細胞であるところ（摘記２ｃ）、本件補正発明の「ユーグレナバイオマス」について、本願明細書【００５６】には、「「バイオマス」という用語はユーグレナ細胞材料を記述するために使用される」と定義されているから、引用発明２の「ユーグレナグラシリス粉末」は、本件補正発明の「ユーグレナ」及び「ユーグレナバイオマス」に相当する。

また、引用文献２に、ユーグレナ細胞内にはパラミロンが存在し、パラミロンは、グルコースがβ－１，３－結合により重合した高分子体（β－１，３－グルカン）であると記載されているとおり（摘記２ｅ）、引用発明２の「ユーグレナグラシリス粉末」は、β－１，３－グルカンを含むユーグレナ、すなわち、β－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスである。そして、β－１，３－グルカンは、β－１，３－結合よりなるから、β－１，３－結合以外のベータ－１，６－グリコシド結合は含まないものである。

そうすると、引用発明２の「ユーグレナグラシリス粉末」は、本件補正発明の「ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマス」に相当し、「ベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカン」を含有するものに相当する。

そして、引用発明２の「関節炎症状を抑制するための経口投与用組成物」は、本件補正発明の「疾患を治療するための経口投与用の組成物」に相当する。

以上によれば、本件補正発明と引用発明２は、以下の点において、一致及び相違する。

＜一致点＞

「疾患を治療するための経口投与用の組成物であって、前記組成物が、ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含み、前記組成物がユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンを含有する組成物。」

＜相違点２－１＞

本件補正発明は、「高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための」組成物であるのに対し、引用発明２は、「マウスの関節炎症状を抑制するための」組成物である点

＜相違点２－２＞

ユーグレナが、本件補正発明は、「従属栄養的に増殖させたもの」であって、「発酵を利用して増殖させた」ものであるのに対し、引用発明２は、そのようなものであるか不明な点

＜相違点２－３＞

ユーグレナバイオマスが、本件補正発明は、「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むものであるのに対し、引用発明２は、そのようなものであるか不明な点

＜相違点２－４＞

本件補正発明は、「有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重である」のに対し、引用発明２は、そのようなものであるか不明な点

ウ 判断

（ア）相違点２－１について

ａ 上記アのとおり、引用文献２には、ユーグレナ由来物質を含みTh1/Th2/Th17免疫バランスを調整することで、Th1側又はTh2又はTh17側への偏向が関与して生ずる疾患を治療する治療剤が記載されているところ（摘記２ｂ）、治療することのできる免疫バランスの偏向が関与して生ずる疾患として、慢性関節炎リウマチと同様に、炎症性腸疾患が記載されている（摘記２ｂの［００１６］、摘記２ｇ）。

ｂ さらに、本願優先日前、ベータ－１，３－グルカンを含む経口投与用組成物が、炎症性腸疾患を治療できることは、下記のとおり公知であった。

例えば、引用文献３には、酵母由来のベータ－１，３－グルカンを含むＳＢＧの経口投与が、ＤＳＳ誘導型のＩＢＤ（炎症性腸疾患）の治療に効果があったことが記載されている（摘記３ａ～３ｅ）。

さらに、引用文献４には、シイタケなどの植物由来のβ（１→３）グルカン、すなわち、ベータ－１，３－グルカンを含む組成物の経口投与によりＤＳＳ誘導炎症性腸疾患を治療できたことが記載されている（摘記４ａ～４ｄ）。

ｃ 一方、上記イのとおり、引用発明２の「ユーグレナグラシリス粉末」は、β－１，３－グルカンを含むから、引用発明２は、ベータ－１，３－グルカンを含むマウスの関節炎症状を抑制するための経口投与用組成物である。

ｄ 以上によれば、引用文献２に、関節炎と同様に治療することができる疾患として炎症性腸疾患が記載され、本願優先日前、ベータ－１，３－グルカンを含む経口投与用組成物が、炎症性腸疾患を治療できることが知られていたことに基づいて、引用発明２のベータ－１，３－グルカンを含むマウスの関節炎症状を抑制するための経口投与用組成物をヒトの炎症性腸疾患を治療するための組成物とすること、すなわち、「高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための」組成物とすることは、当業者が容易に行うことである。

（イ）相違点２－２について

引用文献２には、ユーグレナは培地を用いて培養することができ、光照射下又は無照射で培養してもよいと記載されている（摘記２ｄ）。

また、上記（３）ウ（ア）のとおり、本願優先日前、ユーグレナの増殖方法として、従属栄養的に増殖させること、発酵を利用して増殖させることは周知技術であった。

そうすると、引用発明２のユーグレナグラシリス粉末として、引用文献２の記載及び本願優先日前の周知技術に基づいて、「従属栄養的に増殖させたもの」であって、「発酵を利用して増殖させたもの」を用いることは、当業者が容易に行うことである。

（ウ）相違点２－３について

引用文献２には、引用発明２のユーグレナグラシリス粉末に含まれるベータ－１，３－グルカンの量について特に記載されていない。

しかしながら、上記（３）ウ（イ）のとおり、引用文献５及び６の記載によれば、培養したユーグレナは、５０重量％乃至７０重量％程度のベータ－１，３－グルカンを含むと認められ、一方、引用発明２のユーグレナグラシリス粉末は、培養したユーグレナと考えるのが自然であるから、引用発明２のユーグレナグラシリス粉末について、培養したユーグレナの通常の範囲である「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むものとすることは、当業者が容易に行うことである。

また、仮に、引用発明２のユーグレナグラシリス粉末が培養されていないものであるとしても、上記（イ）のとおり、引用発明２のユーグレナグラリシス粉末として、「従属栄養的に増殖させ」、「発酵を利用して増殖させ」た培養ユーグレナを用いることで、引用発明２のユーグレナグラリシス粉末について、培養したユーグレナにおける通常の範囲である「５０重量％乃至７０重量％」のベータ－１，３－グルカンを含むものとすることは、当業者が容易に行うことである。

（エ）相違点２－４について

引用文献２には、引用文献２記載の免疫バランス調整剤は、体重４０～９０ｋｇの人であれば、パラミロン又はパラミロン加工品の量、すなわち、ベータ－１，３－グルカンの量が、１日あたり０．０５ｇ以上、好ましくは１ｇ以上の量になるように、投与されると記載されている（摘記２ｆ）。そして、好ましい量である１ｇをｋｇ体重あたりに換算すると、４０ｋｇのヒトでは、１ｇ／４０ｋｇ＝２５ｍｇ／ｋｇ体重、９０ｋｇのヒトでは、１ｇ／９０ｋｇ＝１１．１ｍｇ／ｋｇ体重となるから、引用発明２の組成物に含まれるベータ－１，３－グルカンの含有量を、２５ｍｇ／ｋｇ体重や１１．１ｍｇ／ｋｇ体重を含む範囲である「有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」とすることは、当業者が容易に行うことである。

（オ）本件補正発明の効果について

ａ 本願明細書には、引用発明２と同様の炎症性腸疾患に関連して、以下の記載がある。

「【０１２０】

腸の炎症を治療する方法

炎症はベータ－１，３－グルカンによって調節される可能性がある。

・・・

【０１２１】

腸の炎症は消化管の全部又は一部を冒す可能性がある。腸の炎症は、自己免疫疾患の一種であり、小腸、大腸、腸、又はそれらのいずれかの組み合わせの炎症を指す。・・・腸の炎症の正確な根本的な生理的原因は不明であるが、一般には、遺伝的及び環境的要因が個人の免疫応答をシフトさせ、異常な免疫応答が生じると考えられている。」

ｂ また、本願明細書には、腸の炎症について、以下の実施例が記載されている。

「【０３２０】

腸の炎症

実施例９：ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスの経口投与

反復回分法を用いてバイオリアクターで発酵を利用してユーグレナを培養する。最後のステップでは、ユーグレナを約４０グラムの乾燥重量／リットル～約８０グラムの乾燥重量／リットルの細胞密度まで培養し、収穫する。ユーグレナ細胞はベータ－１，３－グルカン含有率が約５０重量％である。タンジェンシャルフローろ過を用いてユーグレナ細胞培養物をろ過し、使用済み増殖培地を廃棄し、細胞を水で洗浄する。結果として得られるユーグレナバイオマスを薄いシートに圧延し、含水率１０％未満に乾燥させる。乾燥バイオマスを１０００ミクロン未満に微粉砕し、次いでユーグレナバイオマスをヒトに経口投与して腸の炎症を治療する。

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【０３２１】

実施例１０：ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスの栄養補助食品としての経口投与

反復回分法を用いてバイオリアクターで発酵を利用してユーグレナを培養する。最後のステップでは、ユーグレナを約４０グラムの乾燥重量／リットル～約８０グラムの乾燥重量／リットルの細胞密度まで培養し、収穫する。ユーグレナ細胞はベータ－１，３－グルカン含有率が約５０重量％である。タンジェンシャルフローろ過を用いてユーグレナ細胞培養物をろ過し、使用済み増殖培地を廃棄し、細胞を水で洗浄する。次いで、ユーグレナバイオマスをドラム乾燥機で含水率５％未満に乾燥させる。乾燥フレークを、ハンマーミルを使用して平均粒径が２５０ミクロン未満の粉末に加工する。次いで、粉末を経口投与向けの錠剤に成形して、腸の炎症を治療する。代替的に、粉末を食品と混合し、食品と共に経口投与して腸の炎症を治療する。代替的に、粉末を経口投与用カプセルに入れ、腸の炎症を治療する。

【０３２２】

実施例１１：ユーグレナからのベータ－１，３－グルカンの精製

・・・

【０３２５】

実施例１２：化学的に誘発された急性大腸炎に対するユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前処理の効果を決定するための生体内研究

ベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを、本明細書に記載のように発酵過程を用いて増殖させた。乾燥ユーグレナバイオマス及び精製ベータグルカン抽出物をマウスの研究においてテストした。有機炭素源としてグルコースを用いて増殖させたユーグレナ細胞から乾燥ユーグレナバイオマスを作製した。ユーグレナバイオマスは約５０重量％のベータ－１，３－グルカンを含有し、遠心分離した後に、さらなる処理なしで乾燥させた。ユーグレナバイオマス生成物を分画してベータ－１，３－グルカンを単離し、次いでベータグルカン画分を繰り返し洗浄して非ベータグルカン細胞構成要素を除去すると、ベータ－１，３－グルカンの精製試料が得られた。精製試料はベータ－１，３－グルカンを約９５重量％含んだ。リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を陰性対照として投与した。

【０３２６】

乾燥ユーグレナバイオマス試料及び精製ベータ－１，３－グルカン試料を乾燥させ、５００ミクロン未満の粒径に粉砕した。次いで、これらの乾燥粉末をＰＢＳバッファーと混合し、適切な濃度に希釈した後に、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに強制経口投与によって与えた。試験の期間中（１５日間）、マウスを、１日１回、絶食の２時間後に、（ｉ）ＰＢＳ（「なし」）、（ｉｉ）乾燥ユーグレナバイオマス（「Ａ５０」；２５０μｇ／マウス／日）、又は（ｉｉｉ）精製ベータ－１，３－グルカン（「ＡＧ」；１２５μｇ／マウス／日）のいずれかで治療した。この投薬により、乾燥ユーグレナバイオマスを投与されたマウスが、精製ベータ－１，３－グルカンを投与されたマウスと同等の投与量のベータ－１，３－グルカンを受けることを確実にした。・・・さまざまなパラメーターを用いて決定した、化学的に誘発された急性大腸炎に対するユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療の効果は実施例１３～１９に記載されている。

【０３２７】

実施例１３：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスの体重に対するユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療の効果

マウスを実施例１２に記載のように治療した。各マウスの体重を実験中毎日記録した。体重の減少は大腸炎の兆候と考えられている。・・・

【０３２８】

・・・このデータは、精製されたベータ－１，３－グルカンを用いた治療が、特に他の因子（便の硬さ及び便血の存在など）と併せて考慮した場合に、ＤＳＳ誘発急性大腸炎からの早期回復に有効であることを示唆する。

【０３２９】

・・・このデータは、乾燥ユーグレナバイオマスを用いた治療が、マウスにおけるＤＳＳによって誘発された急性大腸炎の重症度を予防又は最小化するのに有効であることを示している。

・・・

【０３３１】

・・・

実施例１４：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスにおけるユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前処理の便の硬さに対する効果

化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスを実施例１２に記載のように治療した。各マウスの便の硬さを実験中毎日記録した。体重の減少は大腸炎の兆候と考えられている。・・・

【０３３２】

・・・このデータは、乾燥ユーグレナバイオマスを用いた治療が、マウスにおけるＤＳＳによって誘発された急性大腸炎の重症度を予防又は最少化するのに特に有効であることを示す。

【０３３３】

実施例１５：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスにおけるユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療の便血に対する効果

化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスを実施例１２に記載のように治療した。各マウスの目に見える便血／直腸出血レベルの程度を実験中毎日記録した。・・・

【０３３４】

・・・このデータは、乾燥ユーグレナ・グラシリス又は精製ベータ－１，３－グルカンを用いた治療が、マウスにおけるＤＳＳによって誘発された急性大腸炎の重症度を予防又は最少化するのに有効であることを示す。

【０３３５】

実施例１６：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスにおける結腸の長さに対するユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療の効果

化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスを実施例１２に記載のように治療した。１０日目にマウスを安楽死させ、続いて個々のマウスの結腸の長さを測定した（７頭のマウス／治療群）。・・・このデータは、乾燥ユーグレナバイオマスを用いた治療が、マウスにおけるＤＳＳによって誘発された急性大腸炎を予防又は最少化するのに特に有効であることを示している。

【０３３６】

実施例１７：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスにおけるユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療の結腸の炎症に対する効果

化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスを実施例１２に記載のように治療した。１０日目にマウスを安楽死させた後に結腸の炎症の程度を測定した（３頭のマウス／治療群）。・・・

【０３３７】

・・・このデータは、乾燥ユーグレナ・グラシリス又は精製ベータ－１，３－グルカンを用いた治療が、マウスにおけるＤＳＳによって誘発された急性大腸炎の重症度を予防又は最少化するのに有効であることを示す。

【０３３８】

実施例１８：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスにおけるユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療のＴヘルパー細胞応答に対する効果

化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスを実施例１２に記載のように治療した。Ｔヘルパー細胞機能に関連するサイトカインの頻度を、１０日目に個々のマウスにおいて分析した（３頭のマウス／治療群）。・・・

【０３３９】

乾燥ユーグレナバイオマスで治療したマウスは、ＰＢＳで治療したマウスに比べて、ＣＤ４＋Ｔ細胞を産生するＴｈ１（ＩＦＮ－γ）、Ｔｈ１７（ＩＬ－１７及びＩＬ－２２）、並びにＴｈ９（ＩＬ－９）の頻度が有意に低かった。精製ベータ－１，３－グルカンで治療したマウスは、ＰＢＳで治療したマウスに比べて、ＣＤ４＋Ｔ細胞を産生するＴｈ１（ＩＦＮ－γ）のレベルが相対的に低い。・・・

【０３４０】

・・・

実施例１９：化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスにおけるユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの前治療のＴヘルパー細胞サイトカインプロファイルに対する効果

化学的に誘発された急性大腸炎をもつマウスを実施例１２に記載のように治療した。１０日目に結腸免疫細胞によるサイトカイン産生を個々のマウスにおいて分析した（３頭のマウス／治療群）。・・・

【０３４１】

データは、乾燥ユーグレナバイオマスで治療したマウスにおいてＴｈ１（ＩＦＮ－γ）及びＴｈ１７（ＩＬ－１７）サイトカインが抑制されたことを示す。精製ベータ－１，３－グルカンで治療したマウスにおいて、炎症促進性（ＩＬ－２２、ＩＬ－９（Ｔｈ９））と抗炎症性（ＩＬ－１０、ＩＬ－４（Ｔｈ２））の両方のサイトカインがより高いレベルで結腸免疫細胞によって産生された。乾燥ユーグレナバイオマスを用いた治療による大腸炎からの特に顕著なマウスの保護は、サイトカインＩＬ－１０の産生の増加及び炎症性免疫細胞の動員の阻害によるものと思われる。

【０３４２】

実施例２０：個人における腸の炎症に対するユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを摂取することの効果を評価するための臨床研究

治験を利用して、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを摂取することの腸の炎症の治療に対する効果を評価する。（登録施設内審査委員会によって承認された）書面によるインフォームドコンセントと選考過程を予め整えた後に参加者を募集する。試験は４週間の期間であり、評価はベースライン、２及び４週間のベータ－１，３－グルカン摂取時に行われる。ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンをカプセル形態で投与して、各個人に２５０ｍｇの１日投与量を与える。

・・・

【０３４４】

図２１に示すように、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの経口摂取は個人における炎症性好塩基球の数を減少させる。このデータは、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンが個人の免疫系機能を調節することを示す。

【０３４５】

図２２に示すように、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの経口摂取は個人における緊急の排便又は下痢の回数に影響する。このデータは、０～２週目の腸障害の統計的に有意な減少（ｐ＜０．０５、＊）及び２～４週目の統計的傾向に達している腸障害の増加（ｐ＜０．１、（＊））を示す。このデータは、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンが個人の腸の健康状態に関与することを示す。

【０３４６】

また、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの経口摂取は、酸化ストレスに対する個人の応答を調節し、炎症に関与しうる。・・・図２３に示すように、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの経口摂取は個人のＳＯＤのレベルを増加させる。ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの経口摂取の最初の２週間に平均ＳＯＤレベルの有意な増加が見られ、続いて次の２週間に軽度の減少が見られた。本試験の最後の２週間にわたって軽度の減少があったにもかかわらず、４週間にわたる全体的な改善はすべての参加者に関して有意性が非常に高かった（ｐ＜０．０１、＊＊）。

【０３４７】

体内のフリーラジカルストレスの別の尺度は脂質過酸化である。脂質過酸化は、酸化的ストレスによって誘発される細胞損傷の主要な機序の１つである。・・・ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンの経口摂取の最初の２週間に脂質過酸化の有意な減少が見られ、続いて次の２週間に軽度の増加が見られた（図２４）。本試験の最後の２週間にわたって軽度の増加があったにもかかわらず、４週間にわたる全体的な改善は有意性が非常に高かった（ｐ＜０．０１、＊＊）。」

ｃ 上記ａに摘記した本願明細書の記載によれば、本件補正発明は、異常な免疫応答が原因と考えられている腸の炎症を治療できるとの効果を奏するといえる。

しかしながら、上記アのとおり、引用文献２には、ユーグレナ由来物質を含みTh1/Th2/Th17免疫バランスを調整することで、Th1側又はTh2又はTh17側への偏向が関与して生ずる疾患を治療する治療剤が記載され、引用発明２は、その具体例であるから、引用発明２も免疫バランスを調整する効果を奏するものであり、引用文献２には、免疫バランスを調整することで治療し得る疾患として、炎症性腸疾患が記載されている。加えて、上記ウ（ア）ｂのとおり、引用文献３、４には、ベータ－１，３－グルカンを含む経口投与用組成物が炎症性腸疾患を治療できることが記載されているから、本件補正発明が腸の炎症を治療できるとの効果は、引用文献２～４の記載から予測し得るものである。

ｄ 上記ｂに摘記した本願明細書記載の実施例９、１０には、発酵を利用して培養した、ベータ－１，３－グルカンの含有率が５０重量％であるユーグレナを投与して腸の炎症を治療すると記載されているが、ユーグレナが「従属栄養的に増殖させた」ものであるか不明であり、「有効量」も不明であるから、本件補正発明の具体例とはいえず、そもそも結果として治療できたことも記載されていない。

そして、仮に、実施例９、１０において腸の炎症の治療ができるとの結果が得られるとしても、上記ｃと同様に、腸の炎症が治療できるとの効果は、引用文献２～４の記載から予測し得るものである。

ｅ 上記ｂに摘記した本願明細書記載の実施例１１には、ベータ－１，３－グルカンを精製したことが記載されているだけであるから、実施例１１からは本件補正発明が優れた効果を奏することは理解できない。続く実施例１２には、発酵過程を用いて増殖させたユーグレナを遠心分離後、さらなる処理なしで乾燥した約５０重量％のベータ－１，３－グルカンを含む「乾燥ユーグレナバイオマス（Ａ５０）」、又は、非ベータグルカン細胞構成要素を精製して除去した、約９５重量％のベータ－１，３－グルカンを含む「精製ベータ－１，３－グルカン（ＡＧ）」を、ＤＳＳで急性大腸炎を誘発したマウスに経口投与することが記載され、その効果は、実施例１３～１９に記載されている、と記載されている。

そして、実施例１３～１９には、上記「約５０重量％のベータ－１，３－グルカン」を含む「乾燥ユーグレナバイオマス（Ａ５０）」及び「約９５重量％のベータ－１，３－グルカン」を含む「精製ベータ－１，３－グルカン（ＡＧ）」が急性大腸炎の治療において有効であったことが記載されている。詳細には、実施例１３には、精製ベータ－１，３－グルカンはＤＳＳ誘発性急性大腸炎からの早期回復に有効であり、乾燥ユーグレナバイオマスは重症度を予防又は最小化するのに有効であると記載され、実施例１４には、乾燥ユーグレナバイオマスが特に有効であると記載され、実施例１５には、乾燥ユーグレナバイオマス又は精製ベータ－１，３－グルカンが重症度を予防又は最少化するのに有効であると記載され、実施例１６には、乾燥ユーグレナバイオマスが特に有効であると記載され、実施例１７には、乾燥ユーグレナ・グラシリス又は精製ベータ－１，３－グルカンが重症度を予防又は最少化するのに有効と記載され、実施例１８には、乾燥ユーグレナバイオマスは、ＣＤ４＋Ｔ細胞を産生するＴｈ１（ＩＦＮ－γ）、Ｔｈ１７（ＩＬ－１７及びＩＬ－２２）、並びにＴｈ９（ＩＬ－９）の頻度が有意に低く、精製ベータ－１，３－グルカンは、ＣＤ４＋Ｔ細胞を産生するＴｈ１（ＩＦＮ－γ）のレベルが相対的に低いと記載され、実施例１９には、乾燥ユーグレナバイオマスはＴｈ１（ＩＦＮ－γ）及びＴｈ１７（ＩＬ－１７）サイトカインを抑制し、精製ベータ－１，３－グルカンは、炎症促進性（ＩＬ－２２、ＩＬ－９（Ｔｈ９））と抗炎症性（ＩＬ－１０、ＩＬ－４（Ｔｈ２））の両方のサイトカインをより高いレベルで産生し、乾燥ユーグレナバイオマスを用いた治療による大腸炎からの特に顕著なマウスの保護は、サイトカインＩＬ－１０の産生の増加及び炎症性免疫細胞の動員の阻害によるものと思われると記載されている。

実施例１２～１９のユーグレナは、「従属栄養的に増殖させた」ものであるか不明であり、体重あたりの「有効量」も不明であるから、実施例１２～１９は、本件補正発明の具体例とはいえないものの、約５０重量％のベータ－１，３－グルカンを含む「乾燥ユーグレナバイオマス」の投与により、マウスにおけるＤＳＳ誘発性急性大腸炎を治療するための組成物としての効果を奏すること、約９５重量％のベータ－１，３－グルカンを含む「精製ベータ－１，３－グルカン」よりも優れた効果を奏する評価項目もあることは理解できるから、本件補正発明が、炎症性腸疾患を治療するための組成物としての効果を奏すること、評価項目によっては、ベータ－１，３－グルカンの含有量が約９５重量％よりも約５０重量％の方が好ましい効果を奏することもあることは理解できる。

しかしながら、上記ｃと同様に、炎症性腸疾患を治療できるとの効果は、引用文献２～４の記載から予測し得るものである。

そして、引用文献２には、実施例１のユーグレナグラシリス粉末、実施例１のユーグレナグラシリス粉末から脂質やタンパク質を除去して精製した実施例２のパラミロン、実施例２のパラミロンから調製した実施例３のアモルファスパラミロン、実施例２のパラミロンから調製した実施例４のエマルジョンパラミロンをそれぞれ、ユーグレナ群、パラミロン群、アモルファスパラミロン群、エマルジョンパラミロン群として、関節炎モデルのマウスに経口投与して自己免疫疾患に対する作用について検討を行った結果（摘記２ｈ及び摘記２ｉの［００９５］～［００９６］）、ユーグレナ群、パラミロン群、アモルファスパラミロン群及びエマルジョンパラミロン群で関節炎の発症抑制作用が認められ、特に、ユーグレナ群、アモルファスパラミロン群では、その作用が顕著であり、組織学的にも顕著な抑制が認められたと記載されているから（摘記２ｉの［０１０９］）、ユーグレナ群は、パラミロン群よりも、関節炎の発症抑制作用が顕著であると認められる。

上記実施例２のパラミロンは、実施例１のユーグレナグラシリス粉末から脂質やタンパク質を除去して精製したものであるから、実施例１のユーグレナ群は精製前のユーグレナであり、実施例２のパラミロン群は精製したユーグレナである。そうすると、引用文献２には、精製前のユーグレナも精製したユーグレナも関節炎の治療効果があるものの、特に、精製前のユーグレナの作用が顕著であったことが記載されているといえる。そして、上記ウ（ア）ａのとおり、引用文献２には、関節炎と炎症性腸疾患は、免疫バランスの偏向が関与して生ずる疾患であり、免疫バランスを調整することで治療されることが記載されているから、精製後のユーグレナよりも精製前のユーグレナの方が関節炎に対して顕著な作用を示すのであれば、同じく免疫バランスを調整することで治療される炎症性腸疾患についても、精製後のユーグレナよりも精製前のユーグレナの方が顕著な作用を示すことは当業者が予測し得るといえる。

以上によれば、本願明細書に精製前の約５０重量％のベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含む組成物が、精製後の約９５重量％のベータ－１，３－グルカンを含む組成物よりも優れた効果を奏する評価項目もあることが記載されていても、当該効果は、引用文献２の記載から予測し得ない程優れたものであるとはいえない。

ｆ さらに、上記ｂに摘記した本願明細書記載の実施例２０は、ユーグレナ由来のベータ－１，３－グルカンを２５０ｍｇ経口投与して腸の炎症に対する効果を評価して、腸の健康状態に関与することを示すと記載されているが、ユーグレナが「従属栄養的に増殖させた」ものであるか不明であり、ユーグレナバイオマスに含まれるベータ－１，３－グルカンの量も不明であるから、本件補正発明の具体例とはいえないし、上記ｃと同様に、腸の炎症が治療できるとの効果は、引用文献２～４の記載から予測し得るものである。

ｇ 以上のとおりであるから、本件補正発明が、引用文献２～６の記載から予測し得ないような優れた効果を奏するということはできない。

エ 請求人の主張について

（ア）請求人は、令和４年４月２８日提出の意見書において、以下の主張（２－１）を挙げ、また、令和５年１月１６日提出の審判請求書において、以下の主張（２－２）及び（２－３）を挙げて、本件補正発明は、引用文献２～６の記載に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではないと主張している。

主張（２－１）

本件補正発明の特徴の一つは、所定量のベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含むことであり、本件補正発明は、同等量のベータ－１，３－グルカンを投与した場合、精製ベータ－１，３－グルカンに比して、ユーグレナバイオマスとして投与することにより炎症性腸疾患に対して優れた効果を示す（実施例１２乃至１９等）という予測し得ない効果を奏するのに対し、引用文献２には、主としてユーグレナから単離したパラミロンの作用等について記載され、当業者であれば、引用文献２からは、精製したパラミロン／グルカンはユーグレナ自体より優れた作用を有すると理解する。

また、引用文献３は酵母由来のグルカンに関するものであり、引用文献４は加水分解により所定の分子量に調整された植物（きのこ類）由来のベータ－１，３－グルカンに関するものであり、本件補正発明の構成を何ら教示するものではない。

したがって、本件補正発明は、引用文献２～６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではない。

主張（２－２）

いずれの引用文献にも、ユーグレナが従属栄養的に増殖させたものであることについて記載されておらず、引用文献を組み合わせたとしても、本件補正発明の構成に至るものではなく、所定の増殖をしたユーグレナバイオマスを投与することにより優れた効果を示すことを予測することも困難であるから、本件補正発明は、引用文献２～６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではない。

主張（２－３）

本件補正発明は、経口投与される組成物において、所定の増殖をしたユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンの有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重であるのに対し、いずれの引用文献にも当該構成については開示・示唆されておらず、このような引用文献から本件補正発明の構成を想到することは困難であるから、本件補正発明は、引用文献２～６に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものではない。

（イ）上記主張（２－１）について検討する。

請求人は、「本件補正発明は、同等量のベータ－１，３－グルカンを投与した場合、精製ベータ－１，３－グルカンに比して、ユーグレナバイオマスとして投与することにより炎症性腸疾患に対して優れた効果を示す（実施例１２乃至１９等）という予測し得ない効果を奏する」と主張しているが、上記ウ（オ）ｅのとおり、引用文献２には、精製前のユーグレナも精製したユーグレナも関節炎の治療効果があるものの、特に、精製前のユーグレナの作用が顕著であったことが記載されているから、実施例１２～１９に精製ベータグルカンよりも精製前のユーグレナバイオマスの方が優れた効果を奏する評価項目もあることが記載されていても、当該効果は、引用文献２の記載から予測し得ない程優れたものであるということはできない。

また、上記ウ（ア）ｂのとおり、引用文献３及び４には、由来は異なるものの、ベータ－１，３－グルカンが炎症性腸疾患を治療できることが記載されており、そもそも引用文献２に治療することができる疾患として炎症性腸疾患が記載されているのであるから、ベータ－１，３－グルカンを含む引用発明２を炎症性腸疾患の治療するための組成物とすることは、当業者が容易に行うことである。

したがって、請求人の主張（２－１）は、採用できない。

（ウ）上記主張（２－２）について検討する。

請求人が主張するように、引用文献２には、ユーグレナを従属栄養的に増殖させることは記載されていないが、上記ウ（イ）のとおり、本願優先日前、ユーグレナを従属栄養的に増殖させることは周知技術であったから、引用発明２のユーグレナとして、本願優先日前の周知技術に基づいて、「従属栄養的に増殖させたもの」を用いることは、当業者が容易に行うことである。

そして、本願明細書に記載されている従属栄養的に増殖させることの効果は、本願優先日前の技術常識から予測し得る効果にすぎないことは、上記（３）エ（ウ）のとおりである。

したがって、請求人の主張（２－２）は、採用できない。

（エ）上記主張（２－３）について検討する。

上記ウ（エ）のとおり、引用文献２の記載に基づいて、「有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重」とすることは、当業者が容易に行うことである。

したがって、請求人の主張（２－３）は、採用できない。

（オ）以上のとおりであるから、請求人の主張（２－１）～（２－３）を検討しても、上記ア～ウは、左右されない。

オ 小括

したがって、本件補正発明は、引用文献２～６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであり、特許法第２９条第２項の規定により、特許出願の際独立して特許を受けることができるものではない。

３ 本件補正についてのむすび

以上のとおり、本件補正発明は、特許法第２９条第２項の規定により、特許出願の際独立して特許を受けることができるものではないから、本件補正は、特許法第１７条の２第６項において準用する同法第１２６条第７項の規定に違反するものであり、同法第１５９条第１項において読み替えて準用する同法第５３条第１項の規定により却下されるべきものである。

よって、上記補正の却下の決定の結論のとおり決定する。

第３ 本願発明について

１ 本願発明

上記第２のとおり、本件補正は却下されたので、本願の請求項１～２７に係る発明は、令和４年４月２８日提出の手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１～２７に記載された事項により特定されるものであるところ、その請求項１に係る発明（以下、「本願発明」という。）は、次のとおりである。

「【請求項１】

高脂血症、メタボリックシンドローム、炎症性腸疾患、大腸炎、及びクローン病からなる群より選択される疾患をもつヒトにおける前記疾患を治療するための経口投与用の組成物であって、

前記組成物が、５０重量％乃至７０重量％のベータ－１，３－グルカンを含むユーグレナバイオマスを含み、

前記組成物が発酵を利用して増殖させたユーグレナのベータ－１，６－グリコシド結合を含まないベータ－１，３－グルカンの有効量を含有し、前記有効量が、０．１ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重乃至１００ｍｇのベータ－１，３－グルカン／ｋｇ体重である、

組成物。」

２ 原査定の拒絶の理由

原査定の拒絶の理由のうち、本願発明に対応する請求項１に係る発明についての拒絶の理由は、次のとおりのものである。

本願の請求項１に係る発明は、本願の優先日前に頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであり、さらに、本願の優先日前に頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった引用文献２～６に記載された発明に基づいて、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。

３ 当審の判断

（１）引用文献の記載事項

原査定の拒絶の理由で引用された引用文献１～６の記載事項は、上記第２の２（２）のとおりである。

（２）本願発明と引用文献に記載された発明の対比、判断

上記第２の２で検討したとおり、本願発明の「ユーグレナ」を「従属栄養的に増殖させたもの」に限定したものが本件補正発明であるから、本願発明は、本件補正発明を包含するものである。

そして、本件補正発明は、上記第２の２に説示したとおり、引用文献１、５及び６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであり、また、引用文献２～６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、本件補正発明を包含する本願発明も、同様の理由により、引用文献１、５及び６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであり、また、引用文献２～６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものである。

第４ むすび

以上のとおり、本願の請求項１に係る発明は、引用文献１、５及び６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであり、また、引用文献２～６に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものである。

したがって、他の請求項に係る発明について検討するまでもなく、本願は拒絶すべきものである。

よって、結論のとおり審決する。