2022-001296

本願は、平成２９年１１月１３日（パリ条約による優先権主張 ２０１６年１２月７日 （ＵＳ）アメリカ合衆国）を国際出願日とする出願であって、令和３年９月２７日付けで拒絶査定がなされ、これに対して、令和４年１月２８日に拒絶査定不服審判が請求されるとともに手続補正がなされたものである。その後の当審における手続の経緯は、以下のとおりである。

令和５年 ３月 ９日付け 拒絶理由通知書

令和５年 ９月１３日 意見書および手続補正書の提出

１．引用文献の記載事項

(１)引用文献２

当審の拒絶理由で引用した特表平９－５０１３０３号公報（以下「引用文献２」という。）には、以下の事項が記載されている。（下線は当審で付与した。以下も同様。）

【特許請求の範囲】

ア「２０．ＲＰＥ細胞の単層と、網膜下領域に移植し、かつ前もって決めた条件に暴露した場合に、正常な眼組織機能を妨げない、非毒性可撓性支持体との積層を含む、宿主の眼に移植するための移植組織。」

「３３．前記支持体が、フィブリンを含む、請求の範囲２０項記載の移植組織。」

【発明の詳細な説明】

イ「・・・本発明は、更に、宿主の眼の網膜下領域へ移植するための移植片に関する。移植片は、ＲＰＥ細胞の単層と、網膜下領域へ移植し、所定の条件に暴露した時に、通常の眼組織の機能を妨げない非毒性の可撓性支持体との積層体を含有する。」（９頁２５～２７行）

ウ「図２および３には、ＲＰＥ細胞の単層を含む移植組織を、一般に、ＲＰＥ細胞をドナー組織から採取し、採取した無傷の単層のＲＰＥ細胞を無毒で柔軟な組成物に積層させるか、またはそのような組成物を分離したＲＰＥ細胞の単層に摂取してそれらを融合層に成育させることにより、準備することが示されている。移植組織の成分は、ＲＰＥ細胞の単層と、約１００～５００ミクロンの厚さ、好ましくは１５０～２５０ミクロンの厚さの支持組成物との積層体からなる。」（１１頁２３～２８行）

エ「この移植組織は、又、ＲＰＥ細胞についての支持体(support)を含むので、ＲＰＥ細胞の単層はほとんど損傷せず、移植操作の間一層容易に操作できる。基体、被覆層又はその両方からなる支持体は、ＲＰＥ細胞の少し損傷した単層に機械的強度と安定性とを付与するのに選ばれた非毒性で柔軟な組成物の１枚以上のシートを含む。」（１３頁１５～１９行）

オ「上記のように、コラーゲンの層を補うためか、又は、コラーゲン・アンカーを含むことが必要ではない場合に、例えば、十分量の熱、選択された酵素、又は体液に暴露させることにより、放散する（dissipate）支持体組成物を選択することができる。ゼラチンは、可撓性で、神経組織に対して毒性がなく、体温で溶解する能力を有する、好ましい支持体材料の一例である。支持体組成物は、活性化した低ゲル化温度アガロース（タイプVII、#A4018 シグマ化学会社(Sigma Chemical Co.，St．Louis)）又はフィブリンのような材料を含有することもできる。」（１５頁１～７行）

カ「図３に、本発明による移植片の他の態様を図示する。上記図２との関係で上に記載したように、基質９を塗布したカルチャー容器上でＲＰＥ細胞の単層５を成長させる。但し、本態様においては、基質９は移植の間ラミネートされたままであって移植片１ａの一部を含む。移植に使用する基質９はアガロースを含んでいてよく、これは生物的に不活性であって、前記のようにアガロースを選択的に攻撃する酵素であるアガラーゼに曝すことにより分解してよい。本態様においては、活性化したアガロースに強固に結合する、厚さ約２～４ミクロンのコラーゲンの薄層７に、活性化したアガロースを塗布する。次いでＲＰＥ細胞の単層５をコラーゲン７に並べ、簡単に取り付けて、移植用の移植片１ａとして使用するＲＰＥ細胞と支持組成物（コラーゲン７及び基質９）のラミネートを形成する。図２に関して記載したようにゼラチン上層を追加する代わりに、剃刀を用いて基質９を含む材料のシートを厚さ約150～250mmにスライスし、移植の間のＲＰＥ細胞の単層５及びコラーゲン７の固定用支持体として使用する。」（１８頁最終行～１９頁１３行）

キ「図２に関連して論じたフィブリンは、図３に描かれた実施態様において、基質９として使用することができる。フィブリンは、血液クロットの構造部材を形成する繊維状の不溶性タンパクである。フィブリンは、プレスして引張強さを高めることができ、また、ＲＰＥ細胞が付着し、単層として成長するであろう柔軟な無毒性支持体を提供する材料である。フィブリンを製造するためには、基質使用に適したフィブリンクロットを、トロンビンの添加によりフィブリンへのフィブリノーゲンの重合を触媒することにより製造する。移植後、フィブリンは、血液クロットを溶解する天然生産酵素への暴露により散逸(dissipate)するであろう。」（２０頁１～９行）

ク「【図３】

［図：0001408241000001.jpg］

」（２９頁）

(２)引用文献１

当審の拒絶理由で引用した特開２０１６－５２２７１号公報（以下「引用文献１」という。）には、以下の事項が記載されている。

【特許請求の範囲】

「【請求項１】

シート状細胞培養物の上面にフィブリノゲンを含む液体を滴下するステップと、前記面にトロンビンを含む液体を噴霧するステップと、前記面にフィブリノゲンとトロンビンとの反応によりフィブリンゲルの層を形成するステップとを含む、フィブリンゲルとシート状細胞培養物との積層体を製造する方法。」

【発明の詳細な説明】

「【技術分野】

【０００１】

本発明は、シート状細胞培養物とフィブリンゲルとの積層体の製造方法、当該製造方法で製造された積層体、当該積層体を含む医薬組成物、当該積層体を用いた疾患の処置方法などに関する。」

「【００２２】

フィブリノゲンを含む液体（以下、フィブリノゲン液と称することもある）としては、トロンビンと反応してフィブリンゲルを形成し得るものであれば特に限定されず、フィブリノゲンを、例えば、１ｍｇ／ｍＬ～５００ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ～４００ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ～９０ｍｇ／ｍＬなどの濃度で含む液体が挙げられる。フィブリノゲン液の溶媒は、典型的には水である。」

「【００５５】

例１ フィブリンゲルとシート状細胞培養物との積層体の製造

・・・

【００５６】

培養皿中の培養液を除去し、必要に応じてシート状細胞培養物を整形した後（図１）、シート状細胞培養物上にフィブリノゲン液（ボルヒール(R)組織接着用（帝人ファーマ社製）のバイアル１の内容物（フィブリノゲン凍結乾燥粉末）をバイアル２の内容物（フィブリノゲン溶解液）で溶解したもの、フィブリノゲン濃度８０ｍｇ／ｍＬ、以下同じ）を５００μＬ、ボルヒール(R)組織接着用に付属する調製器セットの２液混合セット（長さ約６ｃｍ、内径約１ｍｍのアプライノズル付、ニプロ社製）を用いて滴下した（図２）。次いで、トロンビン液（ボルヒール(R)組織接着用（帝人ファーマ社製）のバイアル３の内容物（トロンビン凍結乾燥粉末）をバイアル４の内容物（トロンビン溶解液）で溶解したもの、トロンビン濃度２５０単位／ｍＬ、以下同じ）を８００μＬ、ボルヒール(R)スプレーセット（秋田住友ベーク社製）を用い、噴霧ノズルを細胞シートから約７ｃｍ離して０．０３ＭＰａの圧力で噴霧した（図３）。・・・

【００５７】

フィブリノゲン液とトロンビン液との反応により、フィブリンゲルが形成される。・・・」

(３)周知技術を示すための引用文献３

周知技術を示すために、追加して引用する特表２００９－５０２３６４号公報（以下「引用文献３」という。）には、以下の事項が記載されている。

【特許請求の範囲】

「【請求項１】

バイオポリマーを含む製造品であって、脱水されている製造品。

【請求項２】

前記バイオポリマーがタンパク質、フィブリン、フィブリノゲン、コラーゲン、ゼラチン、エラスチン、細胞外マトリクス構成要素、ポリサッカライド、ヒアルロン酸、およびそれらの組合せから成る群より選択される、請求項１に記載の製造品。」

【発明の詳細な説明】

「【０００６】

簡単な概要

本明細書で開示する構築物は、宿主組織のタンパク質分解プロセスに応答して分解されうる生体適合性材料を構成する。・・・」

「【０１６７】

・・・他の実施形態において、バイオポリマーマトリクスはその最も単純な形でフィブリノゲンおよびトロンビンより成る。これらの２つの成分は、未変性血栓形成および市販のフィブリン接着剤の両方のベースを形成する。・・・

【０１６８】

・・・ある実施形態において、フィブリノゲンは、４～７５ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で調製されうる。４ｍｇ／ｍｌは未変性フィブリン血餅の濃度であり、最大１３０ｍｇ／ｍｌが市販のフィブリン接着剤調合物、たとえばＴＩＳＳＥＥＬ（商標）が使用される。」

「【０１８５】

実施例１

フィブリン処理

１ｍＬバッチ用のフィブリン調合物は、４０ｍｇ／ｍＬ ＡｖｅｎｔｉｓまたはｄｉａＰｈａｒｍａフィブリノゲン２５０μＬ（それぞれＺＢＬ Ｂｅｈｒｉｎｇ，Ｋｉｎｇ ｏｆ Ｐｒｕｓｓｉａ，ＰＡ；またはｄｉａＰｈａｒｍａ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＯＨより市販）、滅菌水２３０μＬ、・・・を含む溶液を混合することによって調製した。フィブリノゲン調合物を続いて３７℃にて３０分間インキュベートして、成長因子を溶液中のフィブリノゲンと結合させた。

【０１８６】

１ｍＬバッチ用のトロンビン調合物は、１００Ｕ／ｍＬトロンビン１００μＬおよび５００ｍＭ ＣａＣｌ２１０μＬ（Ｓｉｇｍａ）を含む別の溶液を混合することによって調製した。

【０１８７】

フィブリンゲルは、トロンビン溶液１５μＬを１．５ｍＬ微量遠心管に添加し、フィブリノゲン溶液３５０μＬを微量遠心管に添加し、混合溶液をゲル型にすぐに移すことによって調製した。次にゲル溶液をゲル型内で２０～３０分間固化させて、完全にゲル化させた。ゲル溶液が完全に固化した２０～３０分後に、型を分解して、生じたフィブリンフィルムを取り外した。」

２．引用発明の認定

引用文献２には、ＲＰＥ細胞の単層と、フィブリンを含む非毒性可撓性支持体との積層を含む、宿主の眼の網膜下領域に移植するための移植組織が記載され（上記１(１)ア、イ）、前記移植組織の実施態様として、図３において、ＲＰＥ細胞の単層５、厚さ約２～４ミクロンのコラーゲンの薄層７、活性化したアガロースを含む「厚さ約１５０～２５０ｍｍ」にスライスされた基質９の積層である移植片１ａ（上記１(１)カ、ク）、及び、前記活性化したアガロースを含む基質９に代えて、フィブリノーゲンにトロンビンを添加して製造されるフィブリンを含む基質９を有する実施態様（上記１(１)キ）が記載されている。

ここで、上記１(１)ウの「１５０～２５０ミクロンの厚さの支持組成物」の記載、及び、眼の網膜下領域に移植するための移植組織についての本願優先日前の技術常識からみて、上記１(１)カの「厚さ約１５０～２５０ｍｍ」は、「厚さ約１５０～２５０ミクロンの誤記であることが明らかである。

よって、引用文献２には、以下の発明が記載されている。

「ＲＰＥ細胞の単層５と、厚さ約２～４ミクロンのコラーゲン薄層７と、フィブリノーゲンにトロンビンを添加して製造されるフィブリンを含む厚さ約１５０～２５０ミクロンの基質９の積層である、宿主の眼の網膜下領域に移植するための移植片。」（以下「引用発明」という。）

審判請求人は、本願明細書の段落【００１９】、同【００２９】、及び、実施例６の記載に基づき、本願発明に係る網膜移植物は、幹細胞からのＰＲＥの分化のための長寿命の基質として使用し得、強度を有し、網膜下腔への送達後は制御された環境下で迅速に分解し得るフィブリンヒドロゲルを含むものであるという、優れた効果を奏するものであり、そのようなフィブリンヒドロゲルを生成する際のフィブリノーゲン濃度、フィブリンヒドロゲル厚、及び、機械的強度の条件が本願発明に反映されている旨主張する。

しかしながら、引用文献２には、移植片に含まれる基質が、単層に機械的強度を付与しながら、体液又は天然酸性酵素への暴露等により散逸するものであることが記載されるので（上記第４の１(１)エ、オ、キ）、審判請求人が主張する効果は、引用発明、引用文献２の記載事項、及び、引用文献１及び３に記載された事項を含む技術常識から、当業者が予測し得たものといえるし、相違点１及び２として挙げた本願発明の発明特定事項、すなわち、フィブリンヒドロゲル製造時のフィブリノーゲン濃度、フィブリンヒドロゲル厚、機械的強度及び分解時間、のすべてを同時に満たすフィブリンヒドロゲルを含む移植物を得ることが当業者に容易であることは、上記(１)及び(２)にて述べたとおりである。

よって、審判請求人の上記主張は採用できない。