2020-700935

特許第６７０３４７６号発明「スフェロイド細胞培養ウェル製品およびその方法」の特許異議申立事件について、次のとおり決定する。

【結　論】 特許第６７０３４７６号の請求項１、４に係る特許を維持する。

【理　由】 第１　手続の経緯 特許第６７０３４７６号の請求項１～４に係る特許についての出願は、平成２６年　４月２８日（パリ条約による優先権主張　２０１３年１１月２２日　（ＵＳ）アメリカ合衆国、２０１３年　４月３０日　（ＵＳ）アメリカ合衆国）を国際出願日とする出願であって、令和　２年　５月１２日にその特許権の設定登録がされ、令和　２年　６月　３日に特許掲載公報が発行された。その後、その特許の請求項１及び４に対し、令和　２年１２月　２日に特許異議申立人金澤毅は、特許異議の申立てを行った。 第２　特許請求の範囲の記載 特許第６７０３４７６号の請求項１及び４の特許に係る発明は、それぞれ、その特許請求の範囲の請求項１及び４に記載された事項により特定される次のとおりのものであり、請求項１及び４に係る特許発明をそれぞれ、「本件特許発明１」及び「本件特許発明４」といい、まとめて「本件特許発明」ともいう。 「【請求項１】 細胞培養製品において、 チャンバを有するフレームであって、前記チャンバが、 不透明な側壁表面と、 上部開口と、 前記不透明な側壁表面に隣接している、気体透過性で液体不浸透性の透明な底部表面と、 を有している、フレーム、 を備え、前記底部表面の少なくとも一部分が、少なくとも１つの凹状弓形表面を含んでおり、 前記少なくとも１つの凹状弓形表面に、低接着コーティングまたは非接着コーティングをさらに備えていることを特徴とする製品。」 「【請求項４】 前記少なくとも１つの凹状弓形表面が、同じ前記チャンバ内の複数の隣接する凹状弓形表面を含むことを特徴とする請求項１から３いずれか１項記載の製品。」 第３　特許異議申立人が申し立てた申立理由の概要と証拠 １　特許異議申立人が申し立てた申立理由の概要 取消理由１（進歩性欠如）　本件特許の請求項１及び４に係る発明は、甲第１号証に記載された発明及び甲第２号証に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により、特許を受けることができないものである。 取消理由２（明確性要件違反）　本件特許の請求項１及び４に係る発明は発明が明確でないから、本件特許発明に係る特許は、特許法第３６条第６項第２号に規定する要件を満たしていない特許出願に対してされたものである。 ２　特許異議申立人が示した証拠 甲第１号証：国際公開第２０１３／０４２３６０号 甲第２号証：特開平０９－１７３０４９号公報 甲第３号証：特開２００１－１０６７４９号公報 甲第４号証：特開２００６－１２１９９１号公報 甲第５号証：特開２０１２－２４９５４７号公報 甲第６号証：Polymer Handbook, 4th Ed. VI/544-VI/547, VI/568-VI/569 甲第７号証：特開平０９－２３４８１１号公報 甲第８号証：「新訂　最新ポリイミド－基礎と応用」日本ポリイミド・芳香族系高分子研究会編、（初版第一刷）p.369, 表２ 甲第９号証：特許第６７０３４７６号の平成３０年　２月１５日付け（起案日）拒絶理由通知書 甲第１０号証：米国特許出願公開第２０１１／０１２９９２３号明細書 甲第１１号証：独国特許出願公開第１０２００９００５５２６号明細書 甲第１２号証：欧州特許出願公開第０３０７０４８号明細書 甲第１３号証：特許第６７０３４７６号の令和　１年　７月　５日付け手続補正書 以下、「甲第１号証」～「甲第１３号証」を、それぞれ「甲１」～「甲１３」という。 第４　当審の判断 当審は、請求項１及び４に係る特許は、特許異議申立人が申し立てた取消理由によっては、取り消すことはできないと判断する。 理由は以下のとおりである。 １　取消理由１（進歩性欠如）について （１）甲号証の記載 ア　甲１の記載 甲１には以下の記載がある（下線は当審による。以下同様。）。 （ア）「[0006] 　このように、従来の培養方法では、市販されているウェルプレートやフラスコ形状の容器に適用するには限界がある、もしくは、適用できるとしても、スフェロイドの直径を制御することが困難であった。そのため、各種培養容器の形状に適用可能で、かつ、スフェロイドの大きさを制御することによって、均一な直径を有する接着性細胞のスフェロイドを培養できる新たな方法が求められていた。」 （イ）「[0013] 　図１に、本発明の実施形態に係る培養容器の構成例を示す。図２に図１のＩＩ－ＩＩ線に沿った断面図を示す。 培養容器１０は、培養空間１１と、壁１２と、底部１３とを有する。 培養空間１１は、壁１２と底部１３とで仕切られた領域であり、細胞を培養する三次元の空間領域（培養領域）となる。培養空間１１は、単に「空間」または「マイクロ空間」とも称する。 壁１２は、培養空間１１を仕切る隔壁であり、培養容器１０に凹凸パターンを形成する凸部ともいえる。 底部１３は、培養容器１０の基板として機能するとともに、培養空間１１が配置される側の表面は、培養領域（培養表面）の一部となる。 [0014] 　図１，２では、培養容器１０における培養空間１１に関して、相当直径Ｄ、高さＨ、壁１２の幅Ｗ（厚さ）、及び、底部１３の厚さＴを示す。図１，２では、底部１３は、壁１２と一体として作製された場合を示している。…」 （ウ）「[0016] 　図３は、培養プレートのウェル内に本実施形態の培養容器を形成した構成例を説明する概略図である。培養プレート１は、複数のウェル２１が形成され、隣り合うウェル２１同士は仕切り部２２によって隔てられる。各ウェル２１は、培養容器１０に対応し、複数の培養空間１１と壁１２とを含む。 各ウェル２１内、言い換えると、培養容器１０内において、複数の培養空間１１は、図１に示すようにアレイ状に配置される。各ウェル２１に含まれる培養空間１１の数は、培養プレートに作製されるウェル２１の数（ウェル２１の大きさ）と培養空間１１及び壁１２の大きさに依存するものである。図３では、構成を説明するための、培養空間１１の数を少なくして表した概略図であり、各ウェル２１に含まれる培養空間１１の数は実際とは異なる。加えて、図１、２では、９個の培養空間１１を示している。これは説明のために示したものであり、実際の培養容器１０（ウェル２１）に含まれる培養空間１１の数に対応するものではない。」 （エ）「[0018] 　例えば、接着性細胞であるがん細胞を培養する場合を検討する。非特許文献１（Juergen Friedrichら著、"Spheroid-based drug screed: considerations and pracitical approach"、Nature Protocols vol.4 No.3 2009、 pp309-324）によれば、接着性細胞を薬物のスクリーニングに用いる場合、増殖したがん細胞は、小さいものでは２００μｍ、最大のスフェロイドサイズでは、由来する臓器によってさまざまで、１０００μｍ以上に増殖するものもある。加えて、生体内における腫瘍に特徴的な腫瘍中心で起こる二次的な細胞死と類似した現象は、５００μｍ～６００μｍのスフェロイドで見られる。これらから、培養空間１１の相当直径は、２００μｍ～４０００μｍの範囲が好ましく、５００μｍ～３０００μｍの範囲がより好ましい。」 （オ）「[0021] 　図４に、培養空間１１でスフェロイドを培養する状態を表す概略図を示す。図４では、図２に示す断面図を用い、スフェロイド９を、○印で示す。スフェロイド９は、複数の培養空間１１それぞれにおいて培養される。 図３に示す培養プレート１で培養する場合、ウェル２１毎に培養条件の設定、培地の交換等を実施することになる。そのため、各ウェル２１に複数の培養空間１１を形成することが可能であるため、同条件で複数のスフェロイドを培養することが可能になる。加えて、ウェルプレートを用いてスフェロイドを培養することができるため、従来の細胞培養で用いる装置等を利用することが可能になる。 スフェロイド９の直径ＤＳＰを値ｄｓｐ（ｄｓｐは正の数値）とすると、培養空間１１の相当直径Ｄは、値ｄｓｐから値ｄｓｐの５倍の範囲（ｄｓｐ≦Ｄ≦５ｄｓｐ）となる。また、培養空間１１の高さＨは、値ｄｓｐの０．３倍から値ｄｓｐの２５倍（５×５）の範囲（０．３ｄｓｐ≦Ｈ≦２５ｄｓｐ）となる。 [0022] 　培養空間１１の形状（正面の形状）、あるいは、底部１３と平行な面の形状は、図１に示す形状に限定されるものではなく、例えば、図５Ａ～５Ｂに示すような形状であっても、その他の形状（楕円や菱形など）であってもよい。より高密度で均一な直径を有するスフェロイドを形成させるためには、左右対称構造であることが好ましい。 培養空間１１の側面の形状は、図２に示す円柱状に限定されるものではなく、例えば、図６Ａ～６Ｃに示すような形状であってもよい。 [0023] 　培養容器１０を構成する材料としては、アクリル系樹脂、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、スチレン系樹脂、アクリル・スチレン系共重合樹脂、ポリカーボネート系樹脂、ポリエステル系樹脂、ポリビニルアルコール系樹脂、エチレン・ビニルアルコール系共重合樹脂、熱可塑性エラストマー、塩化ビニル系樹脂、及びシリコン樹脂のうちの１つまたはこれらの組み合わせから選択される。 [0024] 　培養容器１０の底部１３の厚さＴは、観察性の観点から、１ｍｍ以下が好ましい。ただし、顕微鏡での観察に支障をきたさない限り、１ｍｍ以上であってもよく、底部１３の厚さＴを限定するものではない。培養容器の底部１３の観察性を確保することにより、培養プレートをそのまま用いて、培養したスフェロイドを観察することが可能になる。」 （カ）「[0027] 　加えて、スフェロイドの形成率を向上させるために、細胞接着性を抑制した方がよい。細胞接着性を抑制するためには、水接触角が４５度以下、好ましくは４０度以下、より好ましくは２０度以下になるような表面を用いることで可能になる。細胞接着性を抑制することと、水接触角との関係については、例えば、非特許文献１（Y Ikada著、"Surface modification of polymers for medical applications"、 Biomaterials 1994, vol.15 No.10, pp725-736）に記載されている。 水接触角を４５度以下にする方法としては、ガラスを培養底面に蒸着する方法、プラズマ処理法を用いて、表面に官能基を形成させる方法が挙げられる。プラズマ処理などにより、表面に官能基を形成させる、または、光や温度により親水・疎水性が制御可能なポリマーをコートする方法を用いることができる。さらに、リン脂質・高分子複合体をコートしてもよい。上述した表面処理を行った後、ポリエチレングリコールやリン脂質－高分子複合体などの親水性ポリマーを固定化しても良い。」 （キ）「[0029] ［実施例１、２、比較例１］ １．培養容器の作製 実施例１，２及び比較例１について、図１，２に示す培養空間１１が規則的に配列している培養容器１０であって、以下の相当直径Ｄ、幅Ｗ、及び高さＨのパターンをフォトリソグラフィにより作製し、Ｎｉ電解メッキを行い、対応する凹凸形状を有する金型を得た。 ・実施例１：Ｄ＝１００μｍ、Ｗ＝２０μｍ、Ｈ＝５０μｍ（Ｈ／Ｄ＝０．５） ・実施例２：Ｄ＝２００μｍ、Ｗ＝２０μｍ、Ｈ＝１００μｍ（Ｈ／Ｄ＝０．５） ・比較例１：Ｄ＝２００μｍ、Ｗ＝２０μｍ、Ｈ＝５０μｍ（Ｈ／Ｄ＝０．２５） 実施例１，２，比較例１は、その金型を用い、ホットエンボス成形によりポリスチレン上に凹凸パターン形状の転写を行い、上記寸法の樹脂基材を作製した。その樹脂基材表面へ真空蒸着により二酸化ケイ素膜を１００ｎｍ形成させたフィルムを作製し、ポリスチレン製の底面のない２４穴プレートに、レーザ溶着法でフィルムを貼り付けた後、γ線滅菌を行った。このようにして、各ウェルに複数の培養空間１１を有する培養容器１０を形成した２４ウェルの培養プレートを作製した。…」 （ク）「[0036] ［実施例３］ １．培養容器の作製 図１，２に示す培養空間１１が規則的に配列している培養容器１０であって、以下の相当直径Ｄ、幅Ｗ、及び高さＨのパターンをフォトリソグラフィにより作製し、Ｎｉ電解メッキを行い、対応する凹凸形状を有する金型を得た。 Ｄ＝２００μｍ、Ｗ＝２００μｍ、Ｈ＝１００μｍ（Ｈ／Ｄ＝０．５） 実施例３では、この金型と９６穴プレートとを用いたことを除いて、実施例１，２と同様の方法で培養プレートを作製し、９６ウェルの培養プレートを得た。 [0037] ２．細胞培養及び観察 全ての培養プレートのウェルに、培養表面をマイクロ波プラズマ処理の後、燐酸緩衝液で洗浄した後、０．０１ｖｏｌ％ＭＰＣ溶液でコートした。クリーンベンチ内で室温下にて２４時間放置しＭＰＣ溶液を乾燥させた。 細胞は、ＨｅｐＧ２を用いた。 培地は１０ｖｏｌ％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ培養液を用いた。培養方法は、実施例１，２と同様である。 [0038] 　図１１に実施例３の結果を示す。図１１の写真に示すように、ＨｅｐＧ２を培養した場合にも培養容器１０内にスフェロイドが形成されていることが観察される。」 （ケ）「 」（図２） （コ）「 」（図３） （サ）「 」（図６Ａ） イ　甲２の記載 甲２には、以下の記載がある。 （ア）「【０００４】　しかし、光学的に透明性が高い材質からなる従来のマルチプレートを用いて組織培養、細胞培養を行った場合、容器内で培養された組織、細胞を顕微鏡を用いて観察を行うと同時に、組織、細胞もしくは培養液中に含まれている極微量物質の含有量を測定するため、前述の発光現象を利用した定量分析方法を行うと、隣接する容器より放出される光は容器を通過して測定を行う容器に侵入し散乱して該容器の発光量の測定に影響する。そのため、測定に必要な容器の内容物を発光量の測定に支障のない他のマルチプレートの容器に移し変えて発光量の測定を行う必要があった。」 （イ）「【０００６】 【発明が解決しようとする課題】本発明は、組織や細胞の培養で発光現象を利用した観察や測定分析におけるこのような問題点を解決しようとしたもので、その目的とするところは、複数個の容器が一体となったもしくは組み合わされた容器の集合体を用いて、顕微鏡で培養されている組織、細胞の観察を行うとともに、隣接した他の容器が放出する光の影響を受けずに組織、細胞もしくは培養液中に含まれている極微量物質の含有量を発光現象を利用した定量分析方法が行える培養用容器を提供することにある。 【０００７】 【課題を解決するための手段】即ち本発明は、発光現象を用いた標識物質の測定と、顕微鏡観察を可能にするために、容器の側壁を構成する部材、あるいは容器の側壁の外側または内側を被覆する部材が不透明であり、かつ該容器の底部を構成する部材が透明であることを特徴とする培養用容器である。」 ウ　甲４の記載 甲４には以下の記載がある。 （ア）「【００４３】 また、例えば、合成された細胞非接着性物質としては、ポリエチレングリコール等の極めて高い親水性を示す高分子や、ＭＰＣ（２－メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン）、ｐｏｌｙ―ＨＥＭＡ（ポリヒドロキシエチルメタクリレート）、ＳＰＣ（セグメント化ポリウレタン）等を用いることができ、これらの誘導体としては、当該細胞非接着性物質に任意の官能基や高分子等を結合させたものを用いることができる。 【００４４】 これら生体から取得され若しくは合成された細胞非接着性物質又はこれらの誘導体は、例えば、当該細胞非接着性物質等の水溶液を底面２０上で乾燥させることにより、又は当該細胞非接着性物質等の水溶液中において、当該細胞非接着性物質等が有する官能基と底面２０上の官能基との間で化学反応を起こさせて共有結合を形成させること等により、当該底面２０上に固定化することができる。」 エ　甲５の記載 甲５には以下の記載がある。 （ア）「【００５９】 本発明の細胞培養用基材においては、表面処理によって、細胞接着性を調節することも出来る。　一般的に、足場依存性の細胞は親水性表面に接着しやすく、疎水性表面には接着しにくい性質を有する。　従って、細胞接着性を調節する方法としては、例えば、紫外線、電子線、ガンマ線、プラズマなどの照射など各種公知の表面改質技術を適宜用いて培養基材表面に－Ｏ－や－ＯＨ基といった官能基を設け、極性を調節することによって行うことが出来る。　また、細胞培養用基材の表面に細胞接着性を上げる物質や下げる物質を塗布することによって細胞接着性を調節することが出来る。　細胞接着性を高める物質としては、各種コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニン、エラスチン等の細胞外マトリックスを構成するプロテオグリカン類、二酸化ケイ素、或いはポリリジンなどを用いることが出来、フッ素樹脂、シリコーン樹脂、２－メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）を含有する（共）重合体、寒天等を用いることにより細胞接着性を下げることができる。」 オ　甲６の記載 甲６には以下の記載がある（翻訳は当審による。以下同様。）。 （ア）「この本において与えられている透過係数の好ましいＳＩ単位は であり、ここで、（２７３．１５Ｋ；１．０１３×１０５Ｐａ）は標準の温度と圧力を意味する。したがって、この論文において与えられている透過係数はほとんどのポリマー及び浸透物において、１０－１１－１０－１６ｃｍ３×ｃｍ／ｃｍ２×ｓ×Ｐａである。」（第ＶＩ／５４４頁右側欄第１７行－第２７行） （イ）「表１　ポリマーの透過係数、拡散係数及び溶解係数 表における単位は以下のとおり；Ｐ…はｃｍ３（２７３．１５Ｋ；１．０１３×１０５Ｐａ）×ｃｍ／ｃｍ２×ｓ×Ｐａ）；…；（２７３．１５Ｋ；１．０１３×１０５Ｐａ）は標準温度及び標準圧力（ＳＴＰ）を意味する。 … ポリマー　　　…　　Ｐ（×１０１３）… … １．２　ポリ（スチレン） ポリ（スチレン）　…　１．９　…」（第ＶＩ／５４５頁表１の表題及び注釈、第ＶＩ／５４７頁下から第２８行－第２７行） カ　甲７の記載 甲７には以下の記載がある。 （ア）「【００３３】ここで、典型的な非極性高分子であるポリプロピレンと酸素透過性の比較的高いポリメチルペンテンを用いて無孔質の酸素透過性層Ｃを構成したケースについて試算してみる。 １）ポリプロピレン：酸素透過係数Ｐ＝　１．７×１０－１３　［ｃｍ３・ｃｍ／ｃｍ２　・ｓｅｃ　・Ｐａ］（３０℃）（ＰｏｌｙｍｅｒＨａｎｄｂｏｏｋ，　２ｎｄ　Ｅｄ．　ＩＩＩ－２３５．　Ｊ．Ｂｒａｎｄｒｕｐ　ａｎｄ　Ｅ．Ｈ．Ｉｍｍｅｒｇｕｔ，　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｌｙ　＆　Ｓｏｎｓ（１９７５）　、単位は変換）厚さＸ＞１０μｍ　においては、Ｐ／Ｘ＜１．７　×１０－１７　［ｃｍ３　／ｃｍ２　・ｓｅｃ　・Ｐａ］の範囲であれば適用可能である。典型的な対象として、Ｖａ　／Ａ＝１ｃｍ３／ｃｍ２　、ｔ＝１ｄａｙ　の場合には、同様の計算より、厚さＸ＝３μｍ　の薄さが必要となる。この厚さの無孔質層は、強度面からはほぼ限界にあるが、所要脱酸素時間を考慮すれば、層厚を厚くできるので、ポリプロピレンが使用できることが判る。」 キ　甲８の記載 甲８には以下の記載がある。 （ア）「表２　代表的な高分子均質材料の酸素（Ｐ（Ｏ２））、二酸化炭素（Ｐ（ＣＯ２））および水蒸気（Ｐ（Ｈ２Ｏ））の透過係数＊ … 高分子名　…　Ｐ（Ｏ２）… … ポリスチレン　…　２．６　… … ＊透過係数の単位：×１０－１０ｃｍ３（ＳＴＰ）ｃｍ／ｃｍ２・ｓ・ｃｍＨｇ）」（第３６９頁右側欄、表２） ク　甲１０の記載 甲１０には以下の記載がある。 （ア）「[0012]　気体交換の唯一の場としての気体／液体界面を排除する細胞培養装置が提案されており、市場に投入された。このアプローチは、培地の底で気体交換を行うために、より低い気体透過性膜の使用に頼っている。気体／液体界面のみに依存するのとは対照的に、より多くの気体移動を可能にする。…」 （イ）「[0101]　図８はマルチウェルフォーマットで構成された気体透過性細胞培養デバイスの実施形態であり、従来のマルチウェル組織培養デバイスと比較して、容積当たりの培地を増やすことができ、それによって、１ウェル当たりの細胞数を増加させ、培地の供給頻度を低減することによってより効率的な研究規模を可能とし、良好なクローン選択可能性を可能にする。」 （ウ）「[0137]　図８は、各ウェルの底部がガス透過性である、気体透過性の複数ウェルプレート１５の実施形態を示している。下方の気体透過性材料３０Ａの特性は、図４Ａの実施形態に記載されたものと同じである。６ウェルプレートが示されているが、６，２４，４８および９６ウェルの従来のフォーマットを含む、任意の数の個々のウェル４５が存在することができる。壁４０Ｅは、培地が存在する下方の気体透過性材料３０Ａより上の高さが従来の複数ウェルプレートの壁よりも高くできるように構成され、それにより、従来の複数ウェルプレートと比較してフットプリントを低減しながら、各ウェルに存在できる細胞の数を増やす。例えば、マウスハイブリドーマ細胞は、典型的には、培地１ｍｌあたり１×１０６細胞の密度で存在することができる。ウェルの直径が８．６ｍｍ、培地の高さが２ｍｍの場合、０．１２ｍｌの培地が存在し、ウェルあたり約０．１２×１０６の細胞が存在する。しかし、壁を高くすることによって１ｍｌの培地をウェル内に入れることができれば、ウェルあたり約５倍の細胞（すなわち、１×１０６細胞／ｍｌ）をサポートするのに十分な培地が存在し得る。多くの細胞が、表面積が０．５８ｃｍ２（つまり、直径８．６ｍｍ）の気体透過性材料上に存在し得る。実施例１は、１×１０６を超えるマウスハイブリドーマ細胞が、培地の体積に応じて、このサイズの表面積に存在し得ることを実証している。より多くの培地がより多くの細胞をサポートできるだけでなく、供給頻度を減らし、蒸発が培地組成を変える速度を減らすことができる。」 （エ）「 」（図８） （２）甲１発明に基づく進歩性欠如について ア　甲１発明の認定 （ア）　甲１には、（１）ア（ア）、（イ）及び（ケ）から、培養プレートには培養空間である複数のウェルが形成され、隣り合うウェル同士が仕切り部によって隔てられること、が記載されているといえる。 （イ）　甲１には、（１）ア（ウ）及び（コ）から、上記の各ウェルは複数の培養空間と壁とを含むこと、が記載されているといえる。 （ウ）　甲１には、（１）ア（ケ）から、上記の各ウェルが上部に開口を有すること、及び、上記の各ウェルは仕切り部の表面に隣接して底部を有し、当該底部に複数の培養空間と壁とを有すること、が記載されているといえる。 （エ）　甲１には、（１）ア（オ）及び（サ）から、上記の各培養空間の底の形状が平面でも凹状弓型表面でも良いことが記載されているといえる。 （オ）　甲１には、（１）ア（ク）から、上記の培養プレートのウェル表面を０．０１ｖｏｌ％ＭＰＣ溶液でコートしたことが記載されているといえる。 （カ）　したがって、甲１には以下の発明が記載されているといえる（以下、「甲１発明」という。）。 「複数のウェルを有する培養プレートであって、 前記ウェルは 仕切り部と、 上部開口と、 仕切り部の表面に隣接している底部と、 を有しており、 前記底部が、底の形状が凹状弓型である培養空間を含んでおり、 ウェル表面がＭＰＣによるコーティングをさらに備えていることを特徴とする、培養プレート。」 イ　本件特許発明１についての判断 （ア）本件特許発明１と甲１発明との対比 甲１発明における「培養プレート」、「ウェル」、「仕切り部」は、それぞれ、本件特許発明における「フレーム」、「チャンバ」、「側壁」に相当する。 甲１発明における「底部が、底の形状が凹状弓型である培養空間を含んで」いることは、本件特許発明における「底部表面の少なくとも一部分が、少なくとも１つの凹状弓形表面を含んで」いることに相当する。 甲１発明における「ウェル表面がＭＰＣによるコーティングをさらに備えていること」は、ウェル表面にコーティングされているのであればウェルの一部を構成する凹状弓形表面もコーティングされていると認められること、及び、ＭＰＣは（１）ウ及びエの甲４及び甲５の記載から細胞の接着性を下げる物質であるといえることから、本件特許発明における「少なくとも１つの凹状弓形表面に、低接着コーティングまたは非接着コーティングをさらに備えている」に相当する。 （１）ア（オ）の［００２４］に記載されているとおり、甲１発明では顕微鏡による観察を底部から行うとされていることから培養プレートの底部は透明であると認められ、また、（１）ア（キ）に記載されているとおり、甲１発明はポリスチレン樹脂機材にホットエンボス成形をしてポリスチレン上に凹凸パターン形状の転写を行ってウェルを形成して培養プレートが製造されているから、底部と仕切り部は一体成形されており、甲１発明の培養プレートは仕切り部も含めて全体が透明であると認められる。 （１）ア（ク）から、甲１発明の培養プレートにＤＭＥＭ培養液と細胞を入れて培養を行っているから、甲１発明は「細胞培養製品」であり、また、甲１発明の底部は、培養液が保持されているものであるから、液体不浸透性であると認められる。 以上から、本件特許発明１と甲１発明とは、 「細胞培養製品において、 チャンバを有するフレームであって、前記チャンバが、 側壁表面と、 上部開口と、 前記側壁表面に隣接している、液体不浸透性の透明な底部表面と、 を有している、フレーム、 を備え、前記底部表面の少なくとも一部分が、少なくとも１つの凹状弓形表面を含んでおり、 前記少なくとも１つの凹状弓形表面に、低接着コーティングまたは非接着コーティングをさらに備えていることを特徴とする製品。」である点で一致し、以下の点で相違する。 （相違点１）側壁表面が、本件特許発明１は不透明であるのに対し、甲１発明は透明である点。 （相違点２）底部表面が、本件特許発明１は気体透過性であるのに対し、甲１発明は気体透過性であるか否か不明である点。 （イ）本件特許発明１についての判断 まず、相違点１について検討する。 （１）イ（ア）及び（イ）にあるとおり、「光学的に透明性が高い材質からなる従来のマルチプレートを用いて組織培養、細胞培養を行った場合、容器内で培養された組織、細胞を顕微鏡を用いて観察を行うと同時に、組織、細胞もしくは培養液中に含まれている極微量物質の含有量を測定するため、前述の発光現象を利用した定量分析方法を行うと、隣接する容器より放出される光は容器を通過して測定を行う容器に侵入し散乱して該容器の発光量の測定に影響」するために、側壁を不透明とすることが、甲２には記載されている。 しかしながら、（１）ア（ア）に摘記したように、甲１発明は、「各種培養容器の形状に適用可能で、かつ、スフェロイドの大きさを制御することによって、均一な直径を有する接着性細胞のスフェロイドを培養できる」方法を提供することを課題とするものであって、甲１の記載からは、甲１発明が底部を介した顕微鏡による観察と同時に、甲１には何らの記載もされていない発光評価・蛍光評価を行う際の課題を当業者が解決すべきものとして認識していたとまでいえないから、ホットエンボス加工により透明素材で一体成形されている甲１発明を、わざわざその側壁表面を不透明とする動機付けは見出せない。 したがって、上記甲２の記載を踏まえても、甲１発明においてその側壁表面を不透明とすることは当業者が容易に想到し得たことではない。 したがって、その余の相違点について検討するまでもなく、本件特許発明１は、甲１発明及び甲２に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。 ウ　本件特許発明４についての判断 本件特許発明４は、本件特許発明１の発明特定事項を全て含み、それをさらに限定したものである。 したがって、本件特許発明４と甲１発明との間には、上記イ（ア）で検討した相違点１と同じ相違点があり、当該相違点は、上記イ（イ）で検討したとおりであるから、本件特許発明４は、甲１発明及び甲２に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。 （３）小括 以上のとおり、本件特許発明１及び４が甲１発明及び甲２に記載された事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえないから、取消理由１は理由がない。 ２　取消理由２（明確性要件違反）について （１）特許異議申立人の主張の概要 請求項１の「気体透過性」はどの程度の気体透過性であれば、気体透過性を有する底部表面といえるのか、発明の外延が不明確であるから、請求項１及び４に係る発明は不明確であり、本件特許発明１及び４に係る特許は、特許法第３６条第６項第２号に規定する要件を満たしていない特許出願に対してされたものである。 （２）当審の判断 本件特許明細書には以下の記載がある。 ア　「【0029】 不透明な側壁と透明な窓を有する気体透過性丸底ウェルとを含むウェルプレートが提供し得る著しい利点としては、…所与の壁厚で気体透過特性を有するポリマーから作製されたウェル底部で、スフェロイドが優れた酸素供給を受けることができることが挙げられる。スフェロイド培養物内の細胞の、酸素の利用可能性が増加すると、肝細胞など酸素需要が高い細胞にとって特に有用である。」 イ　「【0068】 …パーフルオロポリマーまたはポリ４－メチルペンテンなどのポリマーは、成形プロセスで通常用いられる厚さで気体透過性も提供し、この気体透過性は代謝的に活性な細胞型にとって有益になり得る。気体透過性ポリマーの代表的な厚さおよび範囲は、中間の値および範囲を含め例えば約０．００１インチ（２５．４μｍ）から約０．０２５インチ（６３５μｍ）、０．００１５インチ（３８．１μｍ）から約０．０３インチ（７６２μｍ）とすることができる（ここで１インチ＝２５，４００μｍ、すなわち０．００００３９インチ＝１μｍ）。さらにまたは代わりに、ポリジメチルシロキサンポリマーなどの高気体透過性を有する他の材料が、例えば約１インチ（２．５４ｃｍ）までの厚さで十分な気体拡散を提供し得る。」 上記の記載から、本件特許発明において底部表面を気体透過性とする目的が、代謝的に活性な細胞が底部から酸素供給を受けるためであることは、明らかである。 とすれば、本件特許発明における「気体透過性」とは、培養を行う代謝的に活性な細胞が代謝を行うために十分な酸素が底部から供給できる程度の気体透過性を意味することは明らかであり、その程度も当業者であれば自ずと理解可能である。 したがって、本件特許発明１において、「気体透過性」の底部表面を有する細胞培養製品が不明確であるということはできない。本件特許発明１の特定と同じ特定を有する本件特許発明４についても同様である。 （３）小括 以上のとおり、本件特許発明１及び４が不明確であるということはできないから、取消理由２は理由がない。 第５　むすび したがって、特許異議の申立ての理由によっては、請求項１及び４に係る特許を取り消すことはできない。 また、他に請求項１及び４に係る特許を取り消すべき理由を発見しない。 よって、結論のとおり決定する。