2016-015103

特願２０１４－２６２０５６「アルファ２，３－およびアルファ２，６－シアリル化を含む組換えＦＳＨ」拒絶査定不服審判事件〔平成２７年　７月　２日出願公開、特開２０１５－１２０６９６〕について、次のとおり審決する。

【結　論】 本件審判の請求は、成り立たない。

【理　由】 第１　手続の経緯 本願は、２００９年（平成２１年）４月１６日（パリ条約による優先権主張外国庁受理　２００８年４月１６日　米国、２００８年４月２５日　欧州特許庁）を国際出願日とする出願の一部を平成２６年１２月２５日に新たな特許出願としたものであって、その手続の経緯は以下のとおりである。 平成２７年１１月１８日付け：拒絶理由通知書 平成２８年　２月２２日　　：意見書の提出 平成２８年　６月　３日付け：拒絶査定 平成２８年１０月　７日　　：審判請求書、手続補正書の提出 平成２９年１１月　２日付け：拒絶理由通知書 平成３０年　５月　２日　　：意見書の提出 第２　本願発明 本願の請求項１～１０に係る発明は、平成２８年１０月７日にされた手続補正により補正された特許請求の範囲の請求項１～１０に記載された事項により特定されるものであるところ、その請求項１に係る発明（以下「本願発明」という。）は、その請求項１に記載された事項により特定される、次のとおりのものである。 「【請求項１】 α２，３－およびα２，６－シアリル化を含む組換えＦＳＨ（ｒＦＳＨ）であって、総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である、組換えＦＳＨ。」 第３　当審の拒絶理由通知書の概要 平成２９年１１月２日付けで当審が通知した拒絶理由（以下「当審拒理」という。）は、本願発明は、本願の優先権主張の日（以下「優先日」という。）前に日本国内または外国において、頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった下記の引例１～７に記載された事項に基づいて、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない、というものである。 引例１：特表２００５－５１５９７４号公報 引例２：特表２００１－５０７２１５号公報 引例３：J. Clin. Endocrinol. Metab., 1994年, Vol.79, No.3, p.756-760 引例４：Cytotechnology, 1996年, Vol.21, No.2, p.171-182 引例５：再公表特許第９９／１１６６５号 引例６：Glycoconjugate Journal, 2000年, Vol.17, No.12, p.895-904 引例７：Biochimica et Biophysica Acta, 2000年, Vol.1474, No.3, p.273-282 第４　引用文献の記載事項及び引用発明 １　引用文献の記載 （１）引例１ 当審拒理で「引例１」として引用した特表２００５－５１５９７４号公報（以下「引例１」という。）には、以下の事項が記載されている。 （１－ア）「本発明は、高い程度のシアル酸付加を有し、有効性の増加した、ＦＳＨ調製物を提供する。」（要約） （１－イ）「驚くべきことに、発明者らは高度にシアル酸付加されたＦＳＨイソフォームが、よりシアル酸付加の少ないイソフォームよりもヒト患者における卵胞形成の刺激において高い有効性を有することを発見した。・・・」（段落【００３８】） （１－ウ）「本発明のすべての実施態様において、組換えＦＳＨが好ましい。ヒト患者の治療のためには、組換えヒトＦＳＨが好ましい。本発明の調製物は慣用の組換えＦＳＨから単離されることができ、又はＦＳＨｇｌｙ＋調製物から単離されることができる。」（段落【００５７】） （１－エ）「発明者らが“シアリルブースティング”と呼ぶ方法を用いてシアル酸含量を濃縮する方法を提供することも、本発明の側面である。組換えＦＳＨ（好ましい）又は組換えＦＳＨｇｌｙ＋調製物（これも好ましい）或いは尿中ＦＳＨが、例えばＰＣＴ国際特許出願公開第ＷＯ９８／３１８２６号（Cytel Corporation）中に記載されたＣＭＰ－シアル酸のようなシアル酸供与体の存在下で、グリコシルトランスフェラーゼ、特別にはシアリルトランスフェラーゼのような酵素で処理することによってシアリルブースティングに供されることができる。・・・」（段落【００５８】） （１－オ）「・・・使用されることのできるシアリルトランスフェラーゼの例は、ST3Gal IIIであり、これはまた、（２，３）－シアリルトランスフェラーゼ（EC2.4.99.6）と呼ばれる。・・・好ましい実施態様において、シアル酸付加法はST3Gal III（好ましくはラット由来）、ST3Gal IV、ST3Gal I、ST6Gal I、ST3Gal V、ST6Gal II、ST6GalNAc I、又はST6GalNAc II、より好ましくはST3Gal III、ST6Gal I、ST3Gal IV、ST6Gal II又はST3Gal V、より特別に好ましくはラット由来のST3Gal IIIを使用する。」（段落【００５９】） （１－カ）「シアリルトランスフェラーゼをコードしている、細胞中で発現可能な遺伝子で、ＦＳＨを発現している、組換えの又はそうでない細胞をトランスフェクトすることによって、酸性イソフォームが濃縮されたＦＳＨを製造することも可能である。上記遺伝子はゲノムのコード配列（すなわち、イントロンとともに）を含むことができ、又はｃＤＮＡコード配列を含むことができる。代わりに、上記細胞のゲノムがシアリルトランスフェラーゼをコードしている内因性の配列を含む場合、ＦＳＨの発現を引き起こす構築物が細胞のゲノム中に挿入されることができる。・・・」（段落【００６１】） （１－キ）「ＦＳＨ調製物のシアル酸付加の程度もまた、シアル酸付加に好都合であることが知られている組換えＦＳＨの発現のための細胞を選択することによって増加されることができる。そのような細胞は、高レベルのシアリルトランスフェラーゼを発現する、選択された下垂体細胞及びチャイニーズハムスター卵巣の細胞を含む。・・・」（段落【００６２】） （１－ク）「実施例６ シアリルトランスフェラーゼによる“シアリルブースティング” 組換えヒトＦＳＨ（“出発物質”；１０ｍｇ）を４．３ｍｇ／ｍｌの濃度で緩衝液（０．１Ｍ　ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５）に溶解した。この溶液へ、１００ｍＵ／ｍｌの濃度となるまで組換えラットシアリルトランスフェラーゼ（ST3Gal III）を添加し、そしてシアル酸供与体としてシチジン－５’－モノホスフェート－Ｎ－アセチルノイラミン酸（ＣＭＰ－ＮｅｕＡｃ）を２０ｍＭの濃度で添加する。・・・反応を３７℃で２４時間インキュベートする。実施例３に記載の技術を用いてシアル酸が濃縮された分画を単離する。」（段落【０１１９】） （１－ケ）「ＣＨＯ又はＨＥＫ２９３細胞中で発現されたＦＳＨ突然変異体調製物を実施例６に記載のとおりに、シアリルブースティングに供した。・・・」（段落【０１３１】） （２）引例２ 当審拒理で「引例２」として引用した特表２００１－５０７２１５号公報（以下「引例２」という。）には、以下の事項が記載されている。 （２－ア）「組み換え体糖タンパク質が、所望のグリコシル化パターンを生じさせるグリコシル化機構の適切な補助物質を有しない細胞中において産生されるときに、このような非最適化シアリル化パターンが生じることがある。・・・最適なシアリル化パターンの利点は、例えば、清掃速度の減少による糖タンパク質の治療的半減期の増加を含む。シアリル化パターンの変更は外来タンパク質における抗原決定基をマスクすることもでき、それにより、タンパク質に対する免疫応答を抑制しまたは排除することができる。糖タンパク質が結合した糖のシアリル化の変更は変更されたオリゴ糖に特異的な細胞表面レセプターにタンパク質を標的とするために、または、未変更の糖に特異的なレセプターに対する標的をブロックするために用いることもできる。 ・・・本発明の方法を用いた組み換え発現および次の修飾のために注目されるポリペプチドはα１－アンチトリプシン、エリスロポエチン、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、アンチトロンビンＩＩＩ、インターロイキン６、インターフェロンβ、プロテインＣ、フィブリノゲン等を含む。ポリペプチドのこのリストは例示であり、排他的なものではない。」（１５頁１７行～１６頁１２行） （２－イ）「本発明は、α２，６Ｇａｌ結合及びα２，３Ｇａｌ結合でシアル酸を加えることにより糖タンパク質のシアリル化パターンを変える方法も提供する。α２，６Ｇａｌ結合及びα２，３Ｇａｌ結合の両方は、ヒト血漿糖タンパク質の窒素に結合しているオリゴ糖上に存在する。この態様において、ST3Gal III及びST6Gal Iシアリルトランスフェラーゼはともにこの反応において存在し、再シアリル化反応において形成される２つの結合を再現性のある比率で有するタンパク質を提供する。例えば、最終生成物において両方の結合が望ましい場合には、２種の酵素の混合物が有用な場合がある。」（２０頁下から４行～２１頁４行） （３）引例３ 当審拒理で「引例３」として引用した「J. Clin. Endocrinol. Metab., 1994年, Vol.79, No.3, p.756-760」（以下「引例３」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。 （３－ア）「ＦＳＨは、シアル酸含量の異なる４種類のアスパラギン結合オリゴ糖を有するため、ＦＳＨは単一の分子ではなく、アイソフォームの混成群である。・・・組換えｈＦＳＨはこれまでＣＨＯ細胞で生産されており、下垂体ＦＳＨ標準及び精製した尿ＦＳＨの両方と類似のアイソフォームプロフィールを有している。しかしながら、これらのＦＳＨ調製物は、循環において観察されるＦＳＨアイソフォームの全スペクトルを含んでいない。グリコシル化のパターンが異なる細胞株における組換えｈＦＳＨの製造は、アイソフォームプロフィールを広げ、潜在的にはその生物学的活性を変化させる可能性がある。」（７５６頁要約左欄１～１２行） （４）引例４ 当審拒理で「引例４」として引用した「Cytotechnology, 1996年, Vol.21, No.2, p.171-182」（以下「引例４」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。 （４－ア）「α２，６及びα２，３シアル酸結合の発現は、Ｓｐ２／０細胞が、ＣＭＰ　ＮｅｕＡｃ：Ｇａｌβ１－４ＧｌｃＮＡｃ　α２，６及びＣＭＰ　ＮｅｕＡｃ：Ｇａｌβ１－４ＧｌｃＮＡｃ　α２，３シアリルランスフェラーゼを含むことを示している。シアル酸残基は、肝臓のクリアランスからの保護だけではなく、分子の立体配置の安定性にも寄与している可能性がある。たとえば、アシアロエリスロポエチンは、熱変性及びトリプシン消化に敏感であることが分かっている（Ｂｒｉｇｇｓ等、１９７４年）。α２，６結合シアル酸と比較したα２，３結合の機能的な重要性は現時点で判明していないものの、シアル酸結合の差異が生物活性を決定する上で重要な役割を果たす可能性がある。」（１７９頁右欄下から２行～１８０頁左欄１２行） （５）引例５ 当審拒理で「引例５」として引用した再公表特許第９９／１１６６５号（以下「引例５」という。）には、以下の事項が記載されている。 （５－ア）「本来ＣＨＯ細胞はα２，６－シアリルトランスフェラーゼ活性を有していないが・・・、これにＬｅｅ，Ｅ．Ｊ．ら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４巻，１３８４８～１３８５５頁，（１９８９））の方法にあるように強力なプロモーター下に配したα２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入することによって、本来細胞の有するα２，３－シアリルトランスフェラーゼ活性と競合することによってその量的優位性によってα２，６結合型シアル酸がα２，３結合型シアル酸と同一分子上に、あるいは優位に付加されたＴＰＯが産生されることになる。・・・ ・・・このように、本発明はまた、ＣＨＯ細胞にα２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入し、該ＣＨＯ細胞においてヒトＴＰＯ遺伝子を発現させることを含む、少なくともα２，６結合型シアル酸の糖鎖構造をもつヒトＴＰＯの製造方法を提供する。さらに本発明は、ＣＨＯ細胞においてヒトＴＰＯ遺伝子を発現させ、該ＣＨＯ細胞に、α２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入することを含む、少なくともα２，６結合型シアル酸の糖鎖構造をもつヒトＴＰＯの製造方法を提供する。」（１５頁６行～１６頁１３行） （６）引例６ 当審拒理で「引例６」として引用した「Glycoconjugate Journal, 2000年, Vol.17, No.12, p.895-904」（以下「引例６」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。 （６－ア）「本研究において、我々は、シアリル化の度合いを増加し、シアル酸の結合に関するシアリルトランスフェラーゼの種類による影響を調査するため、ネズミＧａｌβ１－３／４ＧｌｃＮＡｃ－Ｒ　α２，３－シアリルトランスフェラーゼ（ST3Gal IV）及びラットＧａｌβ１－４ＧｌｃＮＡｃ－Ｒ　α２，６－シアリルトランスフェラーゼ（ST6Gal I）のｃＤＮＡをＩＭ４／Ｖｈ細胞に導入した。・・・我々は、異なるレベルのα２，３－ＳＴ及び／またはα２，６－ＳＴを発現する４つのクローンを単離した。ＩＭ４／Ｖｈクローン由来のｈＩＦＮ－γのシアリル化の度合いは６１．２％であり、これは全てのＳＴ形質転換体において約８０％の増加であった。過剰発現されたＳＴの種類と無関係に増加が生じ、また、α２，３－とα２，６－シアル酸の比率は、α２，３－ＳＴのα２，６－ＳＴに対する割合に対応していた。」（８９５頁要約６～１３行） （６－イ）「さらに、ＣＨＯ由来糖タンパク質は、シアル酸結合の型について、ヒト由来糖タンパク質と著しく相違する。天然のヒト糖タンパク質は、通常、α２，６－及びα２，３－結合の両方にシアル酸を含むが、ＣＨＯ細胞では、α２，６－シアリルトランスフェラーゼ（α２，６－ＳＴ）遺伝子の機能的コピーを欠損しているため、ＣＨＯ由来糖タンパク質は、α２，３－結合のシアル酸のみを含む。」（８９６頁左欄１０～１６行） （６－ウ）「ｈＩＦＮ－γを産生する２つのＣＨＯ細胞株、ＩＭ４及びＩＭ４／Ｖｈを用いて実験を行った。」（８９６頁右欄３４～３５行） （６－エ）「結論として、我々は、２種類のＳＴを過剰発現することによって、ＣＨＯ細胞におけるシアリル化が増加することを示した。α２，３－ＳＴのα２，６－ＳＴに対する活性の割合がα２，３－及びα２，６－シアル酸の比率に直接的に影響を与えることが明らかとなった。α２，３－及びα２，６－シアル酸の所望の比率を生産するＣＨＯクローンは、より自然なグリコシル化タンパク質を生産するものであるが、論理的にはα２，３－ＳＴのα２，６－ＳＴに対する活性の割合を変更することによって得ることができる。」（９０３頁左欄９～１６行） （７）引例７ 当審拒理で「引例７」として引用された「Biochimica et Biophysica Acta, 2000年, Vol.1474, No.3, p.273-282」（以下「引例７」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。 （７－ア）「ＣＨＯ細胞はグリコシル化された組換えタンパク質の生産のために広く用いられている。我々のグループは、他のグループと同様、α２，６－シアリルトランスフェラーゼ（α２，６－ＳＴ）のｃＤＮＡを形質転換することによって、ＣＨＯ細胞のシアリル化の欠点を修正可能なことを示した。そのようなＣＨＯ細胞によって生産された糖タンパク質は、ヒトの糖タンパク質と同様、α２，６－及びα２，３－の両方の結合末端のシアル酸残基を示す。」（２７４頁要約１～３行） （７－イ）「３．７　組換えＩＦＮ－γのシアリル化パターン、生物学的活性、及び、体内でのクリアランス クローン５４（α２，６－ＳＴ＋）から精製されたＩＦＮ－γのシアル酸配置は、α２，６結合のシアル酸が４０．４％、α２，３結合のシアル酸が５９．６％であった。反対にクローン４３（α２，６－ＳＴ－）由来のＩＦＮ－γのは予想どおりα２，３結合のみを示した。」（２７８頁右欄１行～２７９頁左欄４行） ２　引用発明 摘記事項（１－ア）～（１－カ）及び（１－ク）からみて、引例１には、シアリルトランスフェラーゼを用いたシアリルブースティングによって高度にシアル酸が付加され、有効性の増加した組換えヒトＦＳＨが記載されている。 ここで、組換えヒトＦＳＨはこれまでＣＨＯ細胞で生産されているといえるところ（摘記事項（３－ア））、ＣＨＯ細胞はα２，６－シアリルトランスフェラーゼ活性を有さない（摘記事項（５－ア）、（６－イ））。そして、摘記事項（１－キ）及び（１－ケ）からみて、引例１には、組換えＦＳＨの発現にＣＨＯ細胞を用いることが記載されており、また、摘記事項（１－ク）からみて、引例１には、組換えヒトＦＳＨのシアリルブースティングの実施例として、ST3Gal IIIを用いたシアリル化、すなわち、α２，３－シアリル化が記載されている。 以上からみて、引例１に記載された、高度にシアル酸が付加され、有効性の増加した組換えヒトＦＳＨは、α２，６－シアリルトランスフェラーゼ活性を有さないＣＨＯ細胞で生産された組換えヒトＦＳＨ、すなわち、α２，３－シアリル化は含むものの、α２，６－シアリル化は含まない組換えヒトＦＳＨに対して、さらなるα２，３－シアリル化を行ったものであると解される。 したがって、引例１には、次の発明（以下「引用発明」という。）が記載されていると認められる。 「α２，３－シアリル化は含むものの、α２，６－シアリル化は含まない組換えヒトＦＳＨに対して、さらなるα２，３－シアリル化を行った組換えヒトＦＳＨ」 第５　対比、判断 （１）対比 本願発明と引用発明とを対比する。 本願発明と引用発明とは、「シアリル化を含む組換えＦＳＨ（ｒＦＳＨ）」である点で一致する。 一方、「組換えＦＳＨ（ｒＦＳＨ）」（以下、単に「組換えＦＳＨ」という。）について、本願発明は、「α２，３－およびα２，６－シアリル化を含む」こと、及び「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である」ことが特定されているのに対し、引用発明は、α２，３－シアリル化は含むもののα２，６－シアリル化は含まず、また、総シアリル化に占めるα２，３－シアリル化の割合も特定されていない点で相違する（以下「相違点」という。）。 （２）判断 ア　相違点について 上記相違点について検討する。 （ア）　引例２に、組み換え体糖タンパク質に対し、α２，６Ｇａｌ結合及びα２，３Ｇａｌ結合でシアル酸を加えることにより糖タンパク質のシアリル化パターンを変えること、及びα２，６Ｇａｌ結合及びα２，３Ｇａｌ結合の両方は、ヒト血漿糖タンパク質の窒素に結合しているオリゴ糖上に存在するものであることが記載され（摘記事項（２－ア）、（２－イ））、また、引例６に、天然のヒト糖タンパク質は、通常、α２，６－及びα２，３－結合の両方にシアル酸を含むこと、及びα２，３－及びα２，６－シアル酸の所望の比率を生産するＣＨＯクローンはより自然なグリコシル化タンパク質を生産するものであることが記載され（摘記事項（６－イ）、（６－エ））、さらに、引例７に、α２，６－シアリルトランスフェラーゼのｃＤＮＡにより形質転換したＣＨＯ細胞によって生産された糖タンパク質は、ヒトの糖タンパク質と同様、α２，６－及びα２，３－の両方の結合末端のシアル酸残基を示すことが記載されている（摘記事項（７－ア））。 そうすると、組換えヒト糖タンパク質としては、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を含むものの方が、より天然のヒト糖タンパク質に近いことが本願優先日当時の当業者の技術常識であったといえる。 （イ）　引例２に、ST3Gal III及びST6Gal Iシアリルトランスフェラーゼを用いた再シアリル化反応により、２つの結合、すなわちα２，３－及びα２，６－結合を有するタンパク質を提供ことが記載されるとともに、その対象となる組換え糖タンパク質として、α１－アンチトリプシン、エリスロポエチン、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、アンチトロンビンＩＩＩ、インターロイキン６、インターフェロンβ、プロテインＣ、フィブリノゲンなどが例示され（摘記事項（２－ア）、（２－イ））、そして、引例５に、α２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入したＣＨＯ細胞により、α２，３結合型及びα２，６結合型の両シアル酸が付加された形のＴＰＯを発現させることが記載され（摘記事項（５－ア））、また、引例６に、ｈＩＦＮ－γを産生するＣＨＯ細胞株に、ST3Gal IV及びST6Gal IのｃＤＮＡを導入し、α２，３－及びα２，６－シアル酸の両方を含むｈＩＦＮ－γを産生することが記載され（摘記事項（６－ア）、（６－ウ）、（６－エ））、さらに、引例７に、α２，６－シアリルトランスフェラーゼ（α２，６－ＳＴ）のｃＤＮＡで形質転換したＣＨＯ細胞により、α２，６結合及びα２，３結合のシアル酸を有するＩＦＮ－γを生産し、そののシアリル化パターン及び生物学的活性を確認したことが記載されている（摘記事項（７－ア）及び（７－イ））。 そうすると、種々の糖タンパク質を対象として、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を含む組換え糖タンパク質を調製すること、及び、その際に、α２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入したＣＨＯ細胞を用いることは、本願優先日当時の当業者の周知技術であったといえる。 （ウ）　引例２に、糖タンパク質の清掃速度すなわちクリアランス速度の減少による治療的半減期の増加や、その免疫応答の抑制又は排除を目的に、該糖タンパク質のシアリル化パターンを最適なものとすることが記載されており（摘記事項（２－ア）、（２－イ））、そして、引例４に、α２，６結合及びα２，３結合というシアル酸結合の差異が生物活性を決定する上で重要な役割を果たす可能性があることが記載されており（摘記事項（４－ア））、また、引例６に、α２，３－とα２，６－シアル酸の比率は、α２，３－ＳＴのα２，６－ＳＴに対する割合に対応し、α２，３－及びα２，６－シアル酸の所望の比率を生産するＣＨＯクローンは、論理的には、α２，３－ＳＴのα２，６－ＳＴに対する活性の割合を変更することによって得ることができることが記載され（摘記事項（６－ア）、（６－エ））、さらに、引例７には、組換えＩＦＮ－γすなわち組換え糖タンパク質のシアリル化パターン及び生物学的活性を確認したことが記載されている（摘記事項（７－イ））。 （エ）　前記（ア）及び（イ）に示した当業者の技術常識や周知技術、前記（ウ）に示した知見、並びに、引用発明が、組換えヒトＦＳＨの有効性を高めることを目的とし（摘記事項（１－ア）、（１－イ））、及びヒト患者の治療に使用されるものであること（摘記事項（１－ウ））をも考慮すれば、当業者であれば、より天然のヒト糖タンパク質に近いものとすること自体を目的として、あるいは、より天然のヒト糖タンパク質に近いものとすることによって、ヒトに用いた際の免疫応答の抑制や治療的半減期の増加を期待して、引用発明を、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を含む組換えヒトＦＳＨとして調製しようとし、また、その際に、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の比率についても検討するといえ、その具体的手段も、少なくとも以下に示すａ及びｂという、当業者が容易になし得る２通りの手段があったといえるから、これらの手段のいずれによっても、引用発明の組換えヒトＦＳＨを、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の両方を含み、かつ、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化を所望の比率で有する組換えヒトＦＳＨとして調製することが可能であったといえる。 ａ　摘記事項（１－カ）からみて、引例１には、ＦＳＨを発現している細胞を、シアリルトランスフェラーゼをコードする遺伝子で形質転換することが記載されており、また、前記（イ）のとおり、α２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入したＣＨＯ細胞を用いて、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を含む組換え糖タンパク質を調製することは本願優先日当時の当業者の周知技術であり、さらに、前記（ウ）のとおり、α２，３－シアリルトランスフェラーゼとα２，６－シアリルトランスフェラーゼの活性の割合を調整することにより、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の比率を変更することができるから、α２，６－シアリルトランスフェラーゼｃＤＮＡを導入したＣＨＯ細胞を組換えヒトＦＳＨの生産に用いることにより、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の両方を含む組換えヒトＦＳＨを得ること、及び、その際に、α２，３－シアリルトランスフェラーゼとα２，６－シアリルトランスフェラーゼの活性の割合を調整することにより、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の比率を所望のものに調整することは当業者が容易になし得ることである。 ｂ　引用発明の組換えヒトＦＳＨはα２，３－シアリル化は含むもののα２，６－シアリル化は含まないが、摘記事項（１－エ）及び（１－オ）からみて、引例１には、シアリルブースティングにおいて、α２，６－シアリルトランスフェラーゼである「ST6Gal I」や「ST6Gal II」を用いることが記載されているから、引用発明の組換えヒトＦＳＨを、「ST6Gal I」や「ST6Gal II」等のα２，６－シアリルトランスフェラーゼで処理し、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の両方を含む組換えヒトＦＳＨを得ること、及び、その際に、α２，６－シアリルトランスフェラーゼによる処理条件を調整することにより、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の比率を所望のものに調整することは当業者が容易になし得ることである。 （オ）　以上のとおりであるから、引用発明の組換えヒトＦＳＨを、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の両方を含み、かつ、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化を所望の比率で有する、すなわち、総シアリル化に占めるα２，３－シアリル化を所望の割合で有する組換えヒトＦＳＨとして調製することは、上記ａ及びｂいずれの手段によっても、当業者が容易になし得ることである。 そして、本願発明の組換えＦＳＨについて、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である」ことが特定されているものの、α２，３－シアリル化の割合を上記範囲に調整することに技術的な困難性は見出せないから、このようなα２，３シアリル化の割合は当業者が適宜調整しうる範囲の一つに過ぎないといえる。 したがって、引用発明において、上記相違点の構成を採用することは、当業者が容易になし得ることである。 イ　本願発明の効果について 本願発明の組換えＦＳＨについて、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である」と特定されることにより奏される効果について検討する。 本願明細書の【００１３】には、本願発明の課題として、「ヒト尿からもたらされる産物の生理化学的および薬物動態学的特性をより厳密に再現または模倣するｒＦＳＨ産物を有することが望まれている。既知の組換え産物と比較して薬物動態学的特性（複数可）が向上したｒＦＳＨ産物を有することが望まれている。」と記載され、【００１５】には「実施例４では、α２，３結合シアル酸およびα２，６結合シアル酸のレベルが両方とも低いグリカンを含有するＦＳＨを発現した組換えＦＳＨ細胞系が作製された（図６）。シアル酸含有量が限定されているこの塩基性物質（図４）は、予測どおり、ラットの循環から非常に迅速に除去された（図７）。その後、この細胞系を、α２，６－シアリル－トランスフェラーゼをコードする遺伝子を付加する第２の操作・・・ステップに供した（実施例５）。その結果生じたｒＦＳＨは、高度にシアリル化されており、尿のＦＳＨと同様のシアル酸含有量およびｐＩ分布を示した（図５）。しかしながら、この物質は、シアル酸含有量が低かった元の物質と同様の速度でラットの循環から非常に迅速に除去された（図８）。天然の生物学的に活性なＦＳＨのシアル酸の一部は、α２，６結合であることが知られているため、これは予期しない観察だった。」と記載され、【００１７】には「驚くべきことに、本出願者らは、本発明のｒＦＳＨが、他の組換え産物より、天然ヒト尿産物の生理化学的および薬物動態学的特性をより厳密に再現または模倣することができることを見出した。」と記載され、【００１８】には「本発明は、α２，３シアル酸およびα２，６シアル酸の混在する、したがってより厳密に天然ＦＳＨに類似している組換え型ＦＳＨである。ＩＶＦ技術における卵巣刺激および排卵誘発の制御に本化合物を使用すると、その結果として既存の組換え産物と比較してより自然な卵巣刺激がもたらされることになることが予想される。」と記載されている。 以上の記載から、本願発明が、天然ＦＳＨに類似し、既知の組換え産物と比較して薬物動態学的特性が向上している組換えＦＳＨを提供することを課題とすること、及び組換えＦＳＨにおいて、α２，３シアリル化及びα２，６シアリル化のレベルが両方とも低いものや、高度にα２，６シアリル化されたものは、ラットの循環から非常に迅速に除去されてしまう、すなわち、半減期が短いことが理解できる。 しかし、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の比率について、本願明細書の実施例では、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化」とは異なる範囲である、「α２，３シアリル化は６５％～８５％の範囲・・・であり、α２，６シアリル化は１５％～３５％・・・」の範囲であるものが実施例８ｂに記載されるに止まり、他の実施例を参照しても、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の比率は記載されていない。そして、本願明細書の【００２２】には「本発明によるｒＦＳＨ・・・は、総シアリル化の１０％以上が、α２，３シアリル化であってもよい。例えば、総シアリル化の２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、または９０％以上が、α２，３シアリル化であってもよい。ｒＦＳＨ・・・は、総シアリル化の６５～８５％、例えば総シアリル化の７０～８０％、例えば総シアリル化の７１～７９％の量のα２，３シアリル化を含んでいてもよい。本発明のｒＦＳＨ・・・は、総シアリル化の５０％以下が、α２，６シアリル化であってもよい。例えば、総シアリル化の４０、３０、２０、１０、または５％以下が、α２，６シアリル化であってもよい。ｒＦＳＨ・・・は、総シアリル化の１５～３５％、例えば総シアリル化の２０～３０％、例えば総シアリル化の２１～２９％の量のα２，６シアリル化を含んでいてもよい。」（下線は当審にて付した。）と記載されているものの、全て「であってもよい」又は「含んでいてもよい」とされていることから、これらの記載は例示に過ぎず、これらの記載から、ここで示された範囲内であることの利点や、範囲を逸脱することによる欠点を理解することはできない。 したがって、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化」である組換えＦＳＨが、具体的に如何なる効果を備え、既知の組換え産物と比較して薬物動態学的特性がどの程度向上しているのかを本願明細書の記載から理解することはできない。 この点について、審判請求書において、請求人は、「・・・国際公開ＷＯ２０１２／０１７０５８号公報では、その表４に示されるようなα２，３シアリル化４３％であり、α２，６シアリル化５７％である組換えＦＳＨ・・・が、α２，３シアリル化１００％のＧｏｎａｌ　Ｆや、α２，３シアリル化７５％でありα２，６シアリル化２５％であるＢｒａｖｅｌｌｅと比較して、約２倍のＣｍａｘを示し、２５ＩＵの単回投与では、本願発明の範囲に含まれるＦＳＨのみが卵胞増殖効果を示しています。また、国際公開ＷＯ２０１５／１５８８７５号公報は、国際公開ＷＯ２０１２／０１７０５８号公報の臨床試験結果を記載していますが、Ｇｏｎａｌ　Ｆの１／２または３／４の用量でも、これより高い卵胞成長促進効果を示します（表２および４）。このように本願発明が優れていることは、これらの追加的資料からも理解できる」と主張するものの、前記のとおり、本願明細書には、実施例を含めて、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化」である組換えＦＳＨそのものや当該組換えＦＳＨの有する効果が明記されていないので、本願発明の効果を、本願優先日より後に公開された公報の記載内容により補うことはできない。もっとも、上記公報において薬理効果が裏付けられている組換えＦＳＨは、ＤＳＭ　ＡＣＣ３０７８として本願出願日後に寄託された、すなわち、本願優先日当時には入手することが困難であったというべきヒト細胞株ＧＴ－５ｓから調製される特定のグリコシル化パターンを持つものであり、上記公報に記載された薬理効果が、本願発明の組換えＦＳＨの薬理効果を示すものであるとはいえない。したがって、請求人の上記主張を採用することはできない。 以上からみて、本願発明の組換えＦＳＨについて、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である」と特定されることにより当業者が予測できない顕著な効果が奏されているとは推認できず、この点からみても、このようなα２，３シアリル化の割合は当業者が適宜調整しうる範囲の一つに過ぎないといえる。 （３）平成３０年５月２日提出の意見書における請求人の主張について ア　本願発明の非容易想到性について （ア）請求人の主張 引例１には、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を有する組換えＦＳＨに当業者を動機付ける記載は存在せず、加えて、総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である組換えＦＳＨに当業者を動機付ける記載は存在しない。また、引例１の高シアリル化ＦＳＨは非常に満足のいくものであるから、これを更に改変する動機付けを当業者に与えるものではない。さらに、引例２～７のいずれにも、α２，３－及びα２，６－シアリル化を含むことと、総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化であることとで特定された発明については示唆も開示もなされてない。 （イ）検討 引例１に、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を合わせて有することの重要性が明示的に記載されていなくとも、前記（２）ア（エ）で検討したとおり、当業者であれば、引用発明をより天然に近いものあるいはより効果的なものとするために、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を含む組換えヒトＦＳＨとして調製しようとし、また、その際に、α２，３－シアリル化及びα２，６－シアリル化の比率についても検討するといえ、その具体的手段も、前記（２）ア（エ）ａ及びｂで検討したとおりである。 さらに、本願発明の組換えＦＳＨについて、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化である」ことが特定されているものの、α２，３－シアリル化の割合を上記範囲に調整することに技術的な困難性は見出せず、かつ、α２，３－シアリル化の割合を上記範囲に特定することにより当業者が予測できない顕著な効果が奏されているとも推認できないから、このようなα２，３シアリル化の割合は当業者が適宜調整しうる範囲の一つに過ぎないというべきことは、前記（２）ア（オ）及び（２）イで検討したとおりである。 したがって、この点における請求人の主張を採用することはできない。 イ　本願発明の効果について （ア）請求人の主張 本願明細書の【００１５】には、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化とを低いレベルで含有するＦＳＨも、高度にα２，６－シアリル化したＦＳＨも迅速にラット循環から除去されることが記載されているところ、本願発明の組換えＦＳＨは、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の両方を有し、より天然のＦＳＨに類似する一方、上記のような過剰なα２，６－シアリル化を有さず、迅速にクリアランスされにくいものである。そして、本願の実施例１～５に、α２，３－シアリルトランスフェラーゼで遺伝子操作された２０２クローン、及びα２，６－シアリルトランスフェラーゼで遺伝子操作された２１０クローンが開示されており、実施例８ｂの組換えＦＳＨは、様々なシアリル化を有する組換えＦＳＨの一例に過ぎない。また、α２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化とを有する上に、総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化であることで確かに優れた活性を有することは、国際公開第２０１２／０１７０５８号及び国際公開第２０１５／１５８８７５号に示されている。 （イ）検討 確かに、実施例１～５を通じ、α２，３－シアリルトランスフェラーゼで遺伝子操作された２０２クローン、及びα２，６－シアリルトランスフェラーゼで遺伝子操作された２１０クローンを得た旨が記載されてはいるものの、これらのクローンにおけるα２，３－シアリル化とα２，６－シアリル化の比率の具体的数値はおろか、その数値範囲も記載されてはおらず、そもそも本願明細書に様々なシアリル化を有する組換えＦＳＨが記載されていると解することはできない。 そして、前記（２）イで検討したとおり、本願明細書の実施例には、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化」とは異なる範囲である、「α２，３シアリル化は６５％～８５％の範囲・・・であり、α２，６シアリル化は１５％～３５％・・・」の範囲であるものが実施例８ｂに記載されるに止まり、「総シアリル化の４０～５０％がα２，３シアリル化」である組換えＦＳＨが、具体的に如何なる効果を備え、既知の組換え産物と比較して薬物動態学的特性がどの程度向上しているのかを本願明細書の記載から理解することはできないのである。 また、前記（２）イで検討したとおり、本願発明の効果を、本願優先日より後に公開された公報である国際公開第２０１２／０１７０５８号及び国際公開第２０１５／１５８８７５号の記載内容により補うこともできないのである。 したがって、この点における請求人の主張を採用することはできない。 第６　むすび 以上のとおり、本願発明は、引例１に記載された発明及び引例２～７に記載された事項に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。 したがって、他の請求項に係る発明について検討するまでもなく、本願は拒絶されるべきものである。 よって、結論のとおり審決する