2022-005123

特願２０２０－５０５３２０「アミロイド沈着疾患を治療するための方法および組成物」拒絶査定不服審判事件〔平成３１年 ２月 ７日国際公開、ＷＯ２０１９／０２７７２１、令和 ２年１０月１５日国内公表、特表２０２０－５２９９９０〕について、次のとおり審決する。

結 論 本件審判の請求は、成り立たない。

理 由 第１ 出願の経緯 本願は、２０１８年（平成３０年）７月２４日（パリ条約に基づく優先権主張外国庁受理２０１７年８月１日（ＵＳ）アメリカ合衆国、平成３０（２０１８）年３月２日（ＵＳ）アメリカ合衆国）を国際出願日とする特許出願であって、その主な手続の経緯は次のとおりである。 令和 ３年 ４月１４日付け 拒絶理由通知 同年１０月２６日 意見書および手続補正書の提出 同年１１月２９日付け 拒絶査定 令和 ４年 ４月 ６日 審判請求書及び手続補正書の提出 同年 ５月１８日 手続補正書（方式）の提出 （「請求の理由」の内容を補正するもの） 令和 ５年１０月１８日付け 拒絶理由通知（当審による） 令和 ６年 ３月２１日 意見書および手続補正書の提出（以下、この手続補正書による手続補正を「本件補正」という。） 第２ 本願発明 本件補正によって補正された特許請求の範囲の請求項１４に係る発明（以下、「本願発明」という。）は、以下のとおりである。 「κまたはλ軽鎖原線維凝集体沈着物を含む原発性アミロイドーシスを有するヒト患者のκおよび／またはλ軽鎖原線維凝集体沈着物の量を減少させるために使用の医薬組成物であって、 前記医薬組成物は、抗体と、薬学的に許容される担体と、を含み、 前記抗体は、 （ａ）配列番号４７を含むＶＫ領域、 （ｂ）配列番号４８を含むＶＨ領域、および （ｃ）ヒトＩｇＧ１定常領域、を含み、 前記抗体は、配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を含むマウス抗体よりも高い親和性でアミロイド原線維のエピトープに結合する、医薬組成物。」 第３ 拒絶の理由 令和５年１０月１８日付け拒絶理由通知書において当審が通知した拒絶理由のうち、「理由１（進歩性）」で通知した拒絶理由は、概略、次のとおりのものである。 この出願の請求項１～２１に係る発明は、その出願前に日本国内又は外国において、頒布された下記の刊行物に記載された発明又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった文献である引用文献２に記載された発明及び引用文献１に記載された技術的事項、並びに、本願優先日における技術常識（引用文献３）に基づいて、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。 １．Ｂｌｏｏｄ， ２０１５， １２６（２３）：１８８ ２．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，Ｖｏｌ．９，Ｎｏ．１０， ｐ．３８３１Ｓ－３８３８Ｓ ３．医学のあゆみ， ２０１５， Ｖｏｌ．２５２， Ｎｏ．１０， ｐ．１０８７－１０９２ 第４ 引用文献の記載及び引用発明 １ 各引用文献に記載された事項 （１）引用文献２の記載事項 本願優先日前に頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった文献であり、令和５年１０月１８日付けの拒絶理由通知で引用した上記引用文献２（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，Ｖｏｌ．９，Ｎｏ．１０， ｐ．３８３１Ｓ－３８３８Ｓ）には、以下の記載がある。引用文献２は英文で記載されているので、当審合議体による訳文で記載する。なお、「・・・」は摘記の省略を示し、下線は当審合議体が付した。 ア（３８３１ｓページ“Ａｂｓｔｒａｃｔ”の項） 「目的：我々は以前、ある種のマウス抗ヒト軽鎖モノクローナル抗体（ｍＡｂｓ）が、ＡＬや他のタイプのアミロイド線維に共通するエピトープを認識することを報告した。この証拠に基づいて、そのような抗体の一つである１１－１Ｆ４を、ヒトＡＬ抽出物のｓ．ｃ．注射によって誘導されたＡＬアミロイドーマを持つマウスに投与した。このｍＡｂはアミロイドに結合し、Ｆｃを介した細胞炎症反応を開始し、腫瘍塊を急速に縮小させた。この試薬を臨床用に開発するため、１１－１Ｆ４ ｍＡｂをキメラ化し、その活性を未修飾抗体の活性と比較した。 実験デザイン：キメラ（ｃ）１１－１Ｆ４ ｍＡｂは、マウス１１－１Ｆ４重・軽鎖可変領域（ＶＨ、ＶＬ）とヒト重・軽鎖定常領域（ＣＨ、ＣＬ）をコードするスーパーベクターＤＮＡをトランスフェクトしたＣＨＯｄｈｆｒ安定哺乳動物細胞株で産生された。この抗体産物を２つのｉｎ ｖｉｖｏ実験モデルで、線維結合活性とアミロイド溶解能を解析した。 結果：ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂがアミロイドと相互作用する能力はｉｎ ｖｉｔｒｏで証明された。この試薬をヒトＡＬ腫瘍または全身性ＡＡ沈着マウスに投与したところ、動物に毒性は認められず、アミロイド負荷が顕著に減少した。 結論：これらの結果から、ＧＭＰグレードのｃ１１－１Ｆ４を製造し、原発性（ＡＬ）アミロイドーシス患者を対象とした第Ｉ／ＩＩ相臨床試験を行い、試薬の有効性を判定することにした。アミロイド反応性抗体の使用は、この必ず死に至る疾患の治療における新しいアプローチとなるであろう。」 イ（３８３１ｓページ右欄下から８行～３８３２ｓページ左欄４１行） 「材料および方法 ｍ１１－１Ｆ４抗体重鎖および軽鎖可変領域遺伝子のＰＣＲクローニングと配列決定。ＩｇＧ１ ｍ１１－１Ｆ４アミロイド反応性ｍＡｂを産生するＳＰ２／０ハイブリドーマ細胞株から２つのクローン（Ｂ２Ｃ４とＢ２Ｄ６）をＡＥＲＥＳ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｌｔｄ． （Ｍｉｌｌ Ｈｉｌｌ）に提供した。（Ｍｉｌｌ Ｈｉｌｌ）に提供された。細胞は、２０％（ｖ／ｖ）のウシ胎児血清（Ｈｙ－ｃｌｏｎｅ， Ｌｏｇａｎ， ＵＴ）、ペニシリン／ストレプトマイシン、Ｌ－グルタミン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ， Ｉｎｃ．）を添加したＤＭＥＭ培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ， Ｉｎｃ．， Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ） で培養した。１０８個の生存細胞まで増殖させた後、各クローンから総ＲＮＡを単離し（ＲＮＡ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｋｉｔ； Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ， Ｌａ Ｊｏｌｌａ， ＣＡ）、調製したＮｏｔＩ－ｄ（Ｔ）１８プライマーを用いて第１鎖ｃＤＮＡを合成した。 次に、ＡｍｐｌｉＴａｑ ＤＮＡポリメラーゼを用いて、ＪｏｎｅｓとＢｅｎｄｉｇ（１４）が記述しているように、それぞれのｃＤＮＡ鋳型からｍＶＨとＶＬ（Ｖκ）遺伝子をＰＣＲ増幅した。異なる変性リーダー配列－特異的ＶＨとＶκ、および適切なＣＨとＣＬプライマー（Ｃγ１、Ｃγ２ａ、Ｃγ２ｂ、Ｃγ３、Ｃκの等モル混合）を用いて別々のＰＣＲを行った。産物は、０．５ｇ／ｍｌのエチジウムブロミドを含む１％アガロース／トリスホウ酸塩（ｐＨ８．８）ゲル上での電気泳動により同定した。推定陽性産物（～４５０ｂｐ）を、Ｔｏｐｏ ＴＡ クローニングキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ， Ｃａｒｌｓｂａｄ， ＣＡ）に含まれるｐＣＲ２．１ベクターに直接クローニングし、メーカーに記載されたプロトコルを用いてＴＯＰ１０コンピテントセルに形質転換した。４５０ｂｐを挿入したプラスミドを含むコロニーを、ＧｕｓｓｏｗとＣｌａｃｋｓｏｎの方法（１５）に従って、１７－および２１－ｍｅｒオリゴヌクレオチドプライマーを用いたＰＣＲスクリーニングによって選択し、二本鎖ＤＮＡをＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ３１０ Ｇｅｎｅｔｉｃ ＡｎａｌｙｚｅｒとＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ ＢｉｇＤｙｅターミネーターを用いて塩基配列を決定した。具体的に設計されたＰＣＲプライマーを使用して、１１－１Ｆ４ ＶＨおよびＶκ遺伝子の５’および３’末端を改変して、哺乳動物細胞におけるそれらの産物の一過性発現を得た。バックプライマーは、ＨｉｎｄＩＩＩ制限およびＫｏｚａｋ翻訳開始部位、ならびに免疫グロブリンリーダー配列を導入した。フォワードＶκプライマーは、スプライスドナーおよびＢａｍＨＩ制限部位を提供し、そしてＶＨについては、ＡｐａＩ制限部位を含むＣγ１遺伝子の最初の２２ ｂｐを提供した。正確に修飾された１１－１Ｆ４ ＶＨおよびＶκ遺伝子を含有する陽性ＰＣＲ産物を前述のように同定し、ＨｉｎｄＩＩＩ－ＡｐａＩ（ヒトγ１、Ｇｍ１アロタイプ）およびＨｉｎｄＩＩＩ－ＢａｍＨＩ（ヒトＣκ、Ｋｍ３アロタイプ）断片としてそれぞれの発現ベクターにサブクローニングした。次に、ライゲーションしたＶκおよびＶＨ構築物を用いてＤＨ５コンピテント細胞を形質転換し、ＰＣＲスクリーニングにより陽性クローンを選択した。 ＣＯＳ細胞におけるｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂの一過性発現のための単一スーパーベクターの構築。ｃ１１－１Ｆ４抗体の両方の鎖を発現する単一のスーパーベクターを、重鎖および軽鎖発現カセットのＥｃｏＲＩ制限酵素消化産物を連結することによって構築した。 ウ（３８３２ｓページ右欄３行～１１行） 「ＣＨＯｄｈｆｒ哺乳動物細胞のトランスフェクション。 ・・・ＰＢＳ中の１０７細胞／ｍｌのアリコートを、Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｇｅｎｅ Ｐｕｌｓｅｒを用い、１９００Ｖ、２５μファラドの静電容量で、１３μｇの１１－１Ｆ４スーパーベクターＤＮＡでトランスフェクトした。」 エ（３８３２ｓページ右欄４２行～５４行） 「ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂの産生および精製。 インビトロおよびインビボ研究に利用可能な十分な量のｃ１１－１Ｆ４抗体を得るために、３つのＣＨＯｄｈｆｒ安定細胞株（２２Ｃ１、２２Ｃ５、および２２Ｄ２）を、α－ＭＥＭ、１０－６ Ｍ ＭＴＸ、および５０μｇ／ｍｌゲンタマイシンを含む単一のＩｎｔｅｇｒａ ＣＬ１０００産生フラスコ（・・・）中で１ヶ月間増殖させた。上清を約５ ｍｌまで濃縮し、Ｐｉｅｒｃｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ結合緩衝液中で１：１に希釈し、そして抗体を、Ｉｍｍｕｎｏｐｕｒｅ Ｐｌｕｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（・・・）を使用して、製造業者によって特定されるように単離した。次いで、溶出および中和した物質を、Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ透析カセット（・・・）を使用してＰＢＳ中で一晩透析し、滅菌濾過し、１ ｍｌ容量にアリコートし、そして－２０℃で凍結した。」 オ（３８３３ｓページ左欄５行～９行） 「Ｉｎ Ｖｉｖｏモデル。 ＢＡＬＢ／ｃマウスに、前述（１３）のように、原発性（ＡＬ）アミロイドーシス患者の肝臓または脾臓から抽出したヒトアミロイド線維を肩甲骨間１００ｍｇ注射することにより、皮下アミロイドーマを誘導した。」 カ（３８３３ｓページ左欄１４行～４５行） 「結果 ｃ１１－１Ｆ４抗体の生成。 ｍ１１－１Ｆ４ ＶＨおよびＶκ遺伝子をクローニングするように設計された複数のＰＣＲ反応により、Ｂ２Ｃ４およびＢ２Ｄ６ハイブリドーマ細胞株の両方から予想サイズ（約４５０ ｂｐ）の産物が得られた。それぞれからの少なくとも３つのクローンからのＰＣＲ産物の分析により、予想される重鎖および軽鎖配列が得られた。改変されたマウスＶＨおよびＶκ１１－１Ｆ４遺伝子構築物（「材料および方法」を参照のこと）を、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域遺伝子とともに、それらのそれぞれの哺乳動物発現ベクター中に首尾よくクローニングし、そしてＣＯＳ細胞の同時トランスフェクションのために使用した。両方の種由来の免疫グロブリン遺伝子から構成される単一のスーパーベクターもまた、この目的のために調製した。スーパーベクターで達成された実質的により高い発現レベルのために、この構築物を使用して、ＣＨＯｄｈｆｒ－哺乳動物細胞をトランスフェクトし、続いてＭＴＸを含むまたは含まない培地中で培養した。増幅株のうち３株（２２Ｃ１、２２Ｃ５、２２Ｄ２）は、抗体産生率が最も高く（それぞれ５０．６、４２．５、４７μｇ／１０６細胞／日）、倍加時間はおよそ４８－６０時間であった。９６時間の指数関数的成長では３系統は同じ速度で増殖したが、この期間中に２２Ｃ１の生産量は３１から３７μｇ／１０６細胞／日に増加したのに対し、２２Ｃ５と２２Ｄ２の生産量はそれぞれ２４から２０μｇ、３４から３１μｇに減少した。安定生育期間中、初期生菌数と９６時間生菌数の平均に基づく生産量は同程度であった（それぞれ２４．７、２１．５、２０．５ μｇ／１０６細胞／日）。同様に、１ヵ月の培養期間中、培地中の抗体濃度は比較的安定していた。３つのＣＨＯ細胞株（２２Ｃ１、２２Ｃ５、２２Ｄ２）とその産物は、細菌、真菌、マイコプラズマに汚染されておらず、エンドトキシンレベルも許容範囲であった（それぞれ０．７、１．１、２３．４単位／μｇ）。」 キ（３８３３ｓページ右欄下から６行～３８３４ｓページ右欄２０行） 「Ｉｎ Ｖｉｖｏ分析。我々のｉｎ ｖｉｖｏアミロイドーマモデルにおいて、アミロイド溶解を促進するＩｇＧ１κ ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂの有効性を、マウス親のものと比較した。・・・最初の実験では、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ウェスタンブロット、および化学分析によって示されたように、アミロイド前駆体κ１軽鎖（ＢＪＰ、ＨＩＧ）の主要部分を表す断片（約１６ｋＤａおよび１８ｋＤａ）からなるヒトＡＬκ抽出物（参考文献１９；患者ＨＩＧ）１００ｍｇを含む溶液１ｍｌを４匹にｓ．ｃ．注射した。・・・原線維抽出物の注射から４８時間後、４組のうち２組にｍＡｂまたはｃｍＡｂのどちらか一方を１００μｇの静脈内注射をした。この処置を４、６、８、１０、１２日目に繰り返した（すなわち、各マウスは合計６００μｇの抗体を投与された）。・・・ アミロイド誘導から約１１日後、ｍＡｂを注射したマウスの腫瘍は小さくなり始めた。各組から１匹を１５日目に安楽死させたところ、１１－１Ｆ４投与マウスのアミロイドーマは対照２匹よりも明らかに小さくなっていた（図６）。・・・表２に示すように、ｍ１１－１Ｆ４ ｍＡｂを投与された２匹のマウスの残存アミロイドーマの湿重量は、キメラ抗体投与マウスの湿重量よりやや少なかった。しかしながら、どちらの場合もコントロールと比較して大きさは著しく減少した、すなわち、それぞれ平均８３％と７０％であった。」 ク（３８３５ｓページ左欄下から４行～右欄１０行） 「アミロイド原性λ３ ＢＪＰ ＢＡＬの１６ｋＤａ軽鎖フラグメントを主に含むヒトＡＬλ（患者ＢＡＬ）抽出物を注射したマウスにおいて、ｃおよびｍ１１－１Ｆ４ ｍＡｂの治療効果を比較するために同一のプロトコルを用いた。ｍ１１－１Ｆ４ ｍＡｂを投与した動物のうち１匹のアミロイドーマは１２日目に退縮し始めたので、４組の各マウスから１匹を１５日目に犠牲にした。ｍおよびｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂ処置動物から摘出されたアミロイドーマの質量は、対照と比較してそれぞれ７５％および１５％減少していた（表３）。残りの一群は２１日目に安楽死させた；この場合、アミロイドーマはそれぞれ５８％と４３％減少した。アミロイドーマの顕微鏡検査の結果は、ＡＬκ ＨＩＧ研究で述べたものと同様であった。」 ケ（３８３３ｓページ右欄１～１３行） 「Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ分析。３つのｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂｓの特性を表１にまとめた。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（図１）およびウェスタンブロット分析により、これらの分子はキメラＩｇＧ１重鎖および軽鎖として予想される分子量を有することが示された。これらの分析はまた、４℃、３７℃、７０℃で１－４時間保存した後の抗体産物の安定性を示した。他の実験では、ｃおよびｍ１１－１Ｆ４ｍＡｂｓと合成ＡＬアミロイド線維との結合をＥＬＩＳＡで測定し、ｃおよびｍ１１－１Ｆ４ｍＡｂｓと合成ＡＬアミロイド線維との結合をＥＬＩＳＡで測定し同等の結果が得られた（図２）。さらに、サイズ排除ＨＰＬＣの結果から、キメラ抗体調製物には目立ったタンパク質の凝集体は含まれていないこと、すなわちほぼ完全にＩｇＧモノマーから構成されていることが示された（図３）。」 コ（３８３４ｓページ図１） ［図：0001415622000001.jpg］ 図１ 還元および非還元条件下でのｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂｓのＳＤＳ－ＰＡＧＥによる分析（クマシーブルー染色Ｎｏｖｅｘ ｂｉｓ ｔｒｉｓ ４－１２％ＮｕＰａｇｅゲル）。レーン１には分子量既知のタンパク質標準物質、レーン２にはヒトＩｇＧ ｍＡｂ、レーン４－６にはそれぞれ２２Ｃ１，２２Ｃ５，２２Ｄ２ ｍＡｂを含む。免疫グロブリン重鎖と軽鎖の位置は示した通り。 サ（３８３４ｓページ図２） ［図：0001415622000002.jpg］ 図２ ｃ１１－１Ｆ４抗体のｉｎ ｖｉｔｒｏ反応性。ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂｓ ２２Ｃ１、２２Ｃ５、２２Ｄ２およびｍ１１－１Ｆ４ ｍＡｂをＥＬＩＳＡプレートにコートした合成軽鎖線維（ＪＴＯ５）に対して結合ＥＬＩＳＡを行った。 （２）引用文献１の記載事項 本願優先日前に頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった文献であり、令和５年１０月１８日付けの拒絶理由通知で引用した上記引用文献１（Ｂｌｏｏｄ， ２０１５， １２６（２３）：１８８）には、次の事項が記載されている。なお、引用文献１は英文で記載されているため、当審合議体による訳文で摘記する。 ア（“Ｍｅｔｈｏｄｓ”の項） 「方法：本試験は、再発または難治性のＡＬアミロイドーシス患者を対象としたＣｈ ＩｇＧ１ ｍＡｂ １１－１Ｆ４の非盲検用量漸増第Ｉ相臨床試験である。本試験は、実験的治療薬の治験許可申請（ＩＮＤ）のもと、Ｃｈ ＩｇＧ１ ｍＡｂ １１－１Ｆ４を単回静脈内投与した場合の最大耐容量、忍容性および安全性を明らかにすることを主要目的として実施された。副次的目的は薬物動態、安全性、臓器反応などであった。・・・」 イ（“Ｒｅｓｕｌｔｓ”の項） 「結果：２０１５年７月１４日現在、試験を完了した６人の患者を含む用量レベル６が完了した。２人の患者は主に心臓、２人の患者は主に皮膚、２人の患者は主に胃腸（ＧＩ）の病変があった。すべての患者は投与量に耐え、グレード３、４の有害事象（ＡＥ）および死亡は発生しなかった。・・・本試験の主要目的は安全性を評価することであったが、Ｃｈ ＩｇＧ１ ｍＡｂ １１－１Ｆ４を１回注入しただけで６例中３例に臓器反応が認められた（心臓２例、消化器１例）。」 ２ 引用文献２に記載された発明 引用文献２には、前記１（１）ア、イ、カのとおり、ＳＰ２／０ハイブリドーマ細胞株であるＢ２Ｃ４およびＢ２Ｄ６が産生するマウス１１－１Ｆ４ ｍＡｂの重・軽鎖可変領域（ＶＨ、ＶＬ）と、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域をコードするスーパーベクターを構築したこと、前記１（１）ア、ウ、エ、カのとおり、前記スーパーベクターをＣＨＯｄｈｆｒ安定哺乳動物細胞株にトランスフェクトして、キメラ（ｃ）１１－１Ｆ４ ｍＡｂを産生させ、精製したこと、および、前記１（１）オ、キ、クのとおり、原発性アミロイドーシス患者からのヒトＡＬκ抽出物またはＡＬλ抽出物をマウスに注入してアミロイドーマを誘導した後、当該マウスに前記ｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂを静脈内注射したことにより、対照と比較してアミロイドーマの量が減少したことが記載されている。 また、抗体を静脈内注射する際に抗体を含む液体組成物とすることは自明である。 そうすると、引用文献２には以下の発明（以下、「引用発明」という。）が記載されていると認められる。 「原発性アミロイドーシス患者からのヒトＡＬκ抽出物またはＡＬλ抽出物をマウスに注入して誘導したアミロイドーマの量を減少させるための、ＳＰ２／０ハイブリドーマ細胞株であるＢ２Ｃ４およびＢ２Ｄ６が産生するマウス１１－１Ｆ４ ｍＡｂの重・軽鎖可変領域（ＶＨ、ＶＬ）と、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域をコードするスーパーベクターＤＮＡをトランスフェクトしてＣＨＯｄｈｆｒ安定哺乳動物細胞株で産生されたｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂを含む液体組成物。」 第５ 対比 本願発明と引用発明を対比すると次のことがいえる。 １ 引用発明の「ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂ」は、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域をコードする部分を含むＤＮＡをトランスフェクトされた細胞株から発現されたものであるから、本願発明の「（ｃ）ヒトＩｇＧ１定常領域」を含む抗体に相当する。 ２ 本願明細書の【０１０６】の「種々の剤形のための薬理学的に許容される担体は、当技術分野で知られている。例えば、固形製剤用の賦形剤、潤滑剤、結合剤および崩壊剤が知られており、液体製剤用の溶媒、可溶化剤、懸濁化剤、等張剤、緩衝剤および無痛化剤が知られている。」という記載からみて、本願発明の「薬学的に許容しうる担体」には、少なくとも液体製剤用の溶媒が含まれるものであるところ、引用発明の「ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂ」が、アミロイドーマの量を減少させるという薬理作用を有することからみて、引用発明の「ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂを含む液体組成物」は、「液体製剤用の溶媒」を含むものであるから、本願発明の「薬学的に許容しうる担体」を含む「医薬組成物」に相当する。なお、前記第４の１（１）エのように、引用発明の「ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂ」はＰＢＳ、すなわちリン酸緩衝液により透析して得られたものであること、及び技術常識からみて、引用発明の液体組成物は、本願発明の「薬学的に許容しうる担体」に相当する「緩衝剤」を含むともいえる。 そうすると、本願発明と引用発明とは、 「（ｃ）ヒトＩｇＧ１定常領域を含む抗体と、薬学的に許容しうる担体とを含む、医薬組成物」である点で一致し、以下の点で相違する。 ＜相違点１＞ 抗体が、本願発明では、「（ａ）配列番号４７を含むＶＫ領域」及び「（ｂ）配列番号４８を含むＶＨ領域」を含むのに対し、引用発明ではそのような特定がない点。 ＜相違点２＞ 医薬組成物が、本願発明は、「κまたはλ軽鎖原線維凝集体沈着物を含む原発性アミロイドーシスを有するヒト患者のκおよび／またはλ軽鎖原線維凝集体沈着物の量を減少させるための」ものであるのに対し、引用発明は、「原発性アミロイドーシス患者からのヒトＡＬκ抽出物またはＡＬλ抽出物をマウスに注入して誘導したアミロイドーマの量を減少させるための」ものである点。 ＜相違点３＞ 抗体が、本願発明では、「配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を含むマウス抗体よりも高い親和性でアミロイド原線維のエピトープに結合する」ものであるのに対し、引用発明ではそのような特定がない点。 第６ 判断 １ 相違点１について 本願発明の「（ａ）配列番号４７を含むＶＫ領域」、「（ｂ）配列番号４８を含むＶＨ領域」及び「（ｃ）ヒトＩｇＧ１定常領域」を含む抗体は、本願明細書の実施例の記載からみて、ＳＰ２／０ハイブリドーマ細胞株である２つのクローン「Ｂ２Ｃ４、Ｂ２Ｄ６」が産生する「マウス１１－１Ｆ４（ｍ１１－１Ｆ４）抗体」のＶＨおよびＶκ領域遺伝子をクローニングし（実施例１）、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域と連結してキメラ化することにより得たものであるところ（実施例２）、引用発明に係る抗体も、第４の２で認定したとおり、「ＳＰ２／０ハイブリドーマ細胞株であるＢ２Ｃ４およびＢ２Ｄ６が産生するマウス１１－１Ｆ４ ｍＡｂの重・軽鎖可変領域（ＶＨ、ＶＬ）と、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域をコードするスーパーベクターＤＮＡをトランスフェクトしてＣＨＯｄｈｆｒ安定哺乳動物細胞株で産生された」ものである。そうすると、引用発明に係る抗体は、本願発明と同一のクローンＢ２Ｃ４、Ｂ２Ｄ６が産生する、本願発明と同一のマウス１１－１Ｆ４抗体を元にして、キメラ抗体の一般的な手法、すなわち、マウス抗体のその可変領域を、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域と連結してキメラ化することにより作製した抗体であり、マウス１１－１Ｆ４抗体の可変領域にヒトＣγ１およびＣκ定常領域と連結した抗体である点で異なるところはない。 そして、本願明細書には、本願発明の抗体のＶ領域のアミノ酸配列として「配列番号４７のＶＫ領域および配列番号４８のＶＨ領域」が記載される（配列表、【図６】及び【図７】）とともに、「マウス１１－１Ｆ４（ｍ１１－１Ｆ４）抗体」のＶκ領域およびＶＨ領域のアミノ酸配列が、それぞれ配列番号３６および配列番号３５であることが記載され（配列表、【図２】及び【図３】）、キメラ化後の「配列番号４７のＶＫ領域および配列番号４８のＶＨ領域」と、キメラ化前の「マウス１１－１Ｆ４（ｍ１１－１Ｆ４）抗体」のＶκ領域（配列番号３６）とＶＨ領域（配列番号３５）のアミノ酸配列を比較すると、ＶＫおよびＶＨ両領域のアミノ酸配列は、それぞれ、キメラ化前後で保持されていることが見て取れる。そしてこのことは、一般に、キメラ抗体とは、マウス抗体の可変領域をヒト抗体の定常領域に連結したものを意味することが、本願出願日当時の技術常識であったこと（必要ならば、２００２年９月１７日日経ＢＰ社発行「日経バイオ最新用語辞典第５版」第２１５頁参照）とも符合する。 ここで、配列番号４７のアミノ酸配列に関し、配列表においては、６５及び６６番目のアミノ酸が、「Ａｒｇ Ａｓｐ（ＲＤ）」となっているが、同じく配列番号４７が記載されている図６には、６５及び６６番目のアミノ酸に相当するアミノ酸は「ＤＲ」と記載され、また、これに対応するＤＮＡ配列である配列番号４２においても、当該部位のＤＮＡ配列（２６５－２７０）は、「Ａｓｐ Ａｒｇ」をコードする「ｇａｃ ａｇｇ」と記載されているから、配列表における配列番号４７の６５番目及び６６番目の「Ａｒｇ Ａｓｐ」が「Ａｓｐ Ａｒｇ」の誤記であることは明らかである。また、配列番号３５のアミノ酸に関し、配列表においては、６０番目のアミノ酸が、「Ｌｙｓ（Ｋ）」となっているが、同じく配列番号３５が記載されている図２において、６０番目のアミノ酸に相当するアミノ酸は「Ｈ」と記載され、また、これに対応するＤＮＡ配列である配列番号３９においても、当該部位のＤＮＡ配列（１７８－１８０）は、「Ｈｉｓ（Ｈ）」をコードする「ｃａｔ」と記載されているから、配列表における配列番号３５の６０番目の「Ｌｙｓ」が「Ｈｉｓ」の誤記であることは明らかである。 そうすると、引用発明に係るｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂのＶＬ領域（ここで、前記第４の１（１）イの「ＶＬ（Ｖκ）」の記載より、ＶＬとＶκは同義である。）およびＶＨ領域は、本願発明と同様、「マウス１１－１Ｆ４（ｍ１１－１Ｆ４）抗体」に由来する、配列番号３６を含むＶκ領域、および、配列番号３５を含むＶＨ領域であり、そのアミノ酸配列は、これにヒト由来の定常領域を連結するキメラ化においても保持されるところ、配列番号３６および配列番号３５は、それぞれ配列番号４７および配列番号４８と同一のアミノ酸配列であるから、「（ａ）配列番号４７を含むＶＫ領域」及び「（ｂ）配列番号４８を含むＶＨ領域」であるといえる。 したがって、相違点１は実質的な相違点ではない。 ２ 相違点２について 前記第４の１（１）アのとおり、引用文献２には、臨床用に開発するため、１１－１Ｆ４ ｍＡｂをキメラ化し、その活性を未修飾抗体の活性と比較したこと、原発性（ＡＬ）アミロイドーシス患者を対象とした第Ｉ／ＩＩ相臨床試験を行い、試薬の有効性を判定することにしたことが記載されており、また引用文献１に記載されるように、実際に再発または難治性のＡＬアミロイドーシス患者を対象としてキメラ抗体の非盲検用量漸増第Ｉ相臨床試験が行われていること（第４の１（２）ア及びイ）が、本願優先日に公知であることからみれば、原発性アミロイドーシス患者からのヒトＡＬκ抽出物またはＡＬλ抽出物をマウスに注入して誘導したアミロイドーマ、すなわち、κまたはλ軽鎖原線維凝集体沈着物の量を減少できる引用発明を、κまたはλ軽鎖原線維凝集体沈着物を含む原発性アミロイドーシスを有するヒト患者のκおよび／またはλ軽鎖原線維凝集体沈着物の量を減少させるために使用することは、当業者であれば容易に想到し得ることである。 ３ 相違点３について 相違点１のとおり、引用発明に係る抗体は、本願発明と同一のクローンＢ２Ｃ４、Ｂ２Ｄ６が産生する、本願発明と同一のマウス１１－１Ｆ４抗体を元にして、一般的なキメラ化の手法により、その定常領域を、ヒトＣγ１およびＣκ定常領域と連結してキメラ化することで作製した抗体であり、マウス１１－１Ｆ４抗体の可変領域にヒトＣγ１およびＣκ定常領域と連結した抗体である点で異なるところはない。したがって、その機能についても当然に同一の機能を備えるはずであるといえる。 実際、前記第４の１（１）ケのとおり、引用文献２には、ｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂｓおよびｍ１１－１Ｆ４ｍＡｂｓと合成ＡＬアミロイド線維との結合をＥＬＩＳＡで測定し、その結果として、第４の１（１）サのとおり、図２に、ｍ１１－１Ｆ４よりｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂが合成ＡＬアミロイド線維との結合性が高いことが示されている。そして、前記ｍ１１－１Ｆ４は、ＳＰ２／０ハイブリドーマ細胞株から２つのクローン（Ｂ２Ｃ４とＢ２Ｄ６）が産生するマウスｍＡｂであって、前記１で述べたように、配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を有するマウス抗体であるところ、引用発明のｃ１１－１Ｆ４が、配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を有するマウス抗体ｍ１１－１Ｆ４よりも高い親和性でアミロイド原線維のエピトープに結合する抗体であることは、この点からも明らかである。 したがって、相違点３は実質的な相違点ではない。 ４ 本願発明の効果について 本願明細書では、本願発明に係るキメラ１１－１Ｆ４抗体をヒトに投与することで、λ鎖アミロイド沈着物の減少がもたらされたことが確認されている（実施例８）が、引用文献２には、前記ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂによって原発性アミロイドーシス患者からのヒトＡＬκ抽出物またはＡＬλ抽出物をマウスに注入して誘導したアミロイドーマの量を減少できたことが記載されていることからみれば（前記第４の１（１）オ、キ、ク）、ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂによって、原発性アミロイドーシスを有するヒト患者体内のκおよび／またはλ軽鎖原線維凝集体沈着物の量も減少できると予測するといえる。 また、本願明細書には、本願発明に係るキメラ１１－１Ｆ４抗体がそのマウス同等物よりも高い親和性でアミロイド原線維に結合することが示されている（実施例６、図８）が、引用文献２においても、前記３で述べたように、図２に、引用発明のｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂがｍ１１－１Ｆ４ ｍＡｂに比べて合成ＡＬアミロイド線維との結合性が高いことが示されている。 したがって、本願発明の構成により奏される効果が、引用文献２に記載された事項から当業者が予測し得ない格別の効果であるとは認められない。 ５ 請求人の主張について （１）請求人は、令和６年３月２１日提出の意見書において、「理由１」として、引用文献１および引用文献２（当審注：上記意見書の「引用文献１」および「引用文献２」は、それぞれ、「引用文献２」、「引用文献１」の誤記と認め、以下、そのように読替えをして記載する。）のいずれも、単独でも組み合わせでも、本願発明に記載のマウス－キメラ抗体の化学構造や、そのＰＣＲ修飾されたＶＨ領域又はＶＫ領域のいずれかの配列を開示または示唆していないと主張する。 しかし、前記１で述べたように、引用発明のｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂは、本願発明と同一のマウス抗体を元にして、ヒト抗体の定常領域と連結することにより得たキメラ抗体であって、マウス抗体のＶκ領域及びＶＨ領域におけるアミノ酸配列を有するものであるところ、引用文献に本願発明に記載のヒトマウス－キメラ抗体の化学構造やそのＰＣＲ修飾されたＶＨ領域又はＶＫ領域のいずれかの配列を開示していないことにより、抗体自体として、引用発明のｃ１１－１Ｆ４ｍＡｂが、本願発明の抗体と異なることにはならない。 （２）請求人は、同意見書において、「理由２」として、本願とは異なり、引用文献２には、本願のキメラ抗体を作製するためのいかなる方法も開示しまたは示唆していないと主張し、また、「理由３」として、本願とは異なり、以下ａ）～ｃ）にさらに説明するように、引用文献２の開示により、本願のキメラ抗体を作製するためのいかなる方法を容易に想到できるものではないと主張するので、以下、検討する。 ア ａ）として、請求人は、「本願明細書の段落【０１７１】の記載に示唆されているように、完全な配列をクローンし、可変領域遺伝子全体を増幅するため、この領域に隣接するプライマー、すなわちリーダー配列および定常領域配列特異的プライマーを選択しなければな」らず、一方、引用文献２は、定常領域プライマーを使用することを開示または示唆していない旨主張している。 しかし、前記第４の１（１）イのとおり、引用文献２にも、異なる変性リーダー配列－特異的ＶＨとＶκ、および適切なＣＨとＣＬプライマー（Ｃγ１、Ｃγ２ａ、Ｃγ２ｂ、Ｃγ３、Ｃκの等モル混合）を用いて別々のＰＣＲを行い、ｃＤＮＡ鋳型からｍＶＨとＶＬ（Ｖκ）遺伝子をＰＣＲ増幅したたことが記載され、「適切なＣＨとＣＬプライマー（Ｃγ１、Ｃγ２ａ、Ｃγ２ｂ、Ｃγ３、Ｃκの等モル混合）」は定常領域であるＣＨとＣＬのプライマーであるので、引用文献２には定常領域プライマーの使用が開示されている。 イ ｂ）として、請求人は、「本願実施例２に記載されているように、キメラマウス－ヒト抗体の一部として哺乳動物細胞で上記の１１－１Ｆ４のＶＨおよびＶＫ可変領域遺伝子の一過的発現を可能にするためには、特異的に設計されたＰＣＲプライマーを使用して５’末端および３’末端を改変することが必要で」あり、「特異的に設計されたＰＣＲプライマーの配列は、出願当初明細書の表５に示」され、「一方、引用文献２には、哺乳動物細胞でその産物を一過的に発現させるために、１１－１Ｆ４のＶＨおよびＶＫ遺伝子の５’末端と３’末端を修飾するために特別に設計されたＰＣＲプライマーが使用されたと述べているが、引用文献２に使用したＰＣＲプライマーの配列を開示していないため、ソロモン（当審合議体注：引用文献２の著者）はＶＨおよびＶＫ遺伝子の改変を実現し」なかった旨主張する。 しかし、前記第４の１（１）イ及びウのとおり、引用文献２には、具体的に設計されたＰＣＲプライマーを使用して、１１－１Ｆ４ ＶＨおよびＶκ遺伝子の５’および３’末端を改変し、哺乳動物細胞におけるそれらの産物の一過性発現を得、ｃ１１－１Ｆ４抗体の両方の鎖を発現する単一のスーパーベクターを、重鎖および軽鎖発現カセットのＥｃｏＲＩ制限酵素消化産物を連結することによって構築し、前記スーパーベクターをＣＨＯｄｈｆｒ哺乳動物細胞にトランスフェクションしたことが記載されており、また、前記第４の１（１）エ及びカのとおり、ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂを産生するＣＨＯｄｈｆｒ安定細胞株（２２Ｃ１、２２Ｃ５、および２２Ｄ２）が得られたこと、及び、得られたｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂについて、前記第４の１（１）ケのとおり、キメラＩｇＧ１重鎖および軽鎖として予想される分子量を有するものが得られたことが、図１（前記第４の１（１）コ、下に再掲する。）とともに記載されている。 ［図：0001415622000003.jpg］ 図１ 還元および非還元条件下でのｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂｓのＳＤＳ－ＰＡＧＥによる分析（クマシーブルー染色Ｎｏｖｅｘ ｂｉｓ ｔｒｉｓ ４－１２％ＮｕＰａｇｅゲル）。レーン１には分子量既知のタンパク質標準物質、レーン２にはヒトＩｇＧ ｍＡｂ、レーン４－６にはそれぞれ２２Ｃ１，２２Ｃ５，２２Ｄ２ ｍＡｂを含む。免疫グロブリン重鎖と軽鎖の位置は示した通り。 したがって、引用文献２に、１１－１Ｆ４ ＶＨおよびＶκ遺伝子の５’および３’末端を改変し、一過性発現するスーパーベクターを構築し、ｃ１１－１Ｆ４の取得を実現したことが記載されており、引用文献２に使用したＰＣＲプライマーの配列を開示していないことが、キメラ１１－１Ｆ４の取得が実現できなかったことを意味するものではない。 ウ ｃ）として、請求人は、「引用文献２には、「ｃ１１－１Ｆ４抗体の両方の鎖を発現する単一スーパーベクターは、重鎖および軽鎖発現カセットのＥｃｏＲＩ制限酵素消化産物を連結することによって構築された。」のみ述べ」、「ＨＣＭＶｉプロモーターを使用してスーパーベクターを構築することや、重鎖および軽鎖発現カセットの構築や、ＳＶ４０初期プロモーターおよび不完全ＳＶ４０後期プロモーターまたはｓｐａＣ２終結シグナル配列のいずれも開示して」おらず、引用文献２には、「本願明細書に開示しているスーパーベクターの構築物の実現を開示してい」ないと主張する。 しかし、前記イで述べたように、引用文献２には、ｃ１１－１Ｆ４抗体の両方の鎖を発現する単一のスーパーベクターを、重鎖および軽鎖発現カセットのＥｃｏＲＩ制限酵素消化産物を連結することによって構築し、実際にｃ１１－１Ｆ４を取得したことが、裏付けをもって示されている。 以上をまとめると、引用文献２には、本願発明の抗体と同じＶＫ領域及びＶＨ領域を有しかつヒトＩｇＧ１定常領域を有する抗体であるｃＡ１１－１Ｆ４を実際に作製し、その作製方法についても具体的に記載されているのであるから、請求人の主張は採用の限りではない。 （３）請求人は、同意見書において、「理由４」として、引用文献２に開示のキメラ抗体は、アミロイド原線維に対して、その由来となるマウス抗体の結合親和性と「同等」または「同一」の結合親和性を有するキメラ抗体であるのに対し、本願発明のキメラ抗体は「前記キメラマウス－ヒト抗体は、配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を含むマウス抗体よりも高い親和性でアミロイド原線維のエピトープに結合」するものであって、本願発明のキメラ抗体は引用文献２に開示のキメラ抗体とは異なると主張する。 確かに、引用文献２には、文言上、ＥＬＩＳＡ法により測定した合成アミノフィブリルに対する結合は、図２に示されるように、キメラ及びマウス１１－１Ｆ４で「ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ」すなわち同等であると記載されている（３８３３ｓページ右欄７－９行）。しかしながら、前記３で述べたように、前記第４の１（１）サの図２（以下、再掲する。）には、引用発明に係るキメラ抗体であるｃ１１－１Ｆ４の吸光度の方が、配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を有するマウス抗体であるｍ１１－１Ｆ４の吸光度より、全ての濃度範囲において高い値を有しており、かかる記載に基づき、キメラ抗体であるｃ１１－１Ｆ４の方が高い親和性でアミロイド原線維のエピトープに結合する抗体であると評価し得ることは当業者の技術常識に照らし明らかである。 ［図：0001415622000004.jpg］ 図２ ｃ１１－１Ｆ４抗体のｉｎ ｖｉｔｒｏ反応性。ｃ１１－１Ｆ４ ｍＡｂｓ ２２Ｃ１、２２Ｃ５、２２Ｄ２およびｍ１１－１Ｆ４ ｍＡｂをＥＬＩＳＡプレートにコートした合成軽鎖線維（ＪＴＯ５）に対して結合ＥＬＩＳＡを行った。 したがって、引用発明のｃ１１－１Ｆ４は、配列番号３６のＶκ領域および配列番号３５のＶＨ領域を有するマウス抗体ｍ１１－１Ｆ４よりも高い親和性でアミロイド原線維のエピトープに結合する抗体である。 よって、請求人の主張を参酌しても、上記１～４で説示した判断は左右されない。 ５ したがって、本願発明は、引用発明、並びに、引用文献２に記載された事項及び引用文献１に記載された事項に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。 第７ むすび 以上のとおり、本願発明は、その優先日前に日本国内又は外国において、頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった引用文献２に記載された発明、並びに、引用文献１及び引用文献２に記載された事項に基づいて、その発明の属する技術分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。 したがって、他の請求項に係る発明について検討するまでもなく、本願は拒絶されるべきものである。